刘荣华 作品数:14 被引量:46 H指数:3 供职机构: 华中科技大学同济医学院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 海外青年学者合作研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
葡萄糖调节蛋白78在乳腺癌细胞侵袭及转移中的作用 被引量:3 2008年 目的探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在乳腺癌细胞(231)侵袭、转移过程所起的作用。方法构建GRP78真核反义表达载体,转染入231细胞,利用PCR和蛋白印迹方法检测转染有反义GRP78的231细胞和MCF-7细胞的GRP78表达情况;并用伤口愈合实验和体外侵袭实验证验转染细胞转移和侵袭的变化。结果转染反义GRP78的231细胞内GRP78RNA和蛋白表达明显低于未转染细胞;反义GRP78基因对乳腺癌细胞231细胞的侵袭和转移有抑制作用。结论GRP78是乳腺癌的一个促癌基因,下调GRP78基因表达能明显抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移能力。GRP78为乳腺癌基因治疗的一个新靶点。 刘荣华 王世宣 马湘一 罗丹枫 王梅 卢运萍 马丁关键词:乳腺肿瘤 葡萄糖调节蛋白78 二肽基肽酶对前列腺癌细胞系1E8侵袭转移的影响 被引量:2 2008年 目的:探讨二肽基肽酶(DDPⅣ)对前列腺癌细胞1E8侵袭、转移的影响。方法:用亚克隆技术构建DDPⅣ基因反义真核表达质粒,脂质体法将其分别转入高转移潜能的人前列腺癌细胞1E8,并应用脂质体介导的基因转摘要目的:探讨二肽基肽酶(DDPⅣ)对前列腺癌细胞1E8侵袭、转移的影响。方法:用亚克隆技术构建DDP染技术,将重组质粒导入1E8细胞中,应用细胞增殖抑制试验(CCK-8)、蛋白印迹和体外侵袭实验等方法观察了1E8细胞转染前后,细胞生长、DDPⅣ蛋白表达以及细胞体外侵袭能力等指标的变化。结果:成功构建了反义DDPⅣ真核表达载体;将其转染入1E8细胞36h、48h后,反义DDPⅣ基因对前列腺癌细胞的侵袭和转移有促进作用;DDPⅣ基因表达下调能使1E8细胞的体内外侵袭能力增强。结论:DDPⅣ是前列腺癌的一个抑癌基因,在前列癌的侵袭转移过程中发挥着重要作用,下调DDPⅣ基因表达能明显促进前列腺癌细胞的侵袭和转移能力。提示DDPⅣ可作为前列腺癌抗侵袭治疗的分子靶点。 刘荣华 王世宣 马湘一 王梅 卢运萍 马丁关键词:前列腺癌 肿瘤转移基因 二肽基肽酶 卵巢上皮性癌中mTOR信号通路蛋白的表达及其临床意义 被引量:3 2011年 目的:研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路蛋白在人卵巢上皮性癌中的表达及其临床意义。方法:选取武汉同济医院妇产科2005~2008间手术切除并经病理证实的人卵巢上皮性癌63例,其中Ⅰ级12例、Ⅱ级15例、Ⅲ级23例、Ⅳ级13例,应用免疫组织化学法检测卵巢上皮性癌组织中mTOR信号通路关键蛋白pm-TOR、pAKT的表达,分析其与卵巢癌患者临床病理特征的关系。结果:pmTOR在各级卵巢上皮性癌中的阳性率分别为:Ⅰ级41.7%(5/12)、Ⅱ级53.3%(8/15)、Ⅲ级65.2%(15/23)、Ⅳ级69.2%(9/13),pAKT在各级卵巢上皮性癌中的阳性率分别为:Ⅰ级33.3%(5/12)、Ⅱ级40.0%(6/15)、Ⅲ级52.2%(12/23)、Ⅳ级53.8%(7/13);各阳性表达率间无统计学差异(P>0.05),但其表达水平均随着卵巢上皮性癌病理级别的增高而升高,而与病理类型无关。结论:mTOR信号通路蛋白在卵巢上皮性癌的发生发展中起重要的作用,可能是卵巢癌治疗的潜在靶点。 马湘一 范良生 刘荣华 罗丹枫 马丁关键词:卵巢上皮性癌 MTOR AKT 信号转导通路 活动后双下肢水肿2年,经量增多伴痛经3个月 2014年 1病历摘要
患者,47岁,因活动后双下肢水肿2年,经量增多伴痛经3个月,于2014年8月12日入院。患者15岁初潮,平素月经规则,月经量中等。近3个月月经量较之前明显增多,伴经期下腹痛,于6月6日到外院彩超检查示:子宫肌瘤,见数个低回声团块,后壁见4.3 cm×4.0 cm不均质回声,左侧附件区囊性包块。心脏彩超检查示:子宫主动脉瓣二瓣化畸形并中度狭窄,轻度关闭不全,可疑升主动脉-左室通道增宽。 刘荣华 王世宣关键词:经量 彩超检查 中度狭窄 新型肿瘤导向肽TMTP1融合抗菌肽抑制裸鼠胃癌和前列腺癌移植瘤的生长与转移 被引量:3 2013年 目的 探讨新型肿瘤导向肽TMTP1与抗菌肽D(KLAKLAK)2偶联后对胃癌、前列腺癌生长与转移的抑制效应.方法 建立人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤模型和胃癌裸鼠原位移植瘤模型,分别腹腔注射50 μmol/L磷酸盐缓冲液(对照组)、50 μmol/L TMTP1(TMTP1组)和50 μmoL/LTMTP1-GG-D(KLAKLAK)2[TMTP1-GG-D(KLAKLAK)2组],验证新型融合多肽TMTP1-GG-D(KLAKLAK)2对肿瘤组织的亲和能力,测量瘤体大小,行形态学观察,采用原位细胞凋亡法检测肿瘤组织的凋亡并绘制生存曲线.结果 在前列腺癌皮下移植瘤中,对照组、TMTP1组和TMTP1-GG-D(KLAKLAK)2组裸鼠的中位生存时间分别为50、55和70 d(P <0.05),肿瘤体积分别为(2.5±0.3)cm3、(1.8±0.2)cm3和(0.3 ±0.1)cm3(P <0.01).在胃癌皮下移植瘤中,对照组、TMTP1组和TMTP1-GG-D (KLAKLAK)2组裸鼠的中位生存时间分别为25、30和45 d(P <0.05),肿瘤体积分别为(3.8±0.4)cm3、(3.2 ±0.2)cm3和(0.4±0.1)cm3(p<0.01).在胃癌原位肿瘤中,对照组和TMTP1组裸鼠的胃组织可见巨大的原位肿瘤,而TMTP1-GG-D(KLAKLAK)2组原位肿瘤体积明显缩小.对照组和TMTP1组裸鼠的肝脏、脾脏和腹壁均可见白色转移灶,TMTP1-GG-D(KLAKLAK)2组裸鼠无肉眼可见转移灶.对照组、TMTP1组和TMTP1-GG-D(KLAKLAK)2组细胞的凋亡率分别为(31.9±1.5)%、(37.2±2.3)%和(69.7±2.1)%(P<0.01).结论 新型肿瘤导向肽TMTP1与抗菌肽融合后可有效抑制肿瘤的生长与转移,有望成为一种新型的抗肿瘤药物. 马湘一 李姝 罗丹枫 刘荣华 卢运萍 王世宣 马丁 奚玲关键词:前列腺肿瘤 靶向治疗 抗菌肽 裸鼠 GRP78在三种不同乳腺癌细胞的表达及其意义 被引量:6 2008年 目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在高低转移对的乳腺癌细胞的表达及其意义。方法:分别采用半定量RT-PCR,蛋白免疫印迹法和细胞免疫荧光方法检测GRP78在三种不同乳腺癌细胞株(MDA-MB-231、435S和MCF-7)的mRNA蛋白表达及其亚细胞定位情况。结果:GRP78 mRNA和蛋白在(MDA-MB-231细胞的表达最高,其次为(MDA-MB-435S,在MCF-7的表达最低;共聚焦显微镜下观察到GRP78蛋白主要定位在细胞浆,在细胞膜以及细胞核内也有少量的表达。结论:GRP78是乳腺癌的一个促癌基因,在乳腺癌的发生、发展过程中发挥着重要作用,其可作为抗乳腺腺癌治疗的一个新的分子靶点。 刘荣华 王世宣 马湘一 罗丹枫 卢运萍 马丁关键词:乳腺癌 癌基因 葡萄糖调节蛋白78 BAY11-7082对前列腺癌细胞内NF-κB及其生物学行为的影响 被引量:1 2012年 目的:探讨BAY11-7082对前列腺癌细胞NF-κB表达及其生物学行为的影响。方法:应用CCK-8方法、蛋白印迹、NF-κB激活-核转运检测,细胞增殖抑制实验和集落形成实验方法观察BAY11-7082作用下前列腺癌细胞NF-κB蛋白的表达,细胞生长等指标的变化。结果:BAY11-7082对前列腺癌细胞转移有明显的抑制作用。BAY11-7082处理的前列腺癌细胞内NF-κB蛋白表达降低,减弱NF-κB的激活,细胞增殖和形成集落的能力下降。结论:BAY11-7082可抑制前列腺癌细胞NF-κB的激活与表达,提示NF-κB可作为前列腺癌基因治疗的重要靶点之一。 钱敏 王世宣 王鸿雁 卢运萍 马丁 刘荣华关键词:前列腺癌 NF-ΚB 新型肿瘤导向肽融合抗菌肽对肿瘤细胞的杀伤效应及机制 被引量:1 2013年 目的 将新型肿瘤导向肽TMTP1与抗菌肽相融合,以增强对肿瘤细胞的杀伤效应.方法 验证新型多肽对肿瘤细胞的亲和能力,经融合多肽作用后,噻唑蓝(MTT)、流式细胞仪实验检测细胞的增殖与凋亡,Boyden小室分析对细胞侵袭转移能力的影响,Western blot检测细胞中活化的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、-8、-9的表达水平.结果 薪型融合多肽具有对肿瘤细胞的亲和能力,20 μmol/L的融合多肽引起近100% PE-3M-1 E8和95% MKN-45细胞死亡,10 μmol/L的融合多肽诱导(82.15±1.20)% PC-3M-1E8细胞及(84.27 ±3.20)%的MKN-45细胞发生凋亡,而其侵袭转移能力下降为(52.38±3.30)%、(46.16±2.70)%,其机制和细胞中的Caspase-3、-8、-9活化有关.结论 新型肿瘤导向肽TMTP1与抗菌肽融合后显示强烈的肿瘤细胞杀伤效应. 马湘一 杨书红 刘荣华 罗丹枫 马丁 奚玲关键词:肿瘤靶向治疗 抗菌肽 雷帕霉素联合紫杉醇诱导卵巢癌细胞A2780和SKOV3凋亡及其分子机制 被引量:21 2007年 背景与目的:研究表明,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)在恶性肿瘤发生发展中起重要作用,本研究观察特异性mTOR抑制剂雷帕霉素联合紫杉醇对卵巢癌细胞A2780和SKOV3的作用,并探讨其内在的分子机制。方法:A2780、SKOV3细胞经雷帕霉素和紫杉醇处理后,以MTT法检测细胞的增殖情况,金正均法计算q值判断两药的相互作用。以流式细胞仪检测细胞凋亡,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测survivin的表达。结果:雷帕霉素联合紫杉醇可抑制A2780和SKOV3细胞增殖,且随时间延长抑制作用越显著,当两药合用72h时抑制率分别达到34.9%(A2780)和37.1%(SKOV3),与单独用药组相比差异有显著性(P<0.01),金正均法显示各时间点q值均>1.15,显示二者有协同作用。雷帕霉素和紫杉醇可使A2780和SKOV3细胞发生凋亡,并且在两者联用时凋亡率达到最高。经雷帕霉素和紫杉醇作用后的A2780和SKOV3细胞表达survivin较处理前明显下降。结论:体外雷帕霉素和紫杉醇可抑制A2780和SKOV3细胞增殖并诱导其发生凋亡,并可使survivin基因的表达下调,且两者联合应用时可显著增加其抑制作用,具有协同作用。 马湘一 王世宣 刘琰 刘荣华 卢运萍 马丁关键词:雷帕霉素 紫杉醇 A2780细胞 SKOV3细胞 凋亡 30卷12期疑难病案 2014年 患者,21岁,G1P0,因孕76天,发现胚胎停育1天于2014年7月6日入院。患者既往月经规则,末次月经2014年4月20日。因"血栓史"一直在服用抗血栓药物,5月份停药1月。患者于今年5月下旬自查尿HCG阳性,于5月31日外院B超检查提示:宫内早孕,右侧附件囊肿,盆腔积液。 刘荣华 王世宣关键词:抗血栓药物 附件囊肿 彩超检查 胚胎停育 宫内早孕