刘学芹
- 作品数:55 被引量:68H指数:4
- 供职机构:华中农业大学水产学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 家猪减数分裂粗线期二价体与有丝分裂中期染色体的比较研究被引量:4
- 1999年
- 以性成熟公猪睾丸和外周血为材料,采用长低渗、高氯仿卡诺固定液固定和外周血细胞培养制备减数分裂粗线期二价体和有丝分裂中期染色体,通过对二价体和有丝分裂中期染色体分裂指数和长度的比较研究,发现二价体的分裂指数和长度分别是有丝分裂中期染色体的5倍和3.42倍(1.87~5.98);同时以12号染色体为例,比较了二价体上的染色粒结构带与有丝分裂中期染色体G-带,表明染色粒结构带比中期染色体G-带纹丰富,而与早中期G-带带织吻合。
- 刘榜李奎彭中镇赵书红刘学芹周艳琴何锋
- 关键词:家猪二价体有丝分裂染色体G-带
- 抗小反刍兽疫病毒N蛋白单克隆抗体及其应用
- 本发明属于生物免疫分析技术领域,具体涉及抗小反刍兽疫病毒N蛋白单克隆抗体及其应用。公开了一种抗小反刍兽疫N蛋白的单克隆抗体,它是由保藏号为CCTCC C2016135的杂交瘤细胞株所分泌的,本发明还公开了所述单克隆抗体的...
- 曹胜波郑云霞黄少梅刘学芹叶静魏燕鸣
- 文献传递
- 斑马鱼ftr56基因克隆表达及功能研究被引量:1
- 2020年
- 为进一步了解硬骨鱼类特有的finTRIM(Fish novel tripartite motif,ftr)在斑马鱼(Danio rerio)抗病毒天然免疫中的作用,研究克隆了斑马鱼ftr56基因并分析了其对鲤春病毒血症病毒(Spring viremia of carp virus,SVCV)增殖的抑制作用。根据NCBI中斑马鱼ftr56序列设计引物,采用PCR方法,扩增ftr56 CDS区,连接至真核表达载体pcDNA4.0-His,构建真核表达质粒pcDNA4.0-ftr56-His,进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测SVCV感染斑马鱼胚胎成纤维细胞(ZF4)后ftr56 mRNA的变化。系统进化树分析显示,斑马鱼FTR56单独聚为一支。氨基酸多序列比对结果显示,其与黑猩猩、牛、鼠的TRIM56相似度为22%—23%。FTR56二级结构具有1个RING指结构域,1个B-box结构域,1个卷曲螺旋结构域和1个B30.0结构域。qRT-PCR检测结果显示,ftr56在SVCV感染后24h表达量显著上升。在过表达ftr56后,SVCV的G蛋白mRNA水平和蛋白水平在12h和24h相比对照组明显减少,培养基上清中SVCV滴度也明显降低,表明FTR56抑制SVCV的增殖。实验为进一步揭示finTRIM在鱼类病毒性疾病中的免疫调节机制提供参考。
- 邝鸣刘晥蒙姚健霍诗天刘学芹
- 关键词:克隆表达抗病毒斑马鱼
- 克氏原螯虾一种新型甲壳素基因的鉴定和抑菌功能研究被引量:2
- 2022年
- 抗菌肽是无脊椎动物非特异性免疫系统中重要的免疫因子,抗菌肽具有良好且广谱的抗菌活性,并且不易产生耐药性,有望替代传统抗生素药物发挥功能。甲壳素(Crustin)是目前甲壳类动物中研究比较广泛的一类抗菌肽家族。研究鉴定了来自克氏原螯虾(Procambarus clarkii)中的一种新型Crustin基因,命名为Pc-CruL。通过Pc-CruL抵抗病原性细菌的免疫防御反应的初步探究,发现Pc-CruL对克氏原螯虾的天然免疫系统至关重要,为深入研究克氏原螯虾奠定了一定的基础,在克氏原螯虾的人工养殖过程中的疾病的预防和治疗中具有一定的指导意义且提供了一定的理论基础。Pc-CruL包含330 bp,编码109个氨基酸,与已知的克氏原螯虾甲壳素同源性较低,为Ⅰ型甲壳素蛋白家族新成员。Pc-CruL在健康的克氏原螯虾的血淋巴、鳃、肠道、胃、心和肝胰腺中均存在,在血淋巴中的含量最高,而在肝胰腺中含量最低。同时进行了体外抑菌实验,结果表明Pc-CruL重组蛋白显著地抑制了几种常见的病原性细菌的生长,具有良好的广谱抑菌活性。体内实验表明,对健康的克氏原螯虾注射Pc-CruL重组蛋白可以保护克氏原螯虾,在副溶血弧菌感染后,提高存活率。Pc-CruL是克氏原螯虾中关键的免疫因子,在克氏原螯虾抵抗外界病原菌入侵和感染过程中起着重要的作用。
- 焦厚琪霍诗天闫黎明李艳和刘学芹
- 关键词:克氏原螯虾抗菌肽先天免疫甲壳素副溶血弧菌
- 鸡OVR基因片段的FCR-SSCP和PCR-RF-SSCP研究
- 以海兰鸡、丝毛乌骨鸡、AA鸡为材料,利用正交设计方法,对Z染色体上的OVR(occyte vitellogenesis receptor)基因中含限制排卵(RO, restricted ovulator)位点的片段根据B...
- 刘学芹
- 关键词:PCR-SSCP
- 文献传递
- 斑点叉尾鮰病毒多克隆抗体的制备及其生物活性鉴定被引量:1
- 2011年
- 利用斑点叉尾鮰卵巢细胞增殖斑点叉尾鮰病毒,然后将经过超速离心纯化的病毒免疫4周龄BABL/C雌鼠。每2周免疫1次,第4次免疫2周后,经眼眶采血,分离血清,通过酶联免疫吸附试验检测其抗体效价,并利用间接免疫荧光试验和与病毒孵育试验检测所制备多克隆抗体的生物活性。结果表明,制备的多克隆抗体ELISA效价为1∶25 600,间接免疫荧光试验证明该多克隆抗体特异性良好,同时与病毒的孵育试验证明该多克隆抗体具备中和活性,能够有效阻断斑点叉尾鮰病毒对细胞的感染。
- 吴兵罗宇良王敏曹胜波王卫民陈龙黄锋涛刘学芹
- 关键词:多克隆抗体效价生物活性
- 敲除trim47基因斑马鱼脑和脾的比较转录组学分析
- 2021年
- 用CRISPR/Cas9技术敲除斑马鱼(Danio Rerio)的trim47,收集TRIM47~(-/-)(trim47基因敲除)和WT(野生型)斑马鱼的大脑和脾脏进行RNA-seq分析,以鉴定差异表达基因(DEGs)。总共确定了271个DEGs,经过简要分析,将这些DEGs注释为KEGG途径和GO富集分析,与WT组相比, TRIM47~(-/-)组的脑中DEGs集中在细胞黏附和谷氨酸能突触信号传导途径中。在脾脏中,与野生型组相比, TRIM47~(-/-)组的DEGs在补体和凝血级联信号通路中发生了变化。使用qRT-PCR验证了脑和脾中与补体途径相关的基因,与转录组数据一致。这些结果表明, Trim47在脾脏和大脑中起着重要的生物学作用,尤其是通过补体途径参与先天免疫功能。体内感染实验表明, trim47基因敲除可提高斑马鱼中鲤春病毒血症病毒(SVCV)的感染率。总之,这些发现为TRIM成员在先天免疫中的功能提供了新线索。
- 姚健王业大王方柳力月鲁元安刘学芹
- 关键词:差异基因斑马鱼
- 草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白重组杆状病毒疫苗的构建及其体外表达检测
- 为了构建抗草鱼呼肠孤病毒(GCRV) VP6的重组杆状病毒载体疫苗,根据GCRV VP6基因序列,设计特异引物,扩增出带有His标签的VP6基因,构建重组杆状病毒转移质粒pFast-CMV-VP6.将重组转移质粒pFas...
- 黎琴黄锋涛曹胜波王敏王卫民刘学芹
- 斑点叉尾鮐病毒多克隆抗体的制备及其生物活性的鉴定
- 本实验将纯化好的,从斑点叉尾鮐卵巢细胞增殖的斑点叉尾鮐病毒免疫四周龄BABL/C雌鼠,获得斑点叉尾鮐病毒粒子多克隆抗体,通过酶联免疫吸附试验检测其抗体效价,同时利用间接免疫荧光实验和血清中和试验检测所制备多克隆抗体的...
- 吴兵罗宇良王敏曹胜波王卫民陈龙黄锋涛刘学芹
- 关键词:多克隆抗体ELISA
- 脱氢表雄酮衍生物、具有抗黄病毒活性的药物及其应用
- 本发明提供了一种脱氢表雄酮衍生物、具有抗黄病毒活性的药物及其应用。该脱氢表雄酮衍生物在抑制黄病毒方面具有优良的功效,在对细胞无毒性作用的浓度下,能够显著改善黄病毒感染导致的正常细胞病变。该脱氢表雄酮衍生物或者包含其的具有...
- 曹胜波柯少勇张路平周登元叶静刘学芹陈政