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凌云

作品数：22 被引量：102H指数：6
供职机构：浙江中医药大学生物工程学院动物实验研究中心更多>>
发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金浙江省教育厅科研计划更多>>
相关领域：医药卫生生物学社会学经济管理更多>>

合作作者

文献类型

  • 19篇期刊文章
  • 2篇专利
  • 1篇会议论文

领域

  • 17篇医药卫生
  • 3篇生物学
  • 1篇经济管理
  • 1篇社会学

主题

  • 9篇细胞
  • 6篇腺癌
  • 4篇乳腺
  • 4篇乳腺癌
  • 4篇裸鼠
  • 3篇信号
  • 3篇信号通路
  • 3篇通路
  • 3篇小型猪
  • 3篇鳖甲
  • 3篇鳖甲煎丸
  • 2篇蛋白
  • 2篇凋亡
  • 2篇雄激素
  • 2篇雄激素缺乏
  • 2篇血清
  • 2篇阳性
  • 2篇移植瘤
  • 2篇移植瘤模型
  • 2篇胰腺

机构

  • 22篇浙江中医药大...
  • 2篇上海中医药大...
  • 1篇浙江大学医学...
  • 1篇杭州市农业科...
  • 1篇浙江省杭州市...
  • 1篇浙江中医药大...

作者

  • 22篇凌云
  • 12篇屠珏
  • 7篇陈民利
  • 5篇蔡月琴
  • 5篇黄宇
  • 4篇蔡兆伟
  • 3篇谷焕鹏
  • 3篇周卫民
  • 3篇寿旗扬
  • 3篇张永生
  • 3篇郑婷
  • 2篇孙顺根
  • 2篇张利棕
  • 2篇胡升芳
  • 2篇朱科燕
  • 2篇刘军平
  • 1篇章学东
  • 1篇俞志新
  • 1篇侯群
  • 1篇徐剑钦

传媒

  • 4篇浙江中医药大...
  • 2篇中国实验动物...
  • 2篇中国细胞生物...
  • 1篇浙江临床医学
  • 1篇时珍国医国药
  • 1篇上海中医药杂...
  • 1篇中国病理生理...
  • 1篇中草药
  • 1篇卫生经济研究
  • 1篇中国比较医学...
  • 1篇中华中医药杂...
  • 1篇实验动物与比...
  • 1篇基因组学与应...
  • 1篇药物评价研究
  • 1篇中华中医药学...

年份

  • 1篇2023
  • 1篇2022
  • 1篇2021
  • 2篇2019
  • 4篇2018
  • 4篇2017
  • 4篇2016
  • 1篇2015
  • 1篇2013
  • 1篇2012
  • 1篇2007
  • 1篇2006
共 22 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
电转系统介导的荧光素酶稳定表达PANC-1细胞的构建及其生物发光成像检测被引量：1
2016年
在构建稳定表达荧光素酶的人胰腺癌PANC-1细胞的基础上,建立适合活体成像研究的胰腺癌动物模型,为深入研究胰腺癌发病机制打下基础。该研究运用Lonza NucleofectorTM核转染系统将携带有荧光素酶基因(firefly luciferase,luc)的质粒(GV258)稳定转染PANC-1细胞,利用嘌呤霉素筛选出能稳定表达荧光素酶的细胞株PANC-1-LUC,并应用活体成像系统对其体内外生物发光进行检测。进一步构建PANC-1-LUC裸鼠皮下移植瘤,同样方法接种慢病毒载体构建的PANC-1-luc细胞作为对照,观察成瘤率、瘤体积,检测生物发光强度。体内外生物发光检测结果均显示,光通量值与细胞数之间呈显著的直线相关(P<0.01)。PANC-1-LUC细胞皮下接种裸鼠,1周成瘤率即达80%以上,瘤体积可达平均100 mm3。观察6周,裸鼠皮下肿瘤生长符合Gompertzian曲线。每周的生物发光检测结果均显示,PANC-1-LUC移植瘤的光强度与瘤体积有显著的线性关系(P<0.05)。以上结果说明,该文所构建的PANC-1-LUC细胞株能够稳定、长期地表达荧光素酶,更适合构建活体成像研究的裸鼠胰腺癌模型。
屠珏黄宇凌云齐月寒陈民利
关键词：荧光素酶PANC-1细胞生物发光
小檗胺选择性诱导FLT3突变急性髓系白血病细胞MV4-11凋亡及其机制研究被引量：3
2018年
目的探讨小檗胺选择性诱导FMS样酪氨酸激酶3(FMS-like tyrosine kinase 3,FLT3)基因突变急性白血病细胞凋亡及其可能作用机制。方法应用MTT法比较小檗胺对FLT3突变阳性急性髓系白血病细胞株MV4-11和野生型FLT3肿瘤细胞胰腺癌细胞株PANC-1、淋巴瘤细胞株Pfeiffer、肺癌细胞株A549增殖的影响;流式细胞术检测小檗胺处理MV4-11后细胞凋亡和细胞周期的变化;Western blotting法检测FLT3及下游信号分子磷酸化STAT5(p-STAT5)蛋白的变化。结果 MTT结果显示,小檗胺作用于MV4-11细胞24、48、72 h的半数抑制浓度(IC50)值分别是(7.039±0.700)、(4.840±0.271)、(2.088±0.376)μmol/L,明显低于野生型FLT3肿瘤细胞株;小檗胺作用于MV4-11细胞48 h后,随着小檗胺浓度增加,凋亡细胞比例增高,细胞周期停滞在G0/G1期。小檗胺呈浓度依赖性下调FLT3突变蛋白和p-STAT5蛋白的表达。结论小檗胺能选择性下调FLT3突变蛋白及其下游信号分子p-STAT5,诱导FLT3突变急性髓系白血病MV4-11细胞凋亡和生长抑制。
黄宇余庆峰徐荣臻凌云
关键词：小檗胺急性髓系白血病凋亡
解毒化浊方对HER-2阳性乳腺癌细胞PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达的影响被引量：6
2018年
目的观察解毒化浊方血清对HER-2阳性乳腺癌细胞PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达的影响,探讨解毒化浊方治疗HER-2阳性乳腺癌的作用机制。方法将雌性Wistar大鼠分为对照组、中药组、西药组、联合组4组,分别给药制备含药血清,再以给药血清干预SK-BR-3细胞,采用Western blot检测HER-2、p-HER-2蛋白表达以及PI3K/Akt通路相关蛋白p-Akt、Bad、p-Bad表达。结果 Western blot检测显示,中药组、西药组、联合组HER-2、p-HER-2灰度比较对照组均降低;西药组、联合组HER-2、p-HER-2、p-Akt灰度比较对照组明显降低,西药组、联合组较对照组HER-2、p-HER-2、p-Akt表达含量差异有统计学意义(P<0.05)。中药组、西药组、联合组Bad、p-Bad灰度比较对照组降低,总Bad表达含量各组间差异无统计学意义(P>0.05)。西药组、联合组p-Bad表达含量差异有统计学意义(P<0.05)。结论解毒化浊方具有下调PI3K/Akt信号通路中相关蛋白表达,协同抑制剂发挥减毒增效的抗肿瘤作用。
胡升芳谷焕鹏凌云屠珏王大维
关键词：HER-2阳性PI3K/AKT乳腺癌
活体生物发光示踪术观察中国被毛孢抑制小鼠4T1-luc乳腺癌肺转移作用被引量：3
2013年
[目的]利用活体生物发光成像技术,探讨中国被毛孢菌丝体对小鼠乳腺癌肺转移的影响。[方法]4T1-luc乳腺癌细胞原位接种于50只BALB/c小鼠2周后,取40只荷瘤小鼠,分成4组,即模型组(10mL.kg-1NS)、HSM低剂量组(1.0g.kg-1HSM)、HSM高剂量组(2.0g.kg-1HSM)、阳性组(20mg.kg-1CTX),每组10只,连续给药21d;测定各组小鼠原位肿瘤体积和重量,并用活体生物发光成像仪观察各组小鼠乳腺癌肺转移情况。[结果]小鼠灌胃给予1.0g.kg-1、2.0g.kg-1HSM后,原位肿瘤体积和重量明显降低(P<0.05,P<0.01),原位肿瘤抑瘤率分别为22.92%和32.50%;给予2.0g.kg-1HSM的小鼠乳腺癌肺转移明显减少(P<0.01),乳腺癌肺转移的抑制率为51.77%。[结论]中国被毛孢菌丝体具有较好的抑制小鼠乳腺癌肺转移作用。
傅惠英屠珏凌云张利棕寿旗扬陈民利
关键词：肺转移
卵白蛋白诱导的WHBE兔树突状细胞甘露糖受体的表达及功能研究
2017年
该文研究了卵白蛋白诱导的WHBE(white hair black eyes)兔外周血来源树突状细胞(dendritic cells,DCs)甘露糖受体(mannose receptor,MR)的表达及功能,以阐明其对变应原易感的机制。分离WHBE兔外周血单核细胞,以20 ng/m L粒细胞–巨噬细胞集落刺激因子(granulocytemacrophage colony stimulating factor,GM-CSF)和20 ng/m L IL-4(interleukin-4)在体外联合诱导培养6 d,获得的细胞显示典型的树突状细胞形态特征。流式细胞术检测DCs表面分子CD86和人白细胞DR抗原(human leukocyte antigen-DR,HLA-DR)的表达,结果显示,WHBE兔和日本大耳白(Japanese white,JW)兔外周血DCs经卵白蛋白(ovalbumin,OVA)诱导后,CD86和HLA-DR表达水平均升高,其中,WHBE兔CD86水平高于JW兔。荧光定量PCR检测结果显示,OVA诱导后,两个品系兔外周血DCs的MR m RNA相对水平均显著升高(P<0.05),且WHBE兔显著高于JW兔(P<0.05)。抗原摄取实验发现,DCs经OVA刺激24 h后,抗原摄取能力低于对照组,MR抑制剂能显著降低DCs的抗原摄取率(P<0.05,P<0.01)。WHBE兔DCs抗原摄取率和平均荧光强度(mean flourscence indensity,MFI)均高于JW兔相同处理组,其中MFI值呈现极显著性差异(P<0.01)。该研究结果表明,OVA诱发后,WHBE兔DCs可能通过其表面共刺激分子CD86、抗原识别受体MR的高表达,使抗原递呈功能增强,介导Th2型细胞过度活化,导致气道变态反应性炎症。WHBE兔MR的表达及功能特点可能是影响WHBE兔DCs对变应原敏感性的关键因素。
屠珏谷焕鹏蔡月琴凌云刘军平徐剑钦
关键词：卵白蛋白树突状细胞甘露糖受体
高脂环境下雄激素缺乏对小型猪内脏脂肪蓄积和炎症基因表达的影响被引量：4
2017年
目的探讨高脂环境下雄激素缺乏对小型猪内脏脂肪沉积、血清激素以及炎症相关基因表达的影响。方法将性成熟的雄性五指山小型猪随机分成三组,即不去势组(SHAM),去势组(CAS)和去势加睾酮组(CAS+T),每组6只,所有动物均饲喂高脂饲料。12周实验结束时,采血检测血清激素水平变化,分离内脏脂肪并进行称重,采用荧光定量PCR技术检测脂肪合成与脂肪分解基因以及炎症相关基因的表达。结果 (1)去势显著减少高脂饮食小型猪血清睾酮含量但增加其血清瘦素含量,给予外源性睾酮处理能够恢复去势小型猪血清睾酮和瘦素水平;(2)去势导致高脂饮食小型猪内脏脂肪大量沉积,给予睾酮处理后,去势小型猪内脏脂肪含量显著降低;(3)去势和睾酮处理对高脂饮食小型猪内脏脂肪组织FAS、ACC、HSL和ATGL等脂肪代谢基因的表达没有显著影响;(4)去势显著上调高脂饮食小型猪内脏脂肪组织Leptin、CD68、CCL16、CCL23和SAA等炎症基因的表达,采用外源性睾酮处理去势小型猪则能降低上述基因的表达。结论去势诱导的雄激素缺乏促进高脂饮食小型猪内脏脂肪沉积,并上调其内脏脂肪组织中炎症基因的表达,采用睾酮处理则能够改善去势小型猪内脏脂肪蓄积和炎症反应。
蔡兆伟凌云蔡月琴朱科燕陈诚
关键词：雄激素小型猪脂肪沉积
一种人胰腺癌裸鼠模型的构建方法及其应用
本发明涉及一种新的适用于活体成像研究的人胰腺癌裸鼠模型的构建方法及其应用。本发明运用Lonza核转染系统将携带有luc基因的质粒稳定转染人胰腺癌PANC‑1细胞，利用嘌呤霉素筛选出能稳定表达荧光素酶的细胞株PANC‑1‑...
屠珏陈民利凌云黄宇齐月寒
文献传递
不同方法建立的人大细胞肺癌裸鼠移植瘤模型的生物学特点被引量：7
2012年
目的比较三种常用的皮下移植瘤造模方法建立的人大细胞肺癌NCI-H460裸鼠移植瘤模型的不同生物学特点,为不同的研究寻找合适的造模方法提供实验依据。方法分别用NCI-H460细胞,NCI-H460移植瘤组织块和移植瘤匀浆液对于BALB/c-nu/nu裸鼠建立皮下移植瘤模型,运用一般生物学指标观察三种移植瘤的成瘤率、瘤重、倍增时间和组织形态;采用全自动生化分析仪检测其外周血中丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、血糖(G1u)、尿素氮(BUN)和肌酐(CREA)等生化指标;利用血球分析仪检测白细胞总数(WBC)并进行分类,最后体外对其腹腔巨噬细胞吞噬活性和NK细胞活性进行了考察。结果本实验中细胞法和匀浆法的成瘤率及肿瘤生长速率显著高于埋块法且其生长更为均一,差异较小。接种5周后,与正常裸鼠比较,三组荷瘤小鼠血液中ALT、AST显著升高,BUN、CREA显著降低,埋块组的AST和BUN两项指标显著高于其他两荷瘤组。此外,接种2周后,荷瘤裸鼠的GLU显著低于正常裸鼠,匀浆液组的GLU降得最低。白细胞中,三种方法组荷瘤小鼠血液中LYM%、MN%、HGB均有降低,匀浆液组和细胞培养组的荷瘤小鼠血液中WBC、NEUT%、PLT显著高于埋块组。免疫细胞活性方面,两种细胞均呈现出正常细胞组>匀浆组>细胞组>埋块组的趋势。结论细胞培养法接种数量可控,肿瘤生长均匀,适合建立不同实验需求的移植瘤模型,组织块移植法适于建立中药抗肿瘤筛选的动物模型,而匀浆液移植法则不推荐使用。裸鼠的生理生化状态和免疫功能与肿瘤的生长有密切的关系。
屠珏陈方明周卫民潘颖颖朱科燕凌云陈民利
关键词：裸鼠移植瘤模型血液生化白细胞分类NK细胞
解毒化浊方含药血清调控TANs对HER-2阳性乳腺癌肿瘤微环境的影响
2023年
目的通过解毒化浊方含药血清干预乳腺癌细胞和中性粒细胞共培养的体外肿瘤微环境的实验研究,探讨其抑制乳腺癌复发转移的作用机制。方法选用雌性SD大鼠分为生理盐水组、中药组,分别给药制备含药血清,给药血清干预共同培养的乳腺癌MDA-MB-453细胞和小鼠外周血中性粒细胞,采用流式细胞术检测MDA-MB-453细胞和中性粒细胞凋亡率。结果解毒化浊方含药血清干预肿瘤微环境中性粒细胞24h后,中药组与生理盐水组比较中性粒细胞的凋亡率增加,但不明显(P>0.05);干预48h后,中药组与生理盐水组比较中性粒细胞的凋亡率明显增加(P<0.05);中药组与中药对照组比较中性粒细胞的凋亡率明显减少(P<0.05),生理盐水组与生理盐水对照组比较中性粒细胞的凋亡率明显减少(P<0.05)。解毒化浊方含药血清干预肿瘤微环境中乳腺癌MDA-MB-453细胞48h后,中药组与生理盐水组比较乳腺癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05),中药组与中药对照组乳腺癌细胞比较凋亡率明显增加(P<0.05)。结论解毒化浊方中药重塑肿瘤微环境后,能促进中性粒细胞的凋亡。且能阻止中性粒细胞驯化成肿瘤相关性中性粒细胞,减少炎症分泌,抑制肿瘤生长。解毒化浊方中药具有调控中性粒细胞重塑体外乳腺癌肿瘤微环境诱导肿瘤细胞凋亡的作用。
谷焕鹏胡升芳凌云林晨
关键词：乳腺癌
鳖甲煎丸不同提取物对TGF-β1诱导的HSC-T6细胞的影响被引量：13
2016年
目的:探讨鳖甲煎丸不同提取物对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的HSC-T6细胞增殖及相关细胞因子的影响作用,并探究水提物与醇提物抗肝纤维化作用的异同。方法:建立TGF-β1诱导HSC-T6细胞增殖模型,采用MTT法观察水提物与醇提物对HSC-T6细胞增殖的量效和时效关系来探讨鳖甲煎丸提取物对TGF-β1诱导HSC-T6细胞增殖的影响;并采用RT-PCR、ELISA法测定不同提取物对HSC-T6细胞相关细胞因子的影响。结果:鳖甲煎丸水提物在0.125-2.000mg/m L浓度范围,抑制效果随剂量增加而降低,呈线性负相关关系,醇提物未见明显的剂量依赖关系。水提物抑制作用随时间延长表现为先增强后减弱,醇提物则表现出一定的时间依赖性,随时间延长而增强。与空白对照组比较,模型组细胞相关细胞因子α-SMA、Col-Ⅲ、CTGF和PDGF m RNA含量增高(P<0.05)。与模型组比较,鳖甲煎丸水提物使HSC-T6细胞COL-Ⅲ、COL-Ⅳ、PDGF m RNA含量和蛋白表达降低。醇提物使HSC-T6细胞COL-Ⅲ、COL-Ⅳm RNA含量和蛋白表达降低,而PDGF m RNA含量升高促进其蛋白表达。结论:鳖甲煎丸水提物与醇提物对TGF-β1诱导的HSC-T6细胞增殖均有一定的抑制作用,但其抑制作用表现有一定差异;同时均可抑制胶原COL-Ⅲ、COL-Ⅳ的合成;对PDGF表达调控亦有所不同。
付玲珠屠珏凌云郑婷盛云杰张永生
关键词：鳖甲煎丸水提物醇提物
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