冯永堂
- 作品数:109 被引量:211H指数:8
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- 发文基金:山东省中医药科技发展计划项目山东省自然科学基金潍坊市科技局资助课题更多>>
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- DcR3及其配体的研究进展
- 2005年
- DcR3/TR6是最近发现的可溶性TNFR超家族成员,在归类上属于第三类,其配体具有多样性。它可竞争性地与FasL、LIGHT及,TL1A结合,在肿瘤免疫、移植免疫、自身免疫及抗感染免疫中都发挥着重要的作用。本文拟就DcR3及其配体的研究进展作一综述。
- 原江水冯永堂
- 关键词:DCR3
- 小鼠OX40稳定表达细胞株的构建及其对B细胞促分化作用的研究被引量:3
- 2005年
- 目的:构建稳定表达小鼠OX40的细胞株HUVEC,并探讨其对B细胞的促增殖作用。方法:从ConA活化的小鼠胸腺淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR法扩增小鼠OX40的cDNA,并将其克隆到pUCm-T载体中,经PCR、酶切和测序分析,进而构建pIRES2-EGFP-OX40重组真核表达载体。以脂质体法转染HUVEC,经G418筛选后,用流式细胞术检测OX40分子的表达。采用3H-TdR掺入法,研究OX40信号对体外培养的B细胞的促分化作用。结果:构建了OX40基因的真核表达载体。经PCR、酶切和测序证实,插入的目的片段与GenBank登录的小鼠OX40cDNA序列完全一致。用G418筛选后,获得能稳定表达小鼠OX40蛋白的HUVEC细胞。3H-TdR掺入法结果显示,小鼠OX40稳定表达的细胞HUVEC对体外培养的B细胞具有促增殖、分化的作用。OX40/OX40L信号与CD40/CD40L信号具有协同作用。结论:成功地构建小鼠OX40稳定表达地细胞,OX40对B细胞具有促增殖、分化作用。
- 原江水冯永堂王菲宫伟雁邸大琳任杰苗乃法
- 关键词:OX40增殖
- B16细胞诱导的肿瘤特异性CTL对靶细胞的杀伤作用
- 目的:研究肿瘤特异性细胞毒T细胞(CTL)对其靶细胞的体外杀伤和体内抑瘤作用。方法:(1)采用丝裂霉素(MMC)致半数死亡的黑色素瘤传代细胞株B16为肿瘤特异性抗原,将肿瘤特异性抗原与不同比例的C57BL/6J小鼠脾淋巴...
- 冯永堂苗乃法王艳华鞠吉雨李在连
- 关键词:肿瘤特异性抗原B16细胞杀伤作用
- 文献传递
- 人OX40单克隆抗体的制备、纯化及初步鉴定
- 2010年
- 目的 应用杂交瘤技术,制备鼠抗人OX40单克隆抗体.方法 以本室纯化的OX40胞外段融合蛋白免疫6~8周龄的雌性BalB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选分泌鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞阳性克隆.用杂交瘤细胞接种小鼠腹腔诱生腹水,腹水经饱和硫酸铵纯化沉淀后用间接ELISA法测定抗体的Ig类别.SDS-PAGE分析抗体的纯化程度,用免疫组化技术鉴定单克隆抗体与表达有OX40分子的组织及细胞特异性结合的情况.结果 获得1株能稳定分泌鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞,细胞株诱生的小鼠腹水纯化后抗体纯度较高,Ig类别为IgG,蛋白浓度为6.129g/L.制备的单抗经淋巴细胞免疫组化及炎性淋巴组织免疫组化技术初步鉴定结果表明,该抗体与OX40单克隆抗体标准品制剂相比具有类同的特异性.结论 成功获得能稳定分泌鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备的单克隆抗体具有较高的纯度和活性.
- 崔杰辛宁冯永堂鞠吉雨王成伟刘艳菲苗乃法
- 关键词:OX40单克隆抗体杂交瘤
- 肝细胞刺激因子对肝癌细胞和大鼠肝细胞增生作用的研究被引量:8
- 2002年
- 目的探讨肝细胞刺激因子 (HSS)对正常大鼠肝细胞和人肝癌细胞的作用特点。方法应用自制的HSS分别与正常大鼠肝脏细胞和人传代肝癌细胞共同培养不同时间 ,以促进肝细胞增生的IL 6为对照组 ,采用3 H TdR掺入法 ,观察HSS对大鼠肝细胞和人肝癌细胞分裂增生和细胞形态变化的影响。结果在培养早期HSS对正常大鼠肝细胞和人肝癌细胞均具有刺激增生的作用 ,随后HSS对这些细胞的增生具有明显的抑制作用 ,并伴随着细胞的死亡形态改变。结论HSS对人肝癌细胞和正常大鼠肝细胞的增生不仅有促进作用 ,而且具有较强的抑制作用 。
- 吴国庆吴晓燕苗乃法冯永堂李在连
- 关键词:肝细胞刺激因子肝细胞肝癌细胞增生作用动物实验
- 血清葡萄糖-6-磷酸异构酶检测在类风湿性关节炎临床应用价值的研究
- 目的:检测类风湿性关节炎(RA)与非RA自身免疫性疾病(AID)患者血清葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)含量,观察其与不同类型AID的关系。方法:(1)选择51例RA患者(其中活动期32例,非活动期19例)为研究组;46...
- 朱新兴冯永堂伊心浩
- 文献传递
- 注射HBsAg免疫转移因子后对特异性细胞免疫影响被引量:5
- 1997年
- 为研究HBsAg免疫转移因子(HBV-TF)对人体细胞免疫应答的改善,对14位健康志愿者每日肌注HBV-TF2mg,计14d;18例慢乙肝病人随机分成3组,每组分别以0.5mg、1mg和2mg肌注了3个月。两组均于注射前后分别进行HBsAg刺激的淋巴细胞增殖试验和巨噬细胞移动抑制试验。结果显示:健康组,HBsAg的淋巴细胞增殖,刺激指数(SI),注射前为0.77±0.21,注射后增至1.57±0.79(P<0.01),其中10例明显增高。HBsAg刺激的巨噬细胞,移动抑制指数(MI),注射前为0.926±0.06,注射后下降至0.784±0.089(P<0.01),其中7例明显降低。慢性乙肝病人组,注射前后SI分别为 1.048±0.398和 1.352±0. 383(P<0. 05),其中4例明显增高,4例中有3例HBeAg阴转伴抗-HBe阳转。MI治疗前后分别为1.061±0.109和0 955±1.171,有3例明显降低,3例中有2例HBeAg阳转伴抗-HBe阳转。
- 王法治冯永堂吴国庆李在连李东林计焱焱姚光弼
- 关键词:HBSAG细胞免疫
- Th1/Th_2型细胞因子在妊高征发病中的作用被引量:2
- 2006年
- 目的测定妊高征患者与正常妊娠孕妇血清及相应胎儿脐血血清中免疫细胞因子IFN-γ和IL-4水平,以探讨Th1/Th2型免疫细胞因子在妊高征发病中的作用。方法用ELISA法对38例妊高征患者(其中轻度妊高征11例,中度14例,重度13例)血清及相应胎儿脐血血清中IFN-γ和IL-4浓度进行测定,并选择同期16例正常孕妇作为对照组。结果①妊高征患者血清中IFN-γ含量显著高于对照组孕妇,并随病情加重呈增加趋势,重度妊高征患者增加极为显著(P<0.01);妊高征患者胎儿脐血血清IFN-γ含量亦显著高于对照组脐血含量,且随病情加重呈增高趋势,重度妊高征患者显著高于轻、中度者(P<0.01);②妊高征患者血清IL-4浓度显著低于正常妊娠者,随妊高征病情加重呈下降趋势,中、重度妊高征患者降低极为显著(P<0.01);妊高征患者胎儿脐血血清IL-4浓度显著高于对照组,随病情加重呈增加趋势,重度妊高征患者增高极为显著(P<0.01);③妊高征患者血清与相应胎儿脐血血清IFN-γ含量无明显差异(P>0.05),胎儿脐血血清IL-4含量显著高于相应母血血清含量(P<0.05);④妊高征患者血清IFN-γ增高与胎盘重量及新生儿体重呈显著负相关(r=-0.783,P<0.01;r=-0.742,P<0.01),母血血清IL-4含量的增高与胎盘重量及新生儿体重呈显著正相关(r=0.869,P<0.01;r=0.794,P<0.01)。结论Th1/Th2型免疫细胞因子的失衡可能是妊高征的发病机制之一。
- 胡明英冯永堂张建军刘亚静张翠娟刘希莲
- 关键词:白介素-4干扰素-Γ妊娠并发症心血管
- 胸腺基质淋巴细胞生成素、OX40和OX40受体在过敏性腹泻小鼠大肠黏膜中表达的关系被引量:1
- 2012年
- 目的建立小鼠过敏性腹泻模型,检测其大肠黏膜中胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、OX40、OX40受体(OX40L)的表达和肠系膜淋巴结细胞培养上清中IL-_4、IFN-1的水平,分析其之间的关系,探讨TSLP、OX40、OX40L在过敏性腹泻中的作用。方法雌性BALB/c小鼠20只随机分成两组即对照组和实验组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肠系膜淋巴结细胞培养上清中IL4和IFN-1的水平,取大肠组织HE染色观察大肠组织病理改变,SP免疫组织化学技术检测TSLP、OX40、OX40L的表达。结果@HE染色结果显示:实验组比对照组小鼠结肠黏膜组织非特异性炎症反应显著,上皮排列不规则,有大量炎性细胞浸润,固有层可见大量嗜酸性粒细胞浸润;@TSLP、OX40、OX40L在过敏性腹泻小鼠大肠黏膜中的表达水平高于对照组的表达水平(t=7.07,t=7.81,t=7.79,P均〈0.01);③Spearman等级相关分析发现TSLP、OX40、OX40L三者问表达强度存在正相关(r=0.889,r=0.932,r=0.943,P均〈0.01),同时三者与肠系膜淋巴结细胞培养上清中IL4水平呈正相关(r=0.891,r:0.936,r=0.886,P均〈0.05),而与IFN-1水平呈负相关(r=-0.829,r=-0.881,r=-0.937,P均〈0.05)。结论TSLP、OX40、OX40L三者间表达存在正相关,并诱导了Th1/Th2轴向Th2轴漂移,促进了过敏性腹泻的发生发展。
- 杨京玉刘艳菲徐灵芝林志娟邸大琳庄伟苗乃法冯永堂
- 关键词:胸腺基质淋巴细胞生成素OX40OX40L
- 新生大鼠HIBD后脑中IL-18、IL-15和IL-10的变化及相关性实验研究
- 目的:制备新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型,动态检测大鼠脑组织中IL-18、IL-6和IL-10的水平变化,观察分析三者在HIBD发生发展中的变化规律及相互关系,以便为临床新生儿HIE的发病机制、病情预测及指导治...
- 史宝海冯永堂刘艳菲
- 关键词:新生大鼠IL-18IL-10
- 文献传递