偶健
- 作品数：45 被引量：127H指数：7
- 供职机构：南京医科大学附属苏州医院更多>>
- 发文基金：苏州市科技计划项目江苏省自然科学基金苏州市科技发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学交通运输工程更多>>
- 人类低评分早期胚胎与低评分囊胚的性染色体嵌合性分析被引量：3
- 2011年
- 目的应用X、Y双色荧光原位杂交（fluorescenceinsituhybridization，FISH）分析不同原核（pronucleus，PN）数量来源的低评分早期胚胎和低评分囊胚的性染色体嵌合情况并探讨其发生机理。方法对低评分、不适于胚胎移植的新鲜或冷冻-解冻的早期胚胎和囊胚进行双色FISH分析。结果2PN早期胚胎细胞中两信号率为66．67％，显著高于1PN和3PN胚胎；1PN早期胚胎细胞中单信号率为90．41％，明显高于2PN和3PN胚胎；3PN胚胎细胞中三信号率为28．00％，显著高于1PN和2PN胚胎，两信号率为46．Oo％，明显高于1PN胚胎。冷冻-解冻的早期胚胎有多信号嵌合的胚胎的比例为23．53％，高于新鲜胚胎，但差异无统计学意义。24个囊胚的嵌合率为100％，其中两信号占主导的囊胚（比例≥50％）占总数的62．50％，显著高于早期胚胎。结论以2PN作为正常受精的判断标准来选择适宜移植的胚胎已不够准确，冷冻-解冻对胚胎染色体加倍可能有一定的影响。为了避免选择染色体异常的胚胎，有必要结合胚胎植入前遗传学诊断（pre—implantationgeneticdiagnosis，PGD）以及产前诊断技术进行染色体异常筛查。此外，低评分囊胚可能是胚胎干细胞又一重要来源。
- 偶健王玮丁洁顾斌郑爱燕王馥新李红
- 关键词：荧光原位杂交原核性染色体嵌合
- 间接ELISA法对H pylori免疫牛初乳中抗体的检测被引量：2
- 2006年
- 目的:建立间接ELISA法测定牛初乳中H pylori抗体的水平,并观察特异性抗体的产生规律．方法:本试验以H pylori全菌抗原免疫妊娠母牛,每头牛每次肌肉注射4×109CFU全菌抗原, 收集分娩后7 d内的初乳．以间接ELISA法检测其中H pylori抗体水平．结果:H pylori能有效地引起免疫应答,成年牛初乳中的抗体效价在分娩当天达到最大值 5．84,高于青年牛的3．51(P<0．05),随后迅速下降．对照奶牛仅在分娩当天检测到微弱阳性．结论:成年牛的对H pylori的免疫应答好于青年牛．
- 周冬仁王锋张常印崔山唐泰山偶健
- 关键词：间接ELISA幽门螺杆菌初乳
- 牛卵泡卵母细胞的体外成熟和冷冻保存被引量：2
- 2007年
- 在简化牛卵母细胞体外成熟的基础上,观察了保护剂、平衡温度、预平衡方法、解冻方法以及冷冻方法对牛卵泡卵母细胞冷冻的影响。结果表明:在体外成熟培养液中添加26.2 mmol/L的NaHCO3和对屠宰场卵巢进行选择更能促进牛卵母细胞的体外成熟;无论是程序冷冻还是玻璃化冷冻,乙二醇(EG)与甘油(GLY)相比更能促进牛卵泡卵母细胞的冷冻效果;在程序冷冻中,冷冻液中添加0.1 mol/L蔗糖比添加0.3mol/L的蔗糖更能促进牛卵泡卵母细胞的冷冻;在玻璃化冷冻中,37℃和25℃的平衡温度比4℃更适合牛卵泡卵母细胞的冷冻;在10%、5%、1%的预平衡浓度之间,5%的预平衡浓度即可达到预平衡的效果;在解冻时,多步脱除保护剂更能保护冷冻的卵母细胞;比较了几种最小样本量(minimum size sample,MSS)玻璃化冷冻方法,解冻成熟培养后的成熟率,拉细毛细玻璃管冷冻法为(41.67±3.19)%,极显著高于未拉细毛细玻璃管冷冻法(glassmicropipette,GMP)的(30.19±1.93)%和固体表面冷冻法(solid surface vitrification,SSV)的(28.33±2.89)%(P<0.01)。
- 许卫华王子玉王锋偶健周冬仁
- 关键词：卵母细胞体外成熟玻璃化冷冻
- 改良羊水细胞染色体制备法在产前诊断中的应用
- 2013年
- 羊水细胞培养及染色体制备是染色体病产前诊断的主要手段。由于羊水细胞培养一直存在技术要求高，难度大，培养时间长，易污染，分裂相较少等问题，是许多单位开展产前诊断的难点。近年来，我们在传统的羊水细胞培养技术基础上进行不断探索改进，建立了一种操作简便、快速、稳定、成功率高的羊水细胞染色体制备方法，取得了满意的效果。
- 孙健段程颖偶健傅文宇刘一琳钟红菱陈瑛
- 关键词：羊水细胞培养染色体制备产前诊断细胞染色体染色体病
- 微小RNA的差异表达与胚胎质量的相关性被引量：3
- 2020年
- 目的探讨微小RNA(micro RNA,miRNA)差异表达与胚胎质量的相关性,为胚胎的植入前选择提供新的依据。方法用TaqMan微小RNA阵列(MicroRNA Array)对8个囊胚样本进行miRNA表达谱检测,筛选稳定高表达且有价值的miRNA。扩大样本量后选择囊胚,针对筛选的miRNA进行逆转录PCR检测,同时采用二代测序平台检测胚胎的染色体异常,对结果进行分析比较。结果MicroRNA Array检测发现mir-720、mir-372、mir-886-3p和mir-512-3p表达量较高,而mir-145表达量较低,推测与早期胚胎发育相关。选择56个废弃囊胚,对上述5种miRNA进行检测,结果显示mir-145和mir-886-3p在染色体正常组中显著低表达。mir-145以相对表达量9作为阈值,mir-886-3p以相对表达量3作为阈值,其以上均未见胚胎染色体检测为正常者。结论特定的miRNA表达差异与胚胎染色体异常存在相关性,有可能作为一种新的胚胎选择的生物标记。
- 倪梦霞薛永峰丁洁杨慎敏郑爱燕蒲艳王玮李红偶健
- 关键词：微小RNA胚胎
- 玻璃化冷冻牛卵母细胞受精能力研究
- 本试验从屠宰场废弃的牛卵巢表面抽取直径在2～6mm的卵泡的卵泡液，并从卵泡液中分拣出外被多层卵丘细胞的卵丘卵母细胞复合体(COCs)，直接对COCs或者体外成熟培养后的卵母细胞采用不同的玻璃化冷冻方法进行冷冻保存，然后利...
- 偶健
- 关键词：卵母细胞冷冻保存体外受精受精能力
- 文献传递
- 采用二代测序(NGS)对脊髓性肌萎缩(SMA)家系行胚胎植入前遗传学诊断(PGD)
- 偶健王玮郑爱燕丁洁刘敏娟毛君蒲艳邹琴燕孟庆霞李红
- 6例G带分析核型不明患者的分子细胞遗传学研究
- 应用荧光原位杂交(FISH)和染色体涂染(chromosome painting CP)技术对6例G带分析核型不明患者进行分析。根据G带提示针对性的使用检出可能性较大的CEPX,CEPY,CEP13/21探针和X,13涂...
- 偶健李红
- 关键词：荧光原位杂交染色体涂染
- 文献传递
- 复杂额外小标记染色体的产前诊断和遗传咨询
- 2017年
- 目的应用高通量基因测序技术对产前诊断过程中发现的1例胎儿额外小标记染色体的来源和大小进行鉴定,进一步分析其遗传效应。方法通过羊水培养、染色体G显带技术进行羊水细胞核型分析,诊断出1例胎儿额外小标记染色体,染色体核型为47,XN,+mar。应用高通量基因测序技术,对该羊水细胞进行测序分析,从而确定小标记染色体的大小、具体区域范围、遗传效应。结果羊水细胞染色体核型分析结果为47,XN,+mar。高通量基因测序结果显示14q11.2(19460001-20440000)×3,重复片断大小为0.98Mb;15q11.1q11.2(20180001-22500000)×3,重复片断大小为2.32Mb;16p11.2(32500001-33900000)×3,重复片断大小为1.40Mb。查询公共数据库显示:14号染色体重复区域,为多态性;15号染色体重复区域,为多态性;16号染色体重复区域,为多态性。结论产前诊断过程中,由于普通细胞遗传学方法的局限性,额外小标记染色体的遗传咨询充满挑战,而高通量测序技术可以在基因组水平明确额外小标记染色体的大小、具体区域范围,为判断额外小标记染色体的遗传效应和遗传咨询提供帮助。
- 刘一琳偶健段程颖姜东傅文宇林春花
- 关键词：产前诊断
- 胚胎植入前单基因遗传学检测结合HLA配型诊疗X连锁高IgM综合征1例
- 2023年
- 目的 探讨胚胎植入前单基因遗传学检测(PGT-M)基因突变结合人类白细胞抗原(HLA)配型在X连锁高IgM综合征(X-HIGM)患者临床诊疗中的应用效率及可行性。方法 应用多重PCR结合二代测序技术针对X-HIGM的致病基因CD40LG及临近区域特异性单核苷酸多态性(SNP)位点进行鉴别构建单体型,另外针对HLA-A、HLA-B、HLA-DRA、HLA-DQB1及临近区域特异性SNP位点进行鉴别构建单体型。经本中心常规促排卵、体外受精及胚胎培养,随后进行胚胎活检;对于目标基因CD40LG进行PGT-M,包括直接突变检测和间接单体型连锁分析;对于HLA采用HLA复合体中多个位点的连锁分析来选择相合的胚胎。结果 先证者男孩,临床诊断为X-HIGM,基因检测分析显示其X染色体上的CD40LG基因有1个半合子突变,c.49_59del(p.L17Hfs*28)。该基因突变会导致X-HIGM。经家系验证发现,先证者母亲在该位点存在和先证者相同的杂合变异。对该家系通过单体型连锁分析之后进行CD40LG基因检测+HLA配型双重PGT。由于先证者母亲卵巢储备不足,只获得3枚卵子,受精后养成的囊胚也只有1枚,这枚囊胚的PGT结果为整倍体+未携带CD40LG基因突变+HLA配型半相合。此枚胚胎发育出生的婴儿没有患上X-HIGM,而且他的半相合的造血干细胞成功移植给了先证者。结论 PGT-M技术在该类血液遗传病家系中不仅可以阻断基因突变垂直传递,同时HLA相合胚胎的选择也为先证者儿童的造血干细胞移植治疗提供了新的曙光。
- 倪梦霞唐燕张艳丁辰月丁洁王玮李红偶健
