马鸣潇
- 作品数：95 被引量：263H指数：9
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金吉林省科技厅重大项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学理学更多>>
- PRRS病毒长春株ORF3、ORF5基因的克隆与序列分析
- 本文从长春地区采集猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疑似病料,采用RT-PCR方法特异性扩增PRRS病毒的ORF3和ORF5基因,并进行序列分析.结果表明:长春分离株ORF3基因cDNA编码区长765bp,可编码254个氨基...
- 沈国顺金宁一秦晓光庄天中马鸣潇
- 关键词：PRRSVORF3基因ORF5基因
- 文献传递
- 二价重组鸡痘病毒口蹄疫疫苗的豚鼠免疫试验
- 2009年
- 目的检测携带口蹄疫病毒(FMDV)Asia-1型P1-2A-IL18基因和O型P1-2A-3C基因的重组鸡痘病毒疫苗诱导豚鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫的能力。方法将重组鸡痘病毒vUTAL-P1-2A-IL18-P1-2A-3C、w-FPV和PBS分别经肌肉注射免疫豚鼠,检测豚鼠脾T淋巴细胞亚群数量、特异性CTL细胞杀伤活性和血清中抗FMDV特异性抗体水平。结果重组鸡痘病毒免疫豚鼠脾细胞中T淋巴细胞亚群数量和特异性CTL细胞杀伤活性均显著高于w-FPV和PBS对照组,且能产生抗O型和Asia-I型FMDV特异性抗体。结论二价重组鸡痘病毒口蹄疫疫苗能诱导豚鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫。
- 谷长维金宁一李太元李昌田明尧马鸣潇霍晓伟常巧呈于长勇
- 关键词：口蹄疫病毒重组鸡痘病毒免疫应答
- O型口蹄疫病毒O／LZ株拯救被引量：1
- 2008年
- 以构建的口蹄疫病毒O/LZ株全长cDNA为模板,使用T7RNA聚合酶系统在体外进行转录,得到病毒RNA。用脂质体转染法将转录物RNA导入BHK细胞,可观察到典型的口蹄疫病毒致细胞病变效应。对收获的病毒分别用RT-PCR、免疫荧光以及免疫电子显微镜观察等方法进行鉴定,结果表明拯救到特定的口蹄疫病毒。同时用空斑试验法观察了拯救病毒及其母本毒株的生长特性,结果表明二者没有明显差异,这将为进一步探索猪口蹄疫病毒致病的分子机制及研制新型口蹄疫疫苗奠定良好的基础。
- 马鸣潇金宁一沈国顺刘慧娟霍晓伟金明兰郑敏鲁会军金扩世
- 关键词：口蹄疫病毒CDNARNA
- 重组口蹄疫鸡痘病毒vUTAL3CP1的构建及其遗传稳定性和免疫原性被引量：9
- 2008年
- 目的构建重组口蹄疫鸡痘病毒,并检测其遗传稳定性和免疫原性。方法将口蹄疫病毒(FMDV)的衣壳蛋白前体P1-2A和蛋白酶3C基因插入到鸡痘病毒表达载体中,构建重组鸡痘病毒转移载体pUTAL3CP1,并与鸡痘病毒(FPV)282E4株共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过BrdU加压筛选获得重组鸡痘病毒vUTAL3CP1。重组病毒在CEF中连续传30代,分别进行毒力和基因检测,并免疫BALB/c小鼠,检测特异性抗体和中和抗体。结果重组鸡痘病毒经RT-PCR可扩增出目的基因;特异性荧光抗体反应呈阳性;在CEF中连续传30代,毒力稳定,基因未发生缺失和变异;免疫小鼠能产生较高水平的FMDV特异性抗体和中和抗体。结论已成功构建重组口蹄疫鸡痘病毒,且具有良好的遗传稳定性和免疫原性。
- 金明兰金宁一鲁会军马鸣潇郑敏金扩世霍晓伟计越
- 关键词：口蹄疫重组鸡痘病毒免疫原性
- Asia 1型口蹄疫病毒P1-2A-3C基因真核表达质粒的构建及鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的构建Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)P1-2A-3C基因真核表达质粒。方法采集疫区牛的水疱液及水疱皮,经RT-PCR法扩增出Asia 1型FMDV的前体蛋白基因P1-2A片段和蛋白酶基因3C片段,分别克隆至pMD18-T载体上,通过酶切、连接,获得质粒pMD18-T-P1-2A-3C。经酶切获得P1-2A-3C片段,插入真核表达载体pVAXⅠpCMV启动子下游,构建pVAXⅠ-P1-2A-3C真核表达载体,用脂质体法转染HeLa细胞,进行IFA检测。结果Asia 1型FMDV真核表达载体pVAX1PⅠ-2A-3C,经酶切鉴定证明构建正确,转染HeLa细胞后,可见明显的黄绿色荧光,表明P1-2A-3C基因得到了表达。结论pVAXⅠ-P1-2A-3C可作为Asia1型FMD核酸疫苗的候选疫苗。
- 霍晓伟金宁一鲁会军马鸣潇牟伟峰
- 关键词：口蹄疫病毒真核表达核酸疫苗
- 肢体循环治疗糖尿病下肢微血管病变的护理
- 2013年
- 微血管病变是糖尿病患者常见的一种病理改变，身体末端微血管病变常引起营养物质的缺乏，最终可能引发感染甚至坏疽，一般以位于身体远端的足部多见。下肢微血管病变轻者表现为肢体末端皮肤发凉而皮温不低；继续发展表现为动脉搏动减弱、间歇性跛行；重者出现皮肤充血发红、静息痛；最严重的将发展为糖尿病足，对糖尿病患者造成非常严重的后果。我院采用肢体循环仪治疗糖尿病微循环障碍的患者，在治疗前、中、后进行系统化护理，取得满意效果。现将护理体会总结如下。
- 李勇飞马鸣潇
- 关键词：微血管病变系统化护理肢体末端间歇性跛行微循环障碍
- 共表达O型口蹄疫病毒P1-2A基因和猪白细胞介素18的重组鸡痘病毒的构建被引量：4
- 2006年
- 目的:为获得能有效预防O型口蹄疫病毒的重组鸡痘病毒活载体疫苗奠定基础。方法:在O型口蹄疫病毒P1-2A基因上游引入Kozak序列,下游通过Linker与细胞因子IL-18联接,获得P1-2A基因与猪IL-18基因融合表达基因盒P1-2A-IL-18,将该表达基因盒克隆至鸡痘病毒中间转移载体pUTAL-3C中,构建重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL-3C-P1-2A-IL-18。通过脂质体转染法,将pUTAL-3C-P1-2A-IL-18与鸡痘病毒282E4株共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过BrdU三次加压筛选,挑选出单克隆重组病毒株。结果:经RT-PCR和间接免疫荧光法鉴定,证明所筛选的1株重组鸡痘病毒在CEF中能正确表达P1-2A-IL-18基因盒。结论:成功获得了一株共表达O型口蹄疫病毒P1-2A基因和猪白细胞介素18基因的重组鸡痘毒疫苗候选株rFPV-3C-P1-2A-IL-18。
- 刘慧娟金宁一马鸣潇金明兰张林李旭计越鲁会军金扩世
- 关键词：口蹄疫病毒IL-18基因
- O型口蹄疫病毒O/LZ株拯救
- 本研究以本室构建的 O 型口蹄疫病毒 O/LZ 株全长 cDNA 为模板,使用 T7RNA 聚合酶系统在体外进行转录,得到病毒 RNA.用脂质体转染法将转录物 RNA 导入 BHK 细胞,可观察到典型的口蹄疫病毒致细胞病...
- 马鸣潇金宁一沈国顺刘慧娟霍晓伟金明兰郑敏鲁会军
- 文献传递
- 鸡α干扰素基因的分子克隆及序列测定
- 2011年
- 鸡α干扰素（chicken interferon alpha,ChIFN-α）全基因为582个碱基,编码193个氨基酸,其中前31个氨基酸为信号肽,后162个氨基酸为成熟蛋白,蛋白分子质量约为19 ku。Sekellick MJ等于1994年首次成功克隆和表达了ChIFN-α基因,并进行了结构分析。本研究应用PCR技术从鸡肝脏组织中克隆出了IFN—α基因，进行序列分析，并与GenBank上登录的基因序列进行了同源性比较，现报道如下。
- 杨松马鸣潇
- 关键词：干扰素基因分子克隆GENBANK成熟蛋白ALPHA
- 动物RNA病毒反向遗传学操作技术研究进展
- DNA重组技术的出现使得在分子水平上分析和改造病毒基因组成为可能,因此大大加深了对病毒分子结构及功能的研究。然而与DNA病毒和反转录病毒不同,大多数RNA病毒由于其基因组本身的结构特点和不稳定性,同时在其复制期间不经历D...
- 马鸣潇金宁一郑敏
- 关键词：RNA病毒基因克隆
- 文献传递
