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呼吸机相关肺炎内源性感染途径的分子流行病学研究被引量：158: 2004年; 目的　用分子流行病学方法研究呼吸机相关肺炎 (VAP)内源性感染途径在VAP发病机制中的作用 ,为探索和发展全新的VAP预防措施提供理论依据。方法　通过前瞻性队列研究 ,动态采集重症监护病房 (ICU)人工气道 (artificialairway ,AA)包括气管插管或气管切开患者胃腔、口咽部、下呼吸道标本行病原菌培养和药敏试验 ;筛选VAP患者中下呼吸道、胃液和 (或 )咽拭子标本中所分病原菌生化反应结果相同并有先后定植次序者 ;通过PFGE方法分析这些病原菌是否具有同源性。结果　 98例人工气道机械通气患者中 5 2例发生VAP ;表型分析 5 2例VAP患者有 13例下呼吸道病原菌呈现胃腔→口咽部→下呼吸道的逆向定植次序 ;3例出现胃腔→下呼吸道的定植次序 ;病原菌的PFGE同源性分析表明ICU中 5 2例VAP患者有 15例 (其中 14例为晚发性VAP)存在胃腔→下呼吸道逆向内源性感染途径 ,占VAP发病总数的 2 8 8% ;PFGE技术方法为分析病原菌同源性的有效方法。结论　病原菌的PFGE同源性分析表明ICU中VAP患者存在胃腔→下呼吸道逆向内源性感染途径。; 李华茵何礼贤胡必杰王葆青陈雪华马伟; 关键词：呼吸机肺炎分子流行病学脉冲场凝胶电泳

放线菌15个属中线型染色体和线型质粒的检测被引量：1: 2003年; Bacterial chromosomes and plasmids are commonly circular, however, lin ear chromosomes and plasmids were discovered among 5 genera of the Actinomycet ales. Here, we use pulsed field gel electrophoresis to study the genomes of 19 spe cies which belong to 15 genera in the Actinomycetales. All chromosomes of 19 spe cies are linear DNA, and linear plasmids with different sizes and copy numbers a re detected among 5 species. This work provide basis for investigating the possi ble novel functions of linear replicons beyond Streptomyces and also helps t o develop Actinomycetales artificial linear chromosome.; 马宁马伟姜成林方萍覃重军张亚协; 关键词：放线菌线型质粒

地中海拟无枝菌酸菌U32染色体特性的脉冲场电泳分析: 2003年; 地中海拟无枝菌酸菌 (Amycolatopsismediterranei)U32是产力复霉素SV的工业生产菌株。采用脉冲场电泳分析发现 ,地中海拟无枝菌酸菌U32仅有一条约 1 0Mb的线性染色体 ,没有内源性质粒。利用Southern杂交法 ,对 1 1个编码力复霉素生物合成、相关初级、次级代谢关键酶以及调控蛋白的基因 ,在U32染色体DNA的PshBI酶切片段上进行了定位。分析发现在一条长度约 70 0kb的PshBI酶切片段上 ,分别存在着力复霉素合成基因簇 (rif)、氮代谢的亚硝酸还原酶小亚基基因 (nasD)、衔接初级与次级代谢的甲基丙二酰变位酶基因 (mcm)、脂肪酸代谢的乙酰辅酶A羧化酶生物素载体蛋白基因 (accA)以及一套核糖体RNA转录单元。同时还发现U32至少有 5套核糖体RNA转录单元。其余定位的基因均只出现单一杂交信号。; 马伟姚玉峰姜卫红焦瑞身赵国屏; 关键词：地中海拟无枝菌酸菌基因组染色体构型基因定位

头状链轮丝菌染色体复制起始区的克隆和对变铅青链霉菌的转化被引量：1: 2002年; 头状链轮丝菌 (Streptoverticillumcaespitosus)ATCC2 742 2是抗肿瘤药物———丝裂霉素A的产生菌 ,根据高GC含量革兰氏阳性菌染色体复制起始区两端基因序列的保守性 ,采用PCR方法从该菌中克隆了一段包含染色体复制起始区 (oriC)的 1 3kb片段。序列分析发现 ,克隆片段与天蓝色链霉菌的oriC及邻近区域的同源性达 80 %以上 ;头状链轮丝菌oriC中含有 2 2个DnaA box ,保守序列为TTGTCCACA。以克隆片段构建的质粒可以跨属转化变铅青链霉菌 (S .lividans)ZX7,原生质体转化效率为 3 2× 10 2 个 μgDNA ;质粒在S .lividansZX7中能以低拷贝形式稳定存在 ;转化子的菌落和菌丝形态均正常。头状链轮丝菌oriC序列与几种链霉菌的oriC有较高的同源性 ,以及在变铅青链霉菌中仍具有复制起始活性等说明链轮丝菌属与链霉菌属在系统发生上关系较近 ;但采用最大似然法分析oriC序列构建的头状链轮丝菌与几种链霉菌的系统进化树表明 ,头状链轮丝菌与几种链霉菌之间的分化距离远大于链霉菌之间的分化距离。; 马伟茅翔卢捷姜卫红焦瑞身覃重军赵国屏; 关键词：染色体复制起始区克隆变铅青链霉菌

基因剔除小鼠制作过程中相关技术的建立: 对小鼠基因剔除过程中所涉及的小鼠胚胎干细胞（ES细胞）的培养、电转和阳性克隆的筛选、小鼠超数排卵等步骤的技术关键研究的结果,表明ES细胞发育全能性的保持是基因剔除小鼠制作成功的前提条件,而采用饲养层细胞培养ES 细胞是维...; 邹洪马伟丁澄金玫蕾; 关键词：基因剔除小鼠 ES细胞; 文献传递

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马伟