顾德周
- 作品数：14 被引量：37H指数：5
- 供职机构：中国科学院生物物理研究所更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程自动化与计算机技术生物学更多>>
- 生物传感器在食源性致病菌检测中的应用被引量：13
- 2011年
- 目前传统的检测食源性致病菌的方法主要依赖培养基对存活的细胞进行选择分离和传代,虽然这种方法很有效,但其检测周期长、程序复杂等缺点已经不能满足现代检测的要求。随着科学技术不断发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学的不断发展,人们已经建立了不少快速、简便、特异、敏感、低耗的检测技术。本文对应用生物传感器对食源性致病菌检测方法的发展及其前景进行了综述。
- 张捷陈广全乐加昌张惠媛顾德周唐茂芝王佩荣汪琦张昕
- 关键词：生物传感器食源性致病菌
- 利用分子马达技术检测霍乱弧菌被引量：6
- 2012年
- 利用载色体chromatophore上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器,建立了应用在食品检测中的快速检测方法。首先在ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-ompW探针,将待测霍乱弧菌和阴性对照分别与此生物传感器结合,比较其催化ATP合成30 min后的ATP产生量,进而对霍乱弧菌的DNA进行检测。ATP合成的量可以通过环境H+的量进行测定,H+的量通过F-DHPE所体现的荧光强度大小标定。结果表明,Chro ompW的浓度在0.078 mg/mL,单核增生李斯特菌DNA浓度在40 ng/mL为最适检测条件。通过与实际检测样品的传统检测方法及PCR检测方法对照,具有良好的检测符合性。
- 张捷向丽萍汪琦张惠媛张昕王宇顾德周王佩荣温铮陈广全乐加昌
- 关键词：霍乱弧菌
- 基于分子马达生物传感器技术的副溶血性弧菌分子分型方法的初步研究被引量：7
- 2013年
- 【目的】建立基于分子马达技术的简便快速的分子分型方法,对携带和非携带毒力基因的副溶血性弧菌进行快速分类。【方法】以F0F1-ATPase为核心构建分子马达,以副溶血性弧菌毒力基因tdh、trh和种特异性基因tlh、toxR为靶基因设计4个探针。通过生物素-亲和素系统将探针与分子马达连接构建F0F1-ATPase分子马达生物传感器,对10株副溶血性弧菌分离株进行分类,并与PCR-电泳-凝胶成像结果进行比较;同时对生物传感器的检测灵敏度和特异性进行研究。【结果】10株试验菌株中10株tdh阳性,0株trh阳性,而10株菌都携带tlh和toxR,与PCR-电泳-凝胶成像结果一致;分子马达生物传感器的最低检测限为1 pg/反应体系,且能够对副溶血性弧菌特异性识别,PCR-电泳-凝胶成像方法的最低检测限为10 pg/PCR反应体系。【结论】建立了基于分子马达的分子分型方法,能够对副溶血性弧菌的致病性进行快速诊断,检测灵敏度比PCR-电泳-凝胶成像方法高了10倍,而且特异性非常高。该方法简便、快速、省时、省力,适用于地方疾控部门和口岸检疫部门的基层实验室开展副溶血性弧菌监测和流行病学溯源工作。
- 张捷李兆杰王煜张惠媛陆琳王静刘岩顾德周汪琦张昕王佩荣乐加昌陈广全
- 关键词：副溶血性弧菌分子马达分子分型毒力基因
- 利用F_0F_1-ATPase分子马达生物传感器检测食品中的副溶血性弧菌被引量：2
- 2012年
- 利用载色体上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器对副溶血性弧菌检测快速检测。在ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-toxR探针,将待测副溶血性弧菌标准菌株和阴性对照分别与生物传感器结合后,比较其催化ATP合成30min后的ATP产生量,可以对副溶血性弧菌的DNA进行检测。ATP合成的多寡可以通过环境中H+的量进行测量,而H+的多寡通过F-DHPE所体现的荧光强度大小来获得。结果表明,chro toxR的质量浓度在0.156mg/mL,副溶血性弧菌DNA质量浓度在40ng/mL时为最适检出条件。通过与实际检测样品的传统检测方法及聚合酶链式反应检测方法对照,具有良好的符合性。
- 张捷顾德周张惠媛刘岩汪琦张昕王佩荣陶雨风范斐陈广全乐加昌
- 关键词：生物传感器副溶血性弧菌
- F_0F_1-ATPase分子马达技术对阪崎肠杆菌检测的研究被引量：2
- 2013年
- 本研究建立了应用F0F1-ATPase分子马达生物传感器快速检测阪崎肠杆菌的方法。自嗜热菌中提取载色体后,合成针对阪崎肠杆菌的生物素化ITS探针,在载色体ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-ITS探针,将待测阪崎肠杆菌标准菌株和阴性对照分别与此生物传感器结合,比较其催化ATP产生量,进而对阪崎肠杆菌DNA进行检测。结果表明,chro ITS探针浓度0.019mg/mL,阪崎肠杆菌DNA浓度40ng/mL为最适检测条件。通过与传统检测方法及PCR检测方法对照,本方法具有良好的检测符合性。
- 张捷王煜陆琳刘艳华周琦孙梓晏顾德周尚世进张惠媛王佩荣陈广全乐加昌
- 关键词：阪崎肠杆菌
- F_0F_1-ATPase生物传感器检测食品中食源性诺如病毒被引量：5
- 2014年
- 应用分子马达生物传感技术,建立食品中诺如病毒特异性快速检测方法。以嗜热菌中提取的载色体(chromatophore)为材料,根据诺如病毒ORF1和ORF2连接处的高度保守区设计探针,利用生物素-亲和素系统将诺如病毒探针连接在F0F1-ATPase的ε亚基上构建生物传感器。提取病毒RNA并将其与生物传感器结合的同时启动ATP合成,比较其荧光强度的差别,对样品中的RNA进行检测。建立并优化了F0F1-ATPase生物传感技术检测食源性诺如病毒的方法。所建立的方法具有良好的特异性,12个含诺如病毒样品均能检出,3个不含诺如病毒样品均未检出,无假阴性或假阳性情况出现。该方法可在1 h内完成检测,检测灵敏度在RNA水平上达到0.005 ng/m L。所建立的分子马达生物传感技术可以较好的检测食品中的诺如病毒,并为其他病毒的检测提供参考。
- 张捷许美玲王璇王煜刘岩王小晋张丽张慧媛顾德周王佩荣陈广全乐加昌
- 关键词：诺如病毒
- 利用F_0F_1-ATPase分子马达技术检测志贺氏菌被引量：2
- 2013年
- 利用载色体chromatophore上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器,建立应用在食品检测中快速检测方法。首先从嗜热菌中提取载色体,合成生物素化宋内氏志贺氏菌IpaH探针,在载色体ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-IpaH探针,将待测宋内氏志贺氏菌标准菌株和阴性对照分别与此生物传感器结合,比较其催化ATP合成10 min后的ATP产生量,进而对宋内氏志贺氏菌DNA进行检测。ATP合成的量可以通过luciferase-luciferin检测试剂所体现的荧光强度大小标定。结果表明,chroIpaH(连接在载色体chro上的IpaH探针)的浓度在0.031 mg/mL,宋内氏志贺氏菌DNA浓度在50 ng/mL为最适检测条件。通过与实际检测样品的传统检测方法及PCR检测方法对照,具有良好的检测符合性。
- 张捷王燕飞王璇王小晋顾德周张惠媛尚士进王娟汪琦王佩荣陈广全乐加昌
- 关键词：宋内氏志贺氏菌
- 一种用于检测沙门氏菌的分子马达生物传感器试剂盒
- 一种用于检测沙门氏菌的分子马达生物传感器试剂盒属于食品微生物快速检测领域，主要解决传统检测方法时间过长(5～6天)。本发明的核心技术是利用载色体Chromatophore上的F<Sub>0</Sub>F<Sub>1</S...
- 张捷顾德周张惠媛王佩荣乐加昌陈广全
- 文献传递
- F_0F_1-ATPase分子马达技术对单核细胞增生李斯特菌检测的研究被引量：3
- 2012年
- 利用载色体chromatophore上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器,建立了应用在食品检测中快速检测方法。首先从嗜热菌中提取载色体后,标记荧光探针F-DHPE,合成生物素化单增李氏菌prfA探针,在已标记F-DHPE的载色体ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-prfA探针,将待测单核细胞增生李斯特菌标准菌株和阴性对照分别与此生物传感器结合,通过环境H+量测定ATP产生量,进而对单核细胞增生李斯特菌DNA进行检测。结果表明,chroprfA(连接在载色体chro上的prfA探针)的浓度在0.052mg/mL,单核细胞增生李斯特菌DNA浓度在40ng/mL为最适检测条件。通过传统检测方法及PCR检测方法对照,本方法具有良好的检测符合性。
- 张捷张昕范爱红张惠媛汪琦顾德周王佩荣韩晶陆琳陈广全乐加昌
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌
- F_0F_1-ATPase生物传感器快速检测食品中甲肝病毒被引量：1
- 2013年
- 建立一种应用F0F1-ATPase生物传感器快速检测甲肝病毒的方法。利用生物素-亲和素系统将甲肝病毒特异性分子探针连接在F0F1-ATPase的ε亚基上构建分子马达检测装置。将甲肝病毒阳性血清和阴性对照RNA分别与生物传感器结合,比较其启动ATP合成10min后的荧光强度的差别,对样品中甲肝病毒进行检测。结果表明,所建立的F0F1-ATPase生物传感器对检测食源性甲肝病毒具有良好的特异性和较高的灵敏度,对甲肝病毒核酸检测灵敏度达到0.01ng/mL,与反转录聚合酶链式反应检测结果作比较,结果具有良好一致性;本方法在1h内即可完成检测,可应用于食品中甲肝病毒的污染状况调查及高效检测。
- 张捷王小晋许美玲张惠媛张雷刘岩顾德周王佩荣乐加昌陈广全
- 关键词：生物传感器分子马达甲肝病毒
