陈费
- 作品数：22 被引量：18H指数：2
- 供职机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 衰老个体中的组织干细胞
- 2017年
- 组织干细胞是组织器官稳态维持和损伤修复或再生的结构基础。伴随着年龄的增加,组织干细胞的数量、增殖和分化等功能及其所处微环境发生改变,从而使得老年个体再生修复功能降低或异常。此外,组织干细胞的衰老与老年个体衰老相关疾病的发生有着密切的关系。该文拟介绍几种目前比较明确的组织干细胞在老年个体中发生改变的基本特征及其发生机制,旨在为正确理解老年组织机能低下提供重要的理论基础,并希望能够建立有效可行的延缓或逆转组织干细胞衰老的途径以提高老年人群的生活质量。
- 刘清桂陈佳佳陈费王敏君胡以平
- 关键词：衰老
- 胚胎干细胞转染外源基因教学实验优化被引量：1
- 2017年
- 针对胚胎干细胞的培养和外源基因转染实验教学过程中,存在学生培养的胚胎干细胞状态较差、转染外源基因效率偏低等问题,通过实验探索,发现通过控制接种滋养层细胞的密度、悬浮转染代替传统贴壁转染的方法,可显著改善上述问题。该探索不仅优化了转染方法、提高了教学效果,也为学生培养科研能力奠定了基础。
- 陈费王敏君姚浩刘清桂胡以平
- 关键词：胚胎干细胞基因转染
- CD63在制备肝脏疾病诊断试剂盒或制备预防或治疗肝脏疾病药物中的应用
- 本发明涉及医药生物工程技术领域，提供了肝干细胞的特异性表面分子标志物CD63及其应用，特别是CD63在制备肝脏疾病诊断试剂盒或制备预防或治疗肝脏疾病药物中的应用。本发明利用该分子标志从肝脏中快速分离和培养扩增肝干细胞的方...
- 胡以平何志颖陈费王敏君于兵
- 文献传递
- 小鼠肝干细胞的识别鉴定及其分化谱系的研究
- 组织干细胞对于哺乳动物机体稳态的维持具有重要意义，然而肝脏作为体内最重要的消化器官之一，成体肝脏干细胞怎样参与肝脏细胞的更替与修复却是领域内未解决的基本问题，甚至“肝干细胞是否存在”也一直备受争议。研究成体肝干细胞的主要...
- 陈费
- 关键词：肝干细胞细胞移植
- 文献传递
- 人成体肝细胞在Fah^(-/-)Nod/Scid小鼠肝脏中的显著增殖被引量：1
- 2010年
- 利用人肝细胞异种移植到受体鼠肝内建立人源化肝脏的嵌合体小鼠(人鼠嵌合肝)对药物代谢、乙型肝炎病毒等嗜肝性病毒及其疫苗的研究具有重要意义.研究表明,利用Fah-/-Rag2-/-Il2rg-/-三基因剔除小鼠可获得人肝细胞在小鼠肝脏中的显著再殖,但较高的死亡率及纯合子不能用于繁殖,制约着该小鼠模型的规模化应用.本研究结合延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因剔除(Fah-/-)小鼠的肝脏再殖优势和Nod/Scid小鼠异种移植的特点,将这两种小鼠进行杂交繁育建立Fah-/-Nod/Scid小鼠品系,Fah-/-Nod/Scid小鼠可以纯合保种并能正常繁殖.采用提前停药的预处理方案,结合FK506处理,移植的人成体肝细胞能够实现在Fah-/-Nod/Scid小鼠肝脏中的显著增殖,肝脏再殖程度达到30%以上.采用体重曲线、肝功能和人肝细胞功能蛋白表达等三方面指标评价嵌合肝脏中人肝细胞的功能,结果表明再殖的肝细胞具有正常的人肝细胞功能.这些结果表明,Fah-/-Nod/Scid小鼠可以作为理想的可规模应用的人鼠嵌合肝模型,该技术体系的改进简化了Fah-/-小鼠作为人源化肝脏小鼠模型的实用性问题.
- 苏宝亮刘长城向导张海斌袁斯明王敏君陈费朱海英何志颖王欣胡以平
- 关键词：人肝细胞细胞移植NOD/SCID小鼠
- 医学细胞生物学实验教学模块教学设计探讨被引量：9
- 2014年
- 医学细胞生物学实验课教学的重要地位日益凸显,而实验课教学中课程内容设置的问题不容忽视。常规课程内容多以验证性实验为主,缺乏综合能力和创新能力的培养,也不利于发挥学生的积极性和主观能动性。在教学实践中,以"模块"为单位组织教学内容,各模块之间具有相对的独立性,在同一模块中可以进行内容、设备和师资的更新和补充,可针对不同的教学对象和教学层次的需要而选择相应的教学模块进行组合,从而更加强调系统集成的特点,使教学内容更具先进性、针对性、灵活性和可选择性,解决了教学内容陈旧过时和学时分配不合理的问题。
- 何志颖王敏君陈费谢志芳张红霞李建秀朱海英胡以平
- 关键词：细胞生物学实验课教学模块
- 肝细胞多倍化的研究进展
- 2017年
- 多倍体肝细胞含有两组或两组以上的DNA染色体组,是哺乳动物成熟肝细胞的典型特征。肝细胞多倍化过程首次发生在出生后的肝脏发育过程中,主要由胰岛素-Akt信号通路调控的细胞质不完全分裂导致。随着年龄的增加,多倍体肝细胞的比例还会继续升高,老年小鼠和人肝脏中多倍体肝细胞比例可高达90%和40%。而当肝脏受到肝脏切除、毒性刺激和代谢过载以及氧化应激等病理损伤时,肝细胞多倍化现象会再次发生。但是,当衰老的多倍体肝细胞在年轻小鼠肝脏中发生增殖时,不仅可产生低倍体肝细胞,还可以逆转其衰老特征。生理和病理过程中多倍体肝细胞的生物学功能备受争议,一般认为与细胞的成熟和终末分化、细胞衰老以及疾病有着重要的关系。本文主要阐述正常生理发育和病理条件下多倍体肝细胞形成过程及潜在的生物学意义,以及多倍体肝细胞逆转对临床肝脏疾病研究的可能提示。
- 阎琛刘清桂陈佳佳孙宇韩进陈费朱海英王敏君
- 关键词：多倍化
- 一种促进免疫细胞荧光染色实验抗原暴露的方法
- 本发明公开了一种促进免疫细胞荧光染色实验抗原暴露的方法，涉及生物工程技术领域。使用4％多聚甲醛固定5分钟，PBS清洗3次，每次2分钟；称取10mg胃蛋白酶粉末溶于10ml 0.01N HCL溶液，浓度为1mg/ml；加入...
- 王敏君陈费徐守佳金宜强
- 依托医学细胞生物学课程,以专业特色推进干细胞教学被引量：1
- 2016年
- 干细胞研究是当今生命医学领域的前沿,由于其在生物和临床医学领域有非常强的应用潜力和理论价值受到世界各国的高度关注。以医学细胞生物学课程为依托,专业化、针对性地进行干细胞生物学的教学,使得医学院校各个专业学生快速地理解专业相关干细胞生物学基础知识和前沿进展,是培养专业人才、提高教学质量的有效途径。
- 王敏君陈费朱海英胡以平
- 关键词：细胞生物学
- 下调SIRT6对肝癌干细胞干性维持的抑制作用被引量：1
- 2020年
- [目的]探讨抑制SIRT6表达在肝癌干细胞干性维持中的作用及潜在机制。[方法]在不同肝癌细胞系中构建肝癌干细胞模型(Lv-Pnanog-GFP),利用流式细胞术分选出不同来源的肝癌干细胞,采用蛋白免疫印迹(Western blot,WB)和免疫细胞化学(immunocytochemistry,ICC)技术检测SIRT6蛋白在肝癌干细胞中的表达水平;构建SIRT6慢病毒短发卡RNA感染载体(shSIRT6)感染肝癌干细胞,采用WB技术检测shSIRT6的干扰效率;采用实时定量反转录聚合酶链反应(real-time PCR)检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的干性基因(Nanog、OCT4、CD13、SOX2、EpCAM、CD44)mRNA的表达水平,ICC方法检测EpCAM蛋白的表达水平;采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)试剂盒和细胞增殖活力(CCK8)试剂盒检测抑制SIRT6表达后肝癌干细胞的增殖能力;采用克隆形成和成球实验检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的自我更新能力;利用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)试剂盒检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的衰老水平。[结果]WB和ICC检测结果显示,Nanog阳性肝癌干细胞中SIRT6表达水平明显高于Nanog阴性肝癌细胞;real-time PCR检测结果显示,抑制SIRT6后,肝癌干细胞的干性基因(Nanog、OCT4、CD13、SOX2、EpCAM、CD44)mRNA表达水平降低。与real-time PCR结果一致,ICC结果也表明,抑制SIRT6后,干性标志物EpCAM的蛋白表达水平降低(P<0.01)。细胞增殖检测结果进一步显示,抑制SIRT6,肝癌干细胞的增殖水平降低(P<0.05)。克隆形成实验和细胞成球实验结果显示,抑制SIRT6导致肝癌干细胞的克隆形成能力和成球能力一致性降低(P<0.01)。SA-β-Gal活性检测结果显示,抑制SIRT6后,肝癌干细胞的SA-β-Gal活性显著性提高(P<0.01)。[结论]肝癌干细胞高表达SIRT6,通过抑制SIRT6表达可诱导肝癌干细胞发生衰老,导致其干性标志物表达水平下降,增殖能力降低,肝癌干细胞克隆形成和成球能力下降。
- 刘清桂苏静陈佳佳陈费杨桃向桂齐阳王敏君
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶肝癌干细胞NANOG干细胞特性衰老
