陈尚萍
- 作品数：14 被引量：105H指数：7
- 供职机构：中国科学院水生生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 虹鳟鱼(Oncorhynchus mykiss)组蛋白H_3启动子的分子克隆及在稀有(鱼句)鲫(Gobiocypris rarus)中的表达活性分析被引量：10
- 2004年
- 使用高保真PCR方法从虹鳟鱼基因组中克隆得到虹鳟鱼组蛋白H3启动子.将虹鳟鱼组蛋白H3启动子插入启动子缺失的增强绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-1中,构建成重组载体pRH3EGFP-1.通过显微注射法得到转pRH3EGFP-1稀有(鱼句)鲫.在荧光解剖镜下,可以清楚地观察到EGFP在发育到原肠胚的转pRH3EGFP-1稀有(鱼句)鲫中表达.在稀有(鱼句)鲫幼体鱼苗中也可以清楚地观察到EGFP在多个组织中的泛组织表达.比较CMV启动子、鲤鱼β-actin启动子、虹鳟鱼组蛋白H3启动子的EGFP表达载体pCMVEGFP,pCAEGFP,pRH3EGFP-1在稀有(鱼句)鲫胚胎中的表达特性,结果表明pCMVEGFP最早表达,其后为pRH3EGFP-1和pCAEGFP,表达的强度依次为pCMVEGFP>pCAEGFP>pRH3EGFP-1.这说明虹鳟鱼组蛋白H3启动子可以作为一种有效的启动子,应用于鲤科鱼类(如稀有(鱼句)鲫)的转基因研究.
- 茅卫锋汪亚平孙永华吴刚陈尚萍朱作言
- 关键词：虹鳟鱼转基因鱼分子克隆表达活性
- 快速生长转基因鲤鱼中试
- 朱作言汪亚平胡炜张西瑞冯建新司开松张甫英崔宗斌陈尚萍甄建设叶新太曾志强孙永华李启金
- 在转基因鱼理论模型（朱作言等，1989）指导下，以本实验室构建的、具有自主知识产权的、全部由我国鲤科鱼类基因元件组成的“全鱼”GH基因重组体pCAgcGH和pCAgcGHc为基因工程定向育种转移基因，培育出快速生长的转“...
- 关键词：
- 关键词：中试
- 外源基因定点整合的双重荧光筛选方法
- 本发明公开了一种外源基因定点整合的双重荧光筛选方法,该方法以受体基因组靶位DNA顺序为定点整合载体的同源DNA片段,以绿色荧光蛋白GFP基因为正向选择基因,置于同源DNA片段内,以蓝色荧光蛋白BFP基因为负向选择基因,置...
- 汪亚平胡炜陈尚萍朱作言
- 文献传递
- 鲤鱼sGnRH基因克隆及其在成熟个体的表达分析被引量：10
- 2004年
- 采用RACE方法 ,从鲤鱼脑组织克隆了两个差异的sGnRH(salmonGnRH ,[Trp7Leu8]GnRH)cDNAs ,即cDNA1和cDNA2 ,其长度分别为 393和 4 78bp。两个cDNAs都包括一个 2 85bp开放阅读框 ,编码的sGnRH前体为 94个氨基酸残基 ,由一个信号肽、sGnRH十肽和一个由蛋白水解位点 (Gly Lys Arg)连接的促性腺激素释放激素相关肽共 3部分组成。用内含子捕获得到相应的两个差异sGnRH基因 ,即sGnRHgene1和 gene2 ,其基本结构都包括 4个外显子和 3个内含子 ,3个内含子的核苷酸相似性分别为 71 1%、76 1%和 88.0 %。鲤鱼sGnRHcD NAs及基因的基本结构和编码特点与已报道的不同形式GnRHcDNAs和GnRH基因相似 ,由此推测所有类型的GnRH可能来自一个共同的祖分子。Southern杂交进一步证实鲤鱼基因组存在两个不同的sGnRH基因座位。相对定量RT PCR检测发现 ,两个sGnRH基因除在精巢的表达存在差异外 ,在脑区、垂体和成熟卵巢共表达。其中两个sGnRH基因在端脑和下丘脑的表达水平明显高于后脑区。根据sGnRHmRNAs在多个脑区、性腺和垂体的共存推测 ,sGnRH可能对鲤鱼下丘脑 垂体 性腺轴的调节有至关重要作用 。
- 黎双飞胡炜汪亚平孙永华陈尚萍朱作言
- 关键词：促性腺激素释放激素鲤鱼
- 鱼类转基因早期胚胎细胞的核移植研究
- 2000年
- 像许多转基因高等生物一样,用显微注射方法研制的转基因鱼均为转植基因嵌合体,培育纯合转基因品系已成为研究者们向往和追求的目标。以澎泽鲫(Carassius auratus,Pengze var.)和黄河鲤(Cyprinus carpio,Huanghe var.)为实验材料,以转基因囊胚细胞核或原肠胚细胞核为供体,进行了细胞核移植.检测了转植基因在所获得的移核胚胎和5尾澎泽鲫移核鱼及1尾黄河鲤移核鱼中的存在状况,分析了用转基因早期胚胎细胞核移植方法研制纯合转基因鱼的可能性。
- 陈尚萍赵浩斌孙永华张甫英朱作言
- 关键词：细胞核移植胚胎细胞外源基因
- 转基因异源四倍体鲫鲤F_1的研究被引量：16
- 2002年
- 采用显微注射法将含有鲤鱼 β actin基因启动子的草鱼生长激素基因“全鱼”基因pCAgcGHc转入异源四倍体鲫鲤 ,然后使其自交得到转基因异源四倍体鲫鲤F1,对 15 0日龄F1体重和体长进行检测 ,可明显看见转基因异源四倍体鲫鲤F1的生长优势 ;取F12 0尾 ,提取尾鳍基因组DNA ,采用合适的引物 ,PCR方法检测转基因异源四倍体鲫鲤F1是否含有外源生长激素基因 ,结果 15 0日龄F1阳性率达到 90 % ,且有些雄性个体可以挤出少量精液 ,而普通 15 0日龄异源四倍体鲫鲤无此现象。
- 冯浩曾志强刘少军张轩杰周工建李建中刘筠汪亚平陈尚萍胡炜朱作言
- 关键词：鱼类F1生长激素
- 外源基因在鱼类核移植胚胎中的转录起始被引量：1
- 2000年
- 比较了hGH转植基因在F4代的转MThGH基因鱼, F4代胚胎细胞的核移植后代, 以及F4代尾鳍培养细胞的核移植后代中的转录时序差异. RT-PCR实验结果表明, hGH基因在转基因鱼F4代胚胎中从原肠早期开始转录; F4代胚胎细胞核移植的后代在囊胚早期已能检测到hGH基因转录本; F4代尾鳍培养细胞核移植的后代自16胞期就出现hGH基因的转录．上述结果表明, 鲤鱼卵细胞质对分化细胞核特定基因的再程序化能力是有限的, 进而推论鱼类细胞核移植试验中仅有少部分的供体核能够发生完全再程序化.
- 孙永华陈尚萍汪亚平朱作言
- 关键词：转基因鱼核移植转录外源基因
- 培育快速生长转基因动物的方法
- 生物的生长是一个复杂的过程,受到多种基因产物影响,因此,通过转移单一生长激素基因的方法,难以实现动物生长性状的改良目的。本发明采用协同基因同步转移方法,将脊椎动物生长调节中的两个重要因子－生长激素和胰岛素样生长因子的重组...
- 朱作言汪亚平崔宗斌张甫英陈尚萍
- 文献传递
- 不同品系间斑马鱼的细胞核移植被引量：8
- 2001年
- 以斑马鱼AB品系囊胚晚期胚胎细胞为细胞核供体,以斑马鱼长鳍品系未受精的去核卵为受体,进行不同品系间斑马鱼的细胞核移植.采用显微注射法,操作胚胎1119枚,获得克隆鱼14尾.RAPD分析显示,克隆鱼与细胞核供体鱼的DNA扩增带纹一致而与受体鱼不同,表明克隆鱼的遗传物质来源于供体细胞核.模式动物斑马鱼的细胞核移植技术的建立,有望在研究动物发育过程的基因功能、细胞核的发育潜能及核质关系等重要问题上发挥作用.
- 胡炜汪亚平陈尚萍朱作言
- 关键词：斑马鱼细胞核移植DNA指纹发育生物学克隆
- 用微细胞技术转移鱼类遗传因子初报
- 1988年
- 自Ege等(1974)的工作开始，在70年代已逐步建立起一种通过微细胞把一个细胞的染色体转移到另一个细胞中，并作为在杂种细胞里起作用的遗传因素，永远地保留下去的技术。
- 陆仁后陈尚萍魏彦章
- 关键词：杂种鱼类染色体
