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转录抑制因子GCF2促进肝癌细胞BEL-7404迁移相关靶基因的初步鉴定被引量：4: 2015年; GCF2是转录抑制因子,为了研究GCF2蛋白在肝癌细胞BEL-7404迁移中的作用,并根据芯片结果验证GCF2调控参与迁移的靶基因,我们采用siR NA沉默GCF2蛋白表达,然后通过transwell实验检测GCF2沉默前后BEL-7404细胞迁移的变化,最后荧光定量RT-PCR和Western blot验证芯片结果中与迁移相关基因的表达。研究结果显示siR NA干扰GCF2成功后进行迁移实验,si RNA-GCF2组,FAM-siR NA-NC组,脂质体组,和未处理野生型BEL-7404组24 h后细胞穿过8滋m微孔滤膜的数目(x±s)分别为41.66±1.52、41.66±1.15、41.33±1.5、18.66±0.577,差异均有统计学意义(p约0.01)。QRT-PCR验证9个候选基因中,MyD 88在si RNA-GCF2组内表达显著高于其余三组(p约0.05)。Western blot检测siR NA干扰GCF2后肝癌细胞BEL-7404的MyD 88的蛋白表达显著高于其余三组(p约0.05)。结果表明si RNA沉默转录因子GCF2蛋白表达可抑制肿瘤细胞BEL-7404迁移,推测GCF2作为转录因子可能通过抑制靶基因MyD 88的表达参与细胞的迁移。; 吴博晁耐霞赵飞兰李金平陈力陈德凤黄天明莫发荣张琪惠罗国容; 关键词：原发性肝细胞肝癌细胞迁移小干扰RNA MYD88

肿瘤相关抗原GC结合因子2 shRNA表达载体的构建及鉴定: 2013年; GC结合因子2（GC-binding factor 2, GCF2）是一种转录抑制因子, 因为能与表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）基因启动子上富含GC的序列结合而得名。研究表明, GCF2可通过多种途径参与细胞增殖、细胞周期调控及细胞凋亡等进程。GCF2广泛地高表达于肺癌A549细胞、胃腺瘤AGS细胞及白血病K562细胞等人类多种肿瘤细胞, 并且发现GCF2在这些细胞中的高表达与肿瘤细胞增殖、侵袭及肿瘤耐药等密切相关。RNA干扰（RNA interence, RNAi）可特异性地阻断靶基因表达, 是研究基因功能的有效技术。我们的前期研究表明, GCF2是一种肿瘤相关抗原, 在HepG2等肝癌细胞株中高表达[8]。本实验设计针对GCF2 mRNA的干扰序列, 并且与真核表达载体pGPU6/GFP/Neo重组而构建重组质粒pGPU6/GFP/Neo-GCF2, 经酶切和测序鉴定后, 将该重组质粒转染肝癌细胞株HepG2, 以实现对GCF2表达的抑制, 为进一步研究GCF2对肝癌细胞生物学行为的影响及可能的作用机制奠定基础。; 李金平晁耐霞蒋日婷马平陈德凤陈力吴博黄天明莫发荣罗国容; 关键词：肝细胞癌质粒

肿瘤相关抗原GCF2选择性剪接区在肝癌及正常肝组织的表达及意义: 目的检测GCF2的5个选择剪切区在正常肝细胞株/组织/肝癌细胞株/组织和卵巢癌细胞株中的表达情况，旨在初步探索GCF2选择性剪切在肝癌发生发展中的可能作用。　　方法根据Genbank数据库人GCF2的6种不同转录本，预测...; 陈力; 关键词：肝细胞癌选择性剪接逆转录聚合酶链反应; 文献传递

GCF2选择性剪接区在肝癌组织及细胞株中的表达及意义被引量：1: 2014年; 目的：研究肿瘤相关抗原GCF2选择性剪接区在人肝癌细胞株、肝癌组织、癌旁组织及正常成人肝细胞及组织中的表达及意义.方法：采用RT PCR检测GCF2 5个选择性剪接区（D1～D5）在人肝癌细胞株、43例肝癌组织、相对应的癌旁组织,以及正常成人肝细胞株及9例肝组织中的表达.结果：GCF2 4个选择性剪接区（D1～D4）在所检测的细胞株、肝癌组织、癌旁组织和正常成人肝组织中均未检测到表达;GCF2选择性剪接区D5仅在人肝癌细胞株检测到阳性表达;在43例肝癌组织及相应的癌旁组织中,有41例肝癌组织GCF2选择性剪接区D5呈阳性表达,阳性表达率为95.35％（41/43）,而9例正常肝组织均未检测到GCF2选择性剪接区D5表达.结论：GCF2 D5选择性剪接区在肝癌组织中有较高阳性表达,GCF2选择性剪接区D5可能与肝癌的发生发展有关.; 陈力李金平晁耐霞吴博陈德凤黄天明罗国容; 关键词：肝癌

siRNA沉默GC结合因子2表达对BEL-7404细胞增殖和凋亡的影响被引量：6: 2013年; 目的 GC结合因子2(GC binding factor 2,GCF2)是一种转录抑制因子,能抑制富含GC序列启动子的基因转录。GCF2在BEL-7404等肝癌细胞株的高表达可能与肝癌的发生及发展有关。文中通过靶向GCF2的GCF2-siRNA序列沉默GCF2表达,观察GCF2对人肝癌细胞株BEL-7404增殖及凋亡的影响。方法将实验细胞分为GCF2 siRNA转染组(转染GCF2-siRNA)、阴性对照组(转染无关序列)、脂质体对照组(只加Lipofectamine 2000)、常规培养对照组(不加转染试剂和siRNA序列)共4组。使用Lipofectamine 2000将GCF2-siRNA转染BEL-7404细胞,Western blot检测转染后48 h GCF2蛋白表达水平,用细胞计数试剂盒(cell counting kit,CCK)-8和AnnexinV/PI-FITC双染流式细胞术检测细胞增殖和凋亡变化。结果 GCF2-siRNA可有效下调GCF2表达、抑制BEL-7404细胞的增殖,细胞凋亡率增加。与各对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 GCF2可促进肝癌细胞株BEL-7404的增殖,抑制该细胞凋亡,提示GCF2通过对肝癌细胞增殖和凋亡的影响参与肝癌的发生、发展。; 李金平蒋日婷晁耐霞马平陈德凤陈力吴博莫发荣罗国容; 关键词：肝细胞癌肿瘤相关抗原增殖凋亡

GC结合因子2在肝细胞癌中的表达和意义被引量：2: 2013年; 目的:探讨转录因子GC结合因子2(GC binding factor 2,GCF2)蛋白的表达与肝细胞癌的关系。方法:用免疫组化方法检测21例正常肝组织,58例肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)及其对应癌旁组织(n=58)中GCF2的表达情况。结果:GCF2在HCC组织中的阳性表达率(31.0%,18/58)显著低于癌旁(84.5%,49/58)和正常肝组织(90.5%,19/21)(P<0.05),GCF2在HCC组织中的表达量亦显著低于癌旁和正常肝组织(P<0.05);GCF2的阳性表达与HCC患者的性别、年龄、肿瘤大小、临床分期、有无肝硬化基础、AFP及HBsAg情况之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GCF2在HCC中的表达下降与HCC的发生可能有一定关系。; 马平晁耐霞潘复泽陈力吴博李金平陈德凤夏冬梅王琳琳罗国容; 关键词：肝细胞癌肿瘤相关抗原免疫组化

肿瘤相关抗原GCF2对肝癌细胞株HepG2细胞生物学行为的影响: 本实验旨在观察肿瘤相关抗原GCF2对肝癌细胞株HepG2细胞周期、增殖和凋亡等生物学行为的影响。针对GCF2基因特点设计并筛选有效的靶向CGCF2表达的siRNA,将后者瞬时转染肝癌细胞株HepG2,利用PI染色法、CC...; 李金平罗国容蒋日婷晁耐霞陈德凤陈力马平吴博黄天明莫发荣

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陈力