阮颖
- 作品数：132 被引量：475H指数：12
- 供职机构：湖南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学医药卫生更多>>
- 马铃薯抗病基因工程研究被引量：5
- 2007年
- 马铃薯是世界上最主要的粮食作物之一,但真菌性病害、病毒性病害和细菌性病害等对马铃薯的危害非常严重,成为制约其产量的主要影响因素之一。近年来,随着基因工程的迅速发展,通过转基因的方法在提高马铃薯抗病性方面取得了较大进展,对其进展进行了综述。
- 范亚丽刘春林阮颖邓荟芬李进
- 关键词：马铃薯病毒病基因工程晚疫病
- 生物科学专业多学科综合性野外实习的探索与实践被引量：4
- 2019年
- 野外实习作为动植物学、生态学教学课程中的重要组成部分,是理论联系实际、巩固和加深课堂教学内容的重要环节。湖南农业大学开展了生物科学专业综合性野外实习的探索实践,构建了多学科综合性野外实习的教学体系,同时开展动物学、植物学、生态学等内容的教学实习,编制实习教材,建设野外实习基地,改进教学模式。
- 黄勇阮颖
- 关键词：野外实习生物科学教改
- 利用CRISPR/Cas9系统定向编辑甘蓝型油菜BnaLCR78基因被引量：4
- 2019年
- 分泌信号肽是生物体内的一类重要功能分子。通过生物信息学分析,揭示甘蓝型油菜BnaLCR78基因编码一个由78个氨基酸组成、N端包含分泌信号肽且C端富含半胱氨酸的蛋白,属于富含半胱氨酸的分泌信号肽。为进一步研究该基因的功能,借助农杆菌介导的甘蓝型油菜下胚轴遗传转化方法,利用CRISPR/Cas9系统对甘蓝型油菜BnaLCR78基因进行编辑,实现定向敲除。本实验共计使用1 200个外植体,经除草剂草铵膦的抗性筛选及对213株抗性苗基因组DNA的PCR检测,获得了26株转基因油菜,转化率约为2.17%,但在T0代并未获得发生了目标基因被编辑的植株。幸运地是从T0自交获得的T1植株中获得基因被编辑了的植株。通过扩增T1代27株转基因油菜靶位点并测序,发现有1株在靶位点2有一个T碱基的插入,其基因型为+1/WT的杂合突变体,说明在T1植株中,基因的编辑效率达到了3.7%。这对后续研究甘蓝型油菜BnaLCR78基因功能的研究提供了帮助。
- 王金彪何星辉高谢旺覃诗琪邓淞月刘春林阮颖
- 关键词：甘蓝型油菜生物信息学
- 甘蓝型油菜BnaSDG8基因CRISPR/Cas9敲除载体的构建及功能探究被引量：5
- 2018年
- 以甘蓝型油菜‘湘油15号’为试材,通过生物信息学分析,运用CRISPR/Cas9系统对Bna SDG8第1个外显子上的Bna SDG8–A和Bna SDG8–C保守序列区域进行CRISPR/Cas9敲除位点设计,构建了CRISPR/Cas9敲除载体p CAMBIA1300–sg RNA/Cas9–Bna SDG8;通过遗传转化,获得转化植株19株;经测序比对,4株植株的Bna SDG8被成功编辑;通过对定向敲除植株开花时间的统计分析,初步确定Bna SDG8参与甘蓝型油菜开花时间的调控。
- 李东昊姜玲刘春林阮颖
- 关键词：甘蓝型油菜
- 拟南芥油体钙蛋白基因CALEOSIN3对胁迫环境及ABA诱导的响应被引量：1
- 2022年
- 拟南芥CALEOSIN3(以下简称为AtCLO3)是一种油体膜蛋白,以钙结合蛋白的形式结合在油体表面,对维持油体结构及稳定具有重要的作用。为研究AtCLO3对胁迫环境的响应,我们将已构建的AtCLO3表达质粒pBI101-pCLO3∶∶GUS浸花法转化拟南芥,获得其转基因植株;利用GUS组织化学染色法和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术分析正常生长条件下,以及高盐、高温胁迫和ABA诱导条件下的AtCLO3基因表达情况。结果显示,正常生长条件下,AtCLO3基因在成熟莲座叶(叶脉及叶缘排水器)、花和果荚外壳均有表达,其中在花器官中表达最为明显,在15 d幼苗中几乎无表达;根、茎和成熟种子中无表达;高盐、高温胁迫及ABA诱导条件下,AtCLO3基因表达均上调,其中高温胁迫下表达显著上调。结果表明,正常生长条件下,拟南芥AtCLO3基因主要在花器官中高表达,并对高温胁迫响应强烈,为进一步利用该基因用于作物抗逆性育种提供可行性依据。
- 向兰舟胡娅晴谢涵刘春林阮颖
- 关键词：环境胁迫ABA诱导
- 禽流感抗原基因NA导入生菜的研究被引量：1
- 2012年
- 以生菜子叶为转化受体材料,利用农杆菌介导的方法将禽流感抗原基因NA导入生菜,通过用特异引物进行PCR检测,获得6株转基因植株。经PT-PCR检测,证明外源基因已整合到了生菜基因组中,且能够正常表达。
- 范亚丽李进阮颖刘春林
- 关键词：农杆菌介导遗传转化生菜
- 利用CRISPR-Cas9基因编辑技术获得AtLCR67基因敲除突变体被引量：2
- 2017年
- 拟南芥AtLCR67基因属于低分子量富含半胱氨酸(low-molecular-weight cysteine-rich,LCR)基因家族。在正常生长条件下,该基因在发育的种子中特异表达。为了研究该基因在发育或代谢过程中的可能作用,在没有合适T-DNA插入突变缺乏的情况下,我们利用CRISPR-Cas9定向敲除技术来创制该基因沉默的拟南芥突变体材料。通过构建AtLCR67基因的CRISPR-Cas9敲除质粒,借助农杆菌介导的浸花法转化野生型拟南芥Col-0,最终获得12株T0代转基因植株。对T0转基因植株的AtLCR67基因进行测序分析发现,在设计的靶位点处存在短片段缺失12个碱基和增加一个T碱基两种突变类型,进一步做RT-PCR检测分析发现突变体中AtLCR67基因完全不表达,说明成功获得拟南芥lcr67突变体。突变体材料的获得为进一步研究AtLCR67基因在发育或代谢方面的的功能奠定了良好基础。
- 刘询庞奥运刘春林阮颖
- 关键词：拟南芥基因敲除
- 甘蓝型油菜单基因隐性核不育株系72A的研究被引量：1
- 2013年
- 2011年3月,于湖南农业大学试验田甘蓝型双低油菜GX–49品系中发现了1株雄性不育株,命名为72A。利用石蜡切片技术对其败育时期花药发育进行观察,通过与双低甘蓝型早熟油菜品系GZ–4和GZ–20–2杂交,对其遗传动态进行分析。结果表明,72A为典型的无花粉囊败育型,且为单基因控制的隐性细胞核雄性不育。
- 祁宝英阮颖官春云刘春林
- 关键词：甘蓝型油菜雄性不育株花药发育隐性基因
- 油菜含MATH结构域基因BnaMT-1的克隆及表达分析被引量：1
- 2012年
- 利用已构建的甘蓝型油菜种子发育过程SSH文库,筛选得到1个含MATH结构域的EST序列,并以其为信息探针,经电子克隆获得了该基因的全长cDNA,命名为BnaMT-1。BnaMT-1的开放阅读框(ORF)全长1 209 bp,编码402个氨基酸,相对分子质量为46 130.7,预测的理论等电点为8.50,其结构包括信号肽、跨膜结构及2个连续的MATH结构域,为亲水性胞外分泌蛋白;进化树分析发现,该基因与拟南芥含MATH结构域基因亲缘关系较近;利用半定量RT-PCR技术对该基因在甘蓝型油菜湘油15号不同组织及种子不同发育时期的表达分析表明:BnaMT-1在叶、花和果荚中都有表达,在根和茎中没有表达;种子发育过程中,BnaMT-1均有表达,且表达量于花后30～35 d最高,之后表达量下降。推测该基因可能与种子发育及油脂合成代谢相关。
- 赵黎明佘媛刘春林阮颖
- 关键词：油菜克隆
- 硫代葡萄糖苷合成核心途径与植物生长素微调被引量：7
- 2006年
- 硫代葡萄糖苷是刺山柑Capparis spinosa(Capers)和十字花科(Brassicaceae)植物中一类特有和重要的次生代谢产物.在植物体内,硫代葡萄糖苷的合成包括前体氨基酸侧链延伸,核心结构的形成和次级侧链修饰3个步骤.利用核心结构合成途径上有关催化酶的基因突变体证明,后醛肟反应途径上任何催化酶基因的突变,都将导致吲哚乙醛肟结构相似的吲哚乙酸(IAA)含量变化,硫苷核心途径对生长素的动态平衡起着微调(fine-tune)作用.
- 阮颖周朴华刘春林
- 关键词：硫代葡萄糖苷生长素
