辛华
- 作品数:6 被引量:66H指数:4
- 供职机构:北京大学第一医院更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金中华医学基金会基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 老年人睾丸组织退化的基因表达谱研究被引量:23
- 2003年
- 目的 :研究老年人睾丸组织基因表达谱变化 ,为研究老年人睾丸功能衰退机制奠定基础。方法 :知情同意下获取正常青年人和老年人睾丸组织标本各 3例 ,采用QIAGENRNA提取试剂盒提取总RNA ,分别等量混合后制备探针。利用ClonTech公司生产的包含 80 0 0个已知基因的人类cDNA基因芯片 [AtlasPlasticHuman 8KMi croarray (Cat.# 790 5 1) ]筛选差异表达基因。按基因功能分类方法对老年睾丸组织中差异表达的基因进行归类分析。用RT -PCR、T -A克隆测序等方法选择目的基因 ,验证基因芯片结果。结果 :筛选到差异表达基因 117个(1.4 6 % ) ,83个基因在老年睾丸组织中表达下调 ,34个基因表达上调。在表达下调的基因中 ,代谢相关基因 16个(19.3% ) ,与基因和蛋白表达相关的基因 18个 (2 1.7% ) ,信号通路相关基因 16个 (19.3% ) ,细胞分化相关基因19个 (2 2 .9% ) ,细胞结构和运动相关基因 6个 (7.2 % ) ,细胞或内环境稳态相关基因 4个 (4 .8% ) ,未知功能基因 4个 (4 .8% )。在表达上调的基因中 ,代谢相关基因 3个 (8.8% ) ,与基因和蛋白表达相关的基因 10个 (2 9.4 % ) ,信号通路相关基因 2个 (5 .9% ) ,细胞分化相关基因 11个 (32 .4 % ) ,细胞结构和运动相关基因 8个 (2 3.5 % )。RT -PCR及T
- 辛钟成刘武江田龙袁亦铭辛华付杰林桂亭Ching S.LINTom F.LUE
- 关键词:老年人基因表达谱衰老遗传学
- 改良SS-cream对家兔脊髓体感诱发电位的影响被引量:2
- 2004年
- 目的研究局部使用改良SS-霜(Re-SS)对脊髓体感诱发电位(SSEP)的影响.方法体重2.5~3.0kg雄性新西兰大白兔40只,随机分为治疗组和安慰剂组.各组动物在阴茎局部涂抹药物前及使用后10、30和60min分别测定电刺激阴茎头诱发SSEP潜伏期(onset,N1)和波幅变化.结果使用Re-SS后30min的SSEP潜伏期(Onest)比用药前和安慰剂显著延迟(P<0.05).使用Re-SS后各时间点的SSEP潜伏期(N1)比用药前显著延长(P<0.05),用药后30min、60min比安慰剂SSEP潜伏期(N1)延长(P<0.05).Re-SS组SSPE振幅表现出不同程度降低,但是无显著差异(P>0.05).结论Re-SS可降低阴茎头感觉神经兴奋性,可能有利于延迟早泄患者的射精反射,延长射精潜伏期,需要进一步的临床研究.
- 田龙辛华付杰袁亦铭刘武江辛钟成王玲珑
- 关键词:早泄潜伏期
- 兔阴蒂海绵体平滑肌细胞的体外培养方法及生物学特性
- 2004年
- 目的 :探索新西兰白兔阴蒂海绵体平滑肌细胞的体外培养方法及生物学特性。方法 :取兔阴蒂海绵体 ,采用酶消化法进行平滑肌细胞体外培养 ;在倒置显微镜下观察培养细胞的生长状况、形态特征及贴壁过程 ;用计数法测定细胞贴壁率 ;用MTT法描绘原代培养细胞的生长曲线 ;利用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测平滑肌细胞特征性标记物α actin表达。结果 :培养的兔阴蒂海绵体平滑肌细胞具有典型的平滑肌细胞形态特征 ,为梭形 ,呈长轴平行排列 ,具有明显的方向性 ;体外贴壁快 ,生长迅速 ,体外培养的阴蒂海绵体平滑肌细胞在合适的传代条件和比例下能够生存并保持其稳定的生物学特性。结论 :体外培养的兔阴蒂海绵体平滑肌细胞模型可用于进一步研究阴蒂组织细胞学、分子生物学机制以及受体介导的平滑肌收缩信号转导机制及药理学作用等。
- 杨春辛钟成付杰丁义袁亦铭辛华汪泽厚
- 关键词:细胞培养阴蒂平滑肌细胞
- 淫羊藿苷对去势大鼠阴茎海绵体一氧化氮合酶亚型mRNA和蛋白表达的影响被引量:24
- 2003年
- 目的 为探讨淫羊藿苷对勃起功能障碍(erectiledysfunction,ED)的长期疗效及其药理作用机制,观察长期口服淫羊藿苷对去势大鼠ED模型阴茎海绵体一氧化氮合成酶(NOS)3个亚型(nNOS、iNOS、eNOS)mRNA及蛋白表达的影响。方法 建立去势大鼠ED模型,随机分4组,分别连续灌服不同剂量淫羊藿苷和安慰剂3mon,采集静脉血测定血清游离睾酮,分离阴茎海绵体,利用RT-PCR和免疫组化分析方法,观察nNOS,iNOS和eNOS的mRNA和蛋白表达的变化。结果 去势后血清游离睾酮降低(P<0.01),灌服不同剂量淫羊藿苷对血清游离睾酮无明显影响(P>0.05)。去势大鼠阴茎海绵体nNOS、iNOS mRNA和蛋白表达较未去势组降低(P<0.01),eNOS则无表达,但是 灌服不同剂量淫羊藿苷3 mon后nNOS,iNOS的mRNA和蛋白表达较安慰剂增加(P<0.05)。结论 长期口服淫羊藿苷可提高阴茎海绵体NOS mRNA和蛋白表达,可能对勃起功能具有长期治疗效果。
- 刘武江辛钟成付杰辛华袁亦铭田龙杨新宇郭应禄
- 关键词:淫羊藿苷
- 淫羊藿苷对兔阴蒂海绵体平滑肌细胞NO及NOS活性的影响被引量:8
- 2005年
- 目的 探讨淫羊藿苷对体外培养的兔阴蒂海绵体平滑肌细胞一氧化氮(NO)产生及一氧化氮合酶(NOS)活性的作用效果。 方法 取兔阴蒂海绵体采用酶消化法进行平滑肌细胞体外培养,利用免疫细胞化学染色法通过检测α-actin进行细胞鉴定;利用硝酸还原酶法及NOS试剂盒测定不同浓度淫羊藿苷对阴蒂海绵体平滑肌细胞NO生成及NOS活性的影响。 结果 培养的兔阴蒂海绵体平滑肌细胞呈现典型的平滑肌细胞形态特征;淫羊藿苷浓度依赖性增强家兔阴蒂海绵体平滑肌细胞NOS活性并增加NO生成(P<0.01),且被NOS抑制剂L-硝基精氨酸(LNNA)所抑制(P<0.01)。结论 淫羊藿苷可能通过增强NOS活性而提高阴蒂海绵体平滑肌细胞NO生成,增强性刺激下阴蒂海绵体平滑肌的松弛作用而增强阴蒂胀大勃起功能。
- 杨春辛钟成付杰袁亦铭丁义辛华汪泽厚
- 关键词:淫羊藿苷一氧化氮合酶
- 淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ对内皮细胞eNOS表达和NOS活性的影响被引量:15
- 2011年
- 目的:用过表达表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的猪动脉内皮细胞(porcineaorta endothelial,PAE)作为研究对象,探讨淫羊藿苷(icariin)和淫羊藿次苷Ⅱ(icarisideⅡ)对PAE中内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表达和一氧化氮合酶(nitric oxide sythase,NOS)活性的影响及其可能机制。方法:利用PAE中转染EGFR并筛选稳定株,分别用12.5μmol/L的淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理PAE和PAE-EGFR细胞48 h,观察各组细胞eNOS的表达变化;另在淫羊藿苷或淫羊藿次苷Ⅱ处理PAE和PAE-EGFR细胞时,分别加入表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)共同处理细胞,观察各组细胞eNOS的表达变化;检测淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理前后PAE和PAE-EGFR细胞NOS的酶活性改变,并以西地那非作为对照。结果:Western blot显示PAE-EGFR细胞表达eNOS的基础值要比PAE细胞高,淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理时PAE和PAE-EGFR细胞株中都能引起eNOS表达增加,并且在PAE-EGFR稳定株中eNOS的表达量比PAE细胞明显提高(P<0.01);在表达EGFR的PAE-EGFR细胞中,当淫羊藿次苷Ⅱ的浓度达到10-8 mol/L时,NOS活性增加到(15.37±1.49)u/mg,比PAE细胞高4.66 u/mg。在药物浓度达到10-7,10-6和10-5 mol/L时,淫羊藿次苷Ⅱ对PAE-EGFR细胞NOS活性的影响较PAE细胞显著增加(P<0.01);淫羊藿苷也能增加PAE和PAE-EGFR细胞的NOS酶活性,但是其效果比较淫羊藿次苷Ⅱ组平均低20%,而西地那非没有显著影响NOS酶活性。结论:淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ可上调PAE和PAE-EGFR细胞eNOS的表达和提高NOS活性,对血管内皮细胞功能可能具有改善作用,而且淫羊藿次苷Ⅱ的效果优于淫羊藿苷,其作用机制可能与激活PAE细胞的EGF-EGFR信号通路有关。
- 刘涛覃新程李维仁周峰李广永辛华巩艳青辛钟成
- 关键词:淫羊藿苷一氧化氮合酶内皮细胞