赖天霞
- 作品数：8 被引量：60H指数：5
- 供职机构：重庆医科大学生物医学工程学院生物医学工程系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“春晖计划”教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- S100A2和S100A6与Wnt//β-catenin信号途径的相互作用研究
- 研究背景与目的:
肿瘤的发生发展是一个多因素作用、多基因参与的复杂的生物学过程。肿瘤细胞最明显的特征就是增殖失控,而在肿瘤细胞内与生长分化有关的信号转导障碍则是导致增殖失控的重要因素。Wnt//β...
- 赖天霞
- 关键词：S100A2S100A6蛋白质相互作用
- 文献传递
- 钙结合蛋白S100A2对Wnt/β-catenin信号途径活性的上调作用被引量：3
- 2008年
- 目的研究钙结合蛋白S100A2对Wnt/β-catenin信号途径活性的影响,并探讨其可能的机制。方法原核诱导表达GST-hS100A2,经纯化后加入骨肉瘤细胞株MG63和人结肠癌细胞株HCT116的培养液中,Western blot检测细胞中β-catenin含量的变化;荧光素酶活性分析法检测S100A2对HEK293细胞中β-catenin/TCF4活性的影响;以表达GSK-3β、DVL、Axin的相应质粒分别转染HEK293细胞,GST-Pulldown/Western blot实验检测S100A2与这些蛋白质和β-catenin之间的相互作用。结果S100A2使MG63和HCT116细胞中β-catenin含量增加、β-catenin/TCF4活性增强;S100A2分别与β-catenin和GSK-3β之间存在相互作用,而与DVL和Axin之间则未发现相互作用。结论S100A2可以上调Wnt/β-catenin信号途径的活性,其机制可能涉及S100A2与β-catenin和GSK-3β之间的相互作用。
- 赖天霞苗静琨左国伟何焕玲李星星卫佳吴丽美寇小琴何通川周兰
- 关键词：蛋白质相互作用
- 人S100A6-GST融合蛋白的原核表达和纯化被引量：8
- 2007年
- 目的:制备人S100A6-GST融合蛋白,为研究人S100A6((hS100A6)蛋白的功能奠定基础。方法:从pHAHA-hS100A6中双酶切获取hS100A6基因,亚克隆至原核表达载体pGST-moluc,构建pGST-moluc-hS100A6,转化BL21后,IPTG诱导重组菌表达hS100A6蛋白,SDS-PAGE及WesternBlot鉴定表达产物,Glutathion-Sepharose4B球珠分离纯化。结果:重组菌株表达出与理论预测值相符的一个约36ku的hS100A6融合蛋白,纯化后的融合蛋白的产量为3mg/L菌液,纯度约92%。结论:成功构建了hS100A6-GST原核表达质粒,在大肠杆菌中表达纯化后得到较高浓度的hS100A6-GST融合蛋白,为hS100A6蛋白功能的研究打下了基础。
- 苗静琨赖天霞左国伟李星星王嫣蒋薇何通川周兰
- 关键词：融合蛋白原核表达蛋白纯化
- 骨形态发生蛋白-2和-6对人骨肉瘤细胞U2OS作用的研究
- 目的:骨形态发生蛋白（bone morphogenetic proteins, BMPs）是目前所知的唯一可诱导异位骨形成的蛋白家族,其中BMP-2、-6、-7和-9具有较高的成骨活性,BMP-2和- 7已经在临床上试用...
- 何焕玲左国伟赖天霞王嫣陈小菊李星星苗静琨谭启华寇小琴周兰
- 关键词：骨形态发生蛋白细胞增殖细胞凋亡细胞迁移碱性磷酸酶
- 文献传递
- 钙结合蛋白S100A6对Wnt／β-catenin信号途径的影响被引量：9
- 2008年
- 目的研究钙结合蛋白S100A6对Wnt／β-catenin信号途径的影响及其机制。方法异丙基β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达、谷胱甘肽-琼脂糖球珠分离纯化融合蛋白GST-hS100A6；Westernblot和荧光素酶活性分析法检测S100A6对细胞内B—catenin水平和B—catenin／T细胞因子4（TCF4）活性的影响；GST-pulldown和Westernblot技术研究S100A6与该信号途径主要成员β-catenin、糖原合酶激酶-3β（GSK-3β）、Dvl和Axin之间的相互作用。结果S100A6可致MG63和HCT1 16细胞β—catenin水平升高，并可使HEK293细胞β—catenin／TCF4活性增强；S100A6与β—catenin、GSK-36和Dvl之间存在着直接的相互作用，而与Axin之间无相互作用。结论S100A6能够增强Wnt／β-catenin信号途径的活性，其机制可能涉及S100A6与该途径重要成员β—catenin、GSK-3β和Dvl之间存在着直接的相互作用有关。
- 赖天霞苗静琨何焕玲左国伟李星星王嫣王胜何通川周兰
- 关键词：蛋白质相互作用
- BMP-2、-3、-6和-12在骨肉瘤细胞株中的表达被引量：12
- 2007年
- 目的研究骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)-2、-3、-6和-12在骨肉瘤细胞株中的表达,为下一步研究BMPs在骨肉瘤发生发展中的作用奠定基础。方法利用免疫细胞化学法和Western blot法检测BMP-2、-3、-6和-12在人骨肉瘤细胞株MG63、U2OS和大鼠骨肉瘤细胞株UMR106中的内源性表达。结果在MG63、U2OS和UMR106细胞中,BMP-2、-3和-6均呈不同程度的阳性表达;而BMP-12在这3株骨肉瘤细胞中则均为阴性,并且两种检测方法所得结果完全一致。结论BMP-2、-3和-6在人骨肉瘤细胞株MG63、U2OS和大鼠骨肉瘤细胞株UMR106中均有内源性表达;而这3株骨肉瘤细胞中均未检出BMP-12的表达。
- 何焕玲李星星赖天霞左国伟谭启华周兰
- 关键词：骨形态发生蛋白骨肉瘤细胞免疫细胞化学BLOT
- 腺病毒介导BMP-2和BMP-6对人骨肉瘤细胞株MG63和U2OS的作用研究被引量：8
- 2007年
- 目的研究骨形态发生蛋白(BMP)-2和BMP-6对人骨肉瘤细胞株MG63和U2OS的作用。方法分别用重组腺病毒AdBMP-2、AdBMP-6和AdGFP感染骨肉瘤细胞MG63和U2OS,利用台盼蓝拒染法、TUNEL法、吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)荧光双染法、Transwell小室和碱性磷酸酶(ALP)活性测定法分别检测细胞增殖、凋亡、迁移以及成骨分化能力的变化。结果与感染AdGFP的相应骨肉瘤细胞株(对照组)相比,分别感染AdBMP-2和AdBMP-6的两种骨肉瘤细胞株的细胞存活率随时间延长逐渐降低,凋亡率逐渐增加,细胞穿膜数逐渐减少,ALP活性逐渐增加。结论BMP-2和BMP-6可以抑制人骨肉瘤细胞株MG63和U2OS的增殖和迁移,并诱导它们凋亡和向成骨细胞分化。
- 左国伟何焕玲李星星赖天霞王嫣王胜周兰
- 关键词：骨形态发生蛋白碱性磷酸酶活性
