谭运年 作品数:12 被引量:41 H指数:4 供职机构: 浙江大学医学院附属第二医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家杰出青年科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
Rac1、Rac2参与调节人单核细胞趋化和NADPH氧化酶活性 为了探讨小分子GTP酶蛋白Rac1、Rac2在人单核细胞中趋化迁移以及还原型辅酶Ⅱ(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶活性中的作用,采用小分子干扰s... 谭运年 成海恩 金亚平关键词:单核细胞 小干扰RNA 趋化 文献传递 JAK3蛋白在鼻咽癌细胞中参与STAT活化并受EB病毒潜伏膜蛋白1调控 被引量:8 2003年 为了探讨在鼻咽癌细胞 (NPC)中是否存在EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1) /JAK3/STAT信号传导途径 ,首先采用RT PCR方法对NPCJAK家族 4种成员检测 ,发现在两株鼻咽癌细胞株CNE1和HNE2中该家族 4种成员均有表达 .选择最有可能与LMP1相互作用的JAK家族成员JAK3作为我们的研究对象 .利用已建立的一株受四环素衍生物强力霉素 (doxycycline ,Dox)调控的LMP1表达的鼻咽癌细胞系 (Tet on LMP1HNE2 ) ,诱导Tet on LMP1HNE2细胞LMP1动态表达 ,蛋白质印迹发现JAK3的表达方式呈剂量和时间依赖性 .采用瞬间转染方法将STAT报告基因质粒 (GRR Luc)转染入pTet on LMP1HNE2细胞中 ,不同剂量的Dox促使LMP1的表达可以激活STAT报告基因活性 ,在 0 0 6mg/LDox诱导 36h时 ,STAT活性最高 .在该条件下 ,加入 3μmol/LJAK3特异性抑制剂WHI P131时 ,可抑制STAT的活性 .结果表明 :JAK3的表达在NPC细胞中受LMP1的调控 ,LMP1可以通过调控JAK3的表达参与STAT的活化 . 谭运年 陶永光 宋鑫 唐敏 艾米丹 曹亚关键词:鼻咽癌 EB病毒潜伏膜蛋白1 EB病毒潜伏膜蛋白1在鼻咽癌细胞中通过STAT3促进VEGF表达 被引量:24 2004年 探讨了EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)是否通过STAT3调控诱导血管内皮细胞生长因子 (VEGF)的表达 .利用蛋白质印迹的方法对HNE2、HNE2 LMP1以及瞬时转染STAT3显性负性突变体STAT3β的HNE2 LMP1细胞中VEGF含量进行检测 ,发现LMP1可以上调VEGF的表达 ,而STAT3β可以抑制VEGF的上调 ;利用LMP1可控表达细胞系tet on LMP1 HNE2进行LMP1时间和剂量诱导表达研究 ,发现VEGF可以随LMP1的动态表达而表达 ;将VEGF野生型报告基因和VEGF潜在的STAT3转录因子突变体报告基因与LMP1表达载体分别共转染研究发现 ,LMP1可以激活VEGF的转录 ,这种转录通过VEGF启动子区STAT3转录因子的结合位点发挥作用 ;电泳迁移率变动分析 (EMSA)确证了STAT3的这种DNA位点的特异性活性 .结果表明 :EB病毒编码的LMP1在鼻咽癌细胞中可以增加VEGF的转录和表达 。 谭运年 陶永光 李力力 刘素芳 唐敏 顾焕华 曹亚关键词:EB病毒 STAT3 鼻咽癌 EB病毒编码的信号转导模拟分子研究进展 被引量:2 2003年 EB病毒 (EBV)与人类的伯基特淋巴瘤、霍杰金氏淋巴瘤、鼻咽癌密切相关 ,现在越来越多的肿瘤中发现有该病毒。在EBV编码的多种蛋白中 ,有些蛋白分子从结构或功能上模拟、利用了细胞内外的信号转导分子从而干扰了细胞正常的信号转导 ,导致EBV感染组织或细胞出现多种异常的生物学效应。 谭运年 曹亚关键词:EBV 信号转导 EB病毒潜伏膜蛋白1调节EGF受体核移位 被引量:3 2003年 EB病毒编码的病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)是重要的致瘤蛋白,一直以来是EB病毒致瘤机制的研究核心.传统的受体学说认为,细胞膜受体作为第一信使,在细胞膜上与其配体结合发挥生物学效应.但近年来,对EGFR家族成员受体核移位在基因表达调控中意义的研究,拓宽了人们对细胞膜受体生物学功能的认识.利用我们建立的Tet-on系统调控LMP1表达的细胞系,采用Western blot和激光共聚焦显微镜等技术证实,LMP1可调控EGFR的核移位,并呈一定的剂量效应.通过GFP与EGFR及不同突变体的融合蛋白在细胞内的表达发现,EGFR的核定位信号在其核移位过程中起着一定的作用,并初步发现LMP1调控EGFR核移位为配体非依赖性. 陶永光 宋鑫 谭运年 林晓峰 赵燕 曾亮 唐敏 李嵬 吴乔 曹亚关键词:EB病毒 潜伏膜蛋白1 EGF受体 核移位 核定位 细胞膜受体 杭州地区超重、肥胖和代谢综合征检出率随年龄和性别变化规律 目的:超重、肥胖和代谢综合征是心脑血管疾病的风险因素。本研究旨在探讨杭州地区超重、肥胖和代谢综合征检出率随年龄和性别变化规律。方法:入选2009年在我院健康体检者,共74,523例年龄18~94岁受试者(男性42,990... 单鹏飞 尹俊华 宋震亚 张松照 谭运年 赵奕Rac1和Rac2参与调节人单核细胞趋化和NADPH氧化酶活性 被引量:1 2011年 为了探讨小分子GTP酶蛋白Rac1和Rac2在人单核细胞中趋化迁移以及还原型辅酶II(NADPH)氧化酶活性中的作用,采用小分子干扰siRNA对人单核细胞中RAC1、RAC2分别进行特异性抑制,采用实时定量PCR技术、免疫印迹技术在RNA和蛋白质水平上确认抑制效果,使用甲酰三肽(formyl-met-leu-phe,fMLP)、人单核细胞趋化因子(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)诱导单核细胞趋化;用血清调理的酵母多糖(serum opsonized zymosan,ZOP)、佛波酯(phosphomolybdic acid,PMA)激活单核细胞NADPH氧化酶活性,诱导活性氧(Reactive oxygenspecies,ROS)产生,以此对Rac1和Rac2作用进行研究.结果表明,小分子干扰siRNA能够在mRNA水平和蛋白质水平分别有效抑制目的基因表达;使用Chamber assay方法发现,仅Rac1参与了fMLP、MCP-1诱导的人单核细胞趋化.Rac激活实验确证,Rac1参与MCP-1诱导的趋化;细胞色素C还原法表明,Rac1和Rac2均参与PMA和ZOP诱导人单核细胞ROS生成.在人单核细胞中,RAC1和RAC2基因沉默模型的成功建立以及初步研究显示,Rac1和Rac2的不同作用结果将为深入研究它们在人单核细胞中的功能奠定了良好基础. 谭运年 成海恩 金亚平关键词:单核细胞 小干扰RNA 趋化 MCP-1通过p38和ERK/MAPK途径在人单核细胞中诱导Stat3丝氨酸磷酸化 被引量:4 2009年 为了探讨人单核细胞中,人单核细胞趋化因子1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)诱导信号转导激活转录因子3(signal transducers and activators of transcription 3,Stat3)磷酸化以及导致磷酸化的丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路途径在其中的作用,首先采用针对Stat3 705位酪氨酸和727位丝氨酸特异性抗体进行磷酸化时间和剂量的检测,发现MCP-1仅导致Stat3丝氨酸磷酸化并且呈剂量和时间依赖性,而酪氨酸并没有磷酸化.在此基础上,采用不同时间点的方法对MAPK途径成员细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、p38、JNK进行检测,发现MCP-1在人单核细胞中仅诱导ERK、p38活化并呈时间依赖性,而不能诱导激活JNK途径.为了确证ERK、p38途径在人单核细胞中参与MCP-1诱导的Stat3丝氨酸磷酸化,采用ERK、p38途径活化的小分子抑制化合物不同浓度处理单核细胞,对Stat3丝氨酸磷酸化检测发现,MCP-1通过ERK、p38两条途径参与Stat3丝氨酸磷酸化.这些结果表明,MCP-1在人单核细胞中仅诱导Stat3丝氨酸磷酸化而不是酪氨酸磷酸化;MAPK成员中ERK、p38两条途径均参与MCP-1诱导的Stat3丝氨酸磷酸化,而JNK途径没有活化参与Stat3丝氨酸磷酸化. 谭运年 金亚平关键词:单核细胞趋化因子1 丝氨酸磷酸化 P38 EB病毒潜伏膜蛋白1介导c-Jun/JunB活性异源二聚体形成 被引量:5 2004年 EB病毒编码的潜伏膜蛋白1可以活化AP-1转录因子, 其中c-Jun和JunB的相互关系和复杂作用一直是人们关注的焦点. 以Tet-on-LMP1 HNE2鼻咽癌细胞系为动态研究模型, 主要应用c-Jun/Jun B双染色间接免疫荧光法联合激光共聚焦荧光显微镜技术、Western blot方法、免疫共沉淀-Western blot方法以及Super-EMSA方法, 同时, 结合信号转导通路研究中的阻断策略, 研究证实EB病毒编码的潜伏膜蛋白1介导c-Jun/Jun B异源二聚体形成, 而且该二聚体具有与DNA结合活性. 该研究为LMP1调控下, AP1二聚体家族成员在不同时空信号传导通路中的动态组合和作用模式提供了新的机制. 宋鑫 陶永光 谭运年 黎民敬 邓锡云 吴乔 曹亚关键词:LMP1 JUNB C-JUN DNA结合活性 EB病毒潜伏膜蛋白 人SCF 5'-旁侧调控序列与全长cDNA的融合克隆 SCF在造血干细胞及祖细胞增殖、分化、定居中发挥重要作用,随着对SCF基造血干细胞生理学功能的了解和深入,SCF基因的表达调控也越来越引起研究者的注意.在该室已完成部分cDNA的克隆及其在大肠杆菌表达的研究基础上,该文应... 谭运年关键词:人干细胞因子 RT-PCR CDNA 克隆