董世访
- 作品数：21 被引量：34H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金湖南省科技厅项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程理学更多>>
- 不同年龄小鼠骨来源间充质干细胞衰老相关特性与成骨分化能力的比较研究
- 2024年
- 目的探索不同年龄组小鼠骨来源的间充质干细胞(bone derived mesenchymal stem cells,BMSCs)衰老相关的生物学特性及骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)诱导成骨分化能力的改变。方法将8只C57BL/6J小鼠分为青年组(4周龄,体质量约为10~15 g,n=4)和老年组(12月龄,体质量约为20 g~25 g,n=4),每组雌雄各半。分别从2组小鼠的整骨中提取间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),通过流式细胞术鉴定2组BMSCs的表面标志物,通过β-半乳糖苷酶染色比较2组BMSCs的衰老程度,通过MTT和EdU掺入实验比较2组BMSCs的增殖及自我更新能力。通过Western blot分析2组BMSCs中周期蛋白CyclinD1、P21的表达情况。采用ALP染色和茜素红S染色及RT-qPCR评估2组BMSCs的体外成骨分化能力,使用RNA-seq分析比较2组BMSCs经BMP2诱导后的差异基因表达,并用流式分析验证测序结果。结果流式细胞术分析结果显示,分离培养的小鼠BMSCs符合间充质干细胞判定标准。β-半乳糖苷酶染色结果显示,老年组BMSCs的衰老水平显著高于青年组(P<0.05)。而MTT和EdU掺入实验结果表明,老年组BMSCs的细胞活力和增殖能力显著低于青年组(P<0.05)。Western blot结果显示,与青年组比较,老年组BMSCs的细胞周期蛋白CyclinD1表达水平较低,而细胞周期阻抑因子P21蛋白表达水平显著增高(P<0.05)。ALP染色和茜素红S染色及RT-qPCR检测结果显示,BMP2诱导后青年组BMSCs的成骨分化能力显著高于老年组(P<0.05)。RNA-seq结果显示,BMP2诱导后,整合素αV重组蛋白(cluster of differentiation 51,CD51)在青年组和老年组中的表达趋势相反。而流式细胞术分析结果显示,青年组CD51^(+)细胞在CD45^(-)细胞中占比明显高于老年组(P<0.01)。结论老年组BMSCs中CD51^(+)细胞在CD45^(-)细胞中占比下降与CD51^(+)细胞对BMP2的成骨诱导响应性下降密切相关。
- 李媛钟海英董世访黄璐刘潇淇廖雨滋易勤赵丽杨珂李娅莎
- 关键词：骨形态发生蛋白2成骨分化衰老
- 新生期肺炎链球菌感染对树突状细胞和Foxp3+Tregs、Th17的影响
- 刘茹田琴琴陈云秀田永露董世访罗征秀
- 肺炎链球菌肺炎对肺部树突状细胞及CD4^+T细胞的影响被引量：6
- 2016年
- 目的探讨肺炎链球菌肺炎对Balb/c小鼠肺部树突状细胞及CD4^+T细胞的影响。方法 6~8周Balb/c小鼠随机分为对照组及肺炎链球菌感染组,流式细胞术检测肺炎链球菌感染后2 d、5 d肺组织中CD103^+DCs、CD11b^+DCs、p DCs及CD4^+T细胞亚类水平。结果肺炎链球菌肺炎致肺组织CD103^+DCs及p DCs水平显著增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),而肺组织CD11b^+DCs水平显著低于对照组。肺炎链球菌肺炎促进肺组织IL-17A^+CD4^+T细胞和Foxp3^+Tregs表达,与对照组比较,感染后2 d、5 d差异均有统计学意义(P<0.05),随着感染控制,Foxp3^+Tregs表达水平回降,感染后5 d Foxp3^+Tregs水平显著低于感染后2 d水平(7.3%±0.41%vs 9.38%±1.34%,P<0.01)。肺炎链球菌肺炎对肺部Th2表达水平无显著影响,感染后5 d IFN-γ^+CD4^+T细胞水平显著升高,与对照组、感染后2 d组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论肺炎链球菌肺炎促进肺组织CD103^+DCs、p DCs表达,诱导CD4^+Th17、Tregs细胞分化发育。
- 刘茹田琴琴张光莉邹心周干陈明孟庆清董世访罗征秀
- 关键词：肺炎链球菌树突状细胞CD4+T细胞
- 甲壳低聚糖对2型糖尿病造模大鼠胰岛β细胞的保护作用
- 2011年
- 目的观察甲壳低聚糖(COS)对2型糖尿大鼠胰岛β细胞的保护作用。方法试验大鼠经腹腔注射STZ 2周后,挑选葡萄糖耐量异常者继续给予高糖高脂饲料喂养,同时试验组用COS灌胃给药。分别在第0、4、8、12周剪尾取血测定空腹血糖及胰岛素水平,第16周末,股动脉取血,分离胰腺并固定做HE染色和胰岛原位细胞凋亡检测。结果 COS组空腹血糖、胰岛素水平和胰岛β细胞凋亡比例明显低于模型组。结论甲壳低聚糖具有改善胰岛素抵抗,保护胰岛β细胞的作用。
- 曹朝晖封少龙江伟凡董世访李邦良胡小波
- 关键词：甲壳低聚糖胰岛素抵抗胰岛Β细胞
- 幼年期肺炎链球菌肺炎对哮喘形成的影响被引量：4
- 2017年
- 目的研究幼年期肺炎链球菌肺炎(S.pneumoniaepneumonia,S.pp)对成年期哮喘形成的影响。方法 3周龄雌性Balb/c小鼠随机分为对照组(control)、幼年期肺炎链球菌肺炎组(Inf S.pp)、哮喘组(OVA)、幼年期肺炎链球菌肺炎哮喘组(Inf S.pp+OVA)。3周龄雌性Balb/c小鼠鼻腔滴注2×106cfu/ml肺炎链球菌25μl建立肺炎链球菌肺炎模型,成年期用OVA致敏激发Balb/c小鼠建立哮喘模型,最后1次激发完成24 h内检测小鼠气道高反应性,HE染色制作肺组织病理切片,观察组织病理变化,检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中细胞总数、细胞分类计数及细胞因子水平,流式细胞术检测小鼠肺组织中CD4^+T细胞水平。结果幼年期肺炎链球菌肺炎哮喘组肺组织炎症细胞侵润、气道反应性、BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞及细胞因子IL-5、IL-13、IL-17水平显著高于对照组(P<0.05),IFN-γ、IL-10表达显著降低(P<0.05),肺组织内Th2、Th17水平显著高于对照组(P<0.05),Foxp3^+Treg水平显著降低(P<0.01),Th1/Th2、Foxp3^+Treg/Th17比例明显降低(P<0.01)。幼年期肺炎链球菌肺炎哮喘组肺组织炎症细胞侵润、气道高反应性、BALF细胞分类计数及炎性因子水平、肺组织CD4^+T细胞水平与哮喘组比较无统计学差异。结论幼年期肺炎链球菌肺炎对成年期哮喘形成无显著影响。
- 陈云秀田永露田小银彭欣张祺煜李媛媛田琴琴张光莉董世访罗征秀
- 关键词：幼年期肺炎链球菌肺炎哮喘
- C3a-C3aR信号通路对正常儿童Treg/Th17免疫平衡的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨补体C3a-C3a受体(C3aR)信号通路对正常儿童外周血Treg/Th17免疫平衡的影响,以期为进一步研究该通路在相关疾病中的作用提供实验依据。方法健康体检儿童17例,其中男性10例,女性7例,平均年龄6.8岁。收取空腹外周血3 ml,提取外周血单个核细胞(PBMC),分为3组:1)正常对照组;2)人重组C3a处理组(C3a组);3)人重组C3a及C3a受体拮抗剂处理组(C3a+C3aRA组)。经过培养后应用流式细胞术分别检测各组中Treg细胞和Th17细胞占CD4+T细胞的百分比,并比较各组间Treg/Th17的比值。结果与正常对照组比较,C3a组Th17细胞比例升高(P<0.01),Treg/Th17的比值明显降低(P<0.01),Treg细胞比例有下降趋势,但无明显统计学差异(P>0.05);与C3a组比较,C3a+C3aRA组Th17细胞比例降低(P<0.05),Treg/Th17的比值明显升高(P<0.05),Treg细胞比例有上升趋势,但无统计学差异(P>0.05);而C3a+C3aRA组较正常对照组Th17细胞、Treg细胞比例以及Treg/Th17的比值均无统计学差异(P>0.05)。结论 C3a-C3aR信号通路可能介导正常生理状态下儿童外周血中Th17细胞活化,同时参与调控正常儿童Treg/Th17细胞免疫平衡。
- 李圆圆杨宝辉董世访王墨吴道奇唐雪梅张高福时吉胜刘玮阳海平李秋
- 关键词：C3ATREG细胞免疫平衡
- TNF-α通过死亡受体途径促进IFN-γ诱导NIT-1细胞凋亡被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨TNF-α和IFN-γ对小鼠胰岛β细胞株NIT-1细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:用MTT法检测TNF-α和IFN-γ单独或联合作用对NIT-1细胞活力的影响,倒置显微镜观察NIT-1细胞形态变化,Hoechst 33258荧光染色后激光共聚焦显微镜观察细胞核形态的变化,Western blot技术检测凋亡相关蛋白Caspase-8,-3和PARP的活化。结果:TNF-α联合IFN-γ处理明显抑制了NIT-1细胞的活力,诱导了细胞的凋亡,促进了凋亡蛋白Caspase-8,-3和PARP的活性。结论:TNF-α通过细胞凋亡的死亡受体途径信号传递促进了IFN-γ诱导的NIT-1细胞凋亡。
- 董世访李桂清江伟凡杨菲曹朝晖许桂莲
- 关键词：TNF-ΑIFN-Γ胰岛Β细胞T1DM
- Wnt3a减轻黑素细胞iMC65氧化应激损伤被引量：1
- 2017年
- 目的探讨Wnt3a对氧化应激损伤的i MC65黑素细胞的保护作用及机制。方法将黑素细胞分成对照组,Wnt3a组,H2O2处理组,Wnt3a干预组,750μmol/L的H2O2作用模拟黑素细胞的氧化应激损伤。MTT实验检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞产生活性氧(ROS),荧光素酶报告基因检测Nrf2/ARE通路的激活,Western blot检测Nrf2/ARE通路的相关蛋白表达。结果与对照组相比,H2O2处理组的细胞活性明显下降(P<0.01),凋亡比率明显上升(P<0.01),ROS的产生明显增加(P<0.01)。而Wnt3a干预组能显著缓解H2O2处理组细胞活性的降低(P<0.05)、降低凋亡比率(P<0.05),减少ROS的产生(P<0.05)。Wnt3a也能上调Nrf2和HO-1蛋白水平的表达。结论 Wnt3a可以保护氧化应激状态下的黑素细胞,其机制可能与激活Nrf2/ARE有关。
- 郑妍杨珂李娅莎董世访周丽娜
- 关键词：WNT3A黑素细胞NRF2氧化应激
- IFN-γ和TNF-α协同对MIN6细胞凋亡的影响被引量：2
- 2012年
- 目的研究细胞因子IFN-γ和TNF-α协同对小鼠胰岛瘤细胞株MIN6凋亡的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察比较了IFN-γ、TNF-α单独及其组合对MIN6细胞活性的影响,并进一步通过光学显微镜和激光共聚焦显微镜从形态学上对其毒性作用进行了验证,最后通过流式细胞术区分了其对MIN6细胞的凋亡和坏死的作用。结果 IFN-γ和TNF-α单独作用对MIN6细胞活性有轻微影响,但两者组合对MIN6细胞的活性具有显著的抑制作用,并且早期凋亡的细胞百分率明显高于IFN-γ单独处理组(69.91%&13.03%),而坏死或晚期凋亡细胞的百分率两组之间没有差异(2.14%&2.41%)。结论IFN-γ和TNF-α协同可促进MIN6细胞的凋亡。
- 董世访曹朝晖江伟凡李桂清姜曼胡小波许桂莲
- 关键词：IFN-ΓTNF-ΑMIN6细胞凋亡
- IFN-γ和TNF-α联合对MIN6细胞caspase-3活化的影响被引量：4
- 2014年
- 目的研究细胞因子IFN-γ和TNF-α对小鼠胰岛瘤细胞株MIN6中caspase-3活化的影响。方法用IFN-γ、TNF-α单独或联合刺激MIN6细胞后,Western blot分析比较caspase-3活化的情况,并用免疫细胞化学法检测了其活化产物cleaved caspase-3的产生;酶学比色法测定细胞因子IFN-γ和TNF-α联合作用活化caspase-3的时间依赖性以及MTT法比较caspase-3特异性的抑制剂AC-DEVD预处理前后MIN6细胞活性的变化。结果 IFN-γ或TNF-α单独作用不能活化caspase-3,但两者联合作用24 h后可检测到caspase-3活化裂解片段的产生;Caspase-3的活性随着IFN-γ和TNF-α处理时间的增加而升高,呈现明显的时间依赖性;抑制caspase-3的活化可有效改善MIN6细胞的活性,并且呈剂量依赖性。结论 IFN-γ和TNF-α对MIN6细胞活性的抑制作用与caspase-3的活化密切相关。
- 曹朝晖覃剑董世访郑权友杨菲谭雨龙尹卫东李桂清
- 关键词：IFN-ΓTNF-ΑMIN6细胞CASPASE-3I型糖尿病
