罗建明
- 作品数:6 被引量:115H指数:4
- 供职机构:复旦大学医学院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 电化学治疗对人肝癌细胞SMMC7721化疗耐药性的影响被引量:2
- 2000年
- 目的 观察电化学治疗对人肝癌细胞SMMC772 1化疗耐药性的影响 ,为其临床应用提供实验依据。方法 细胞计数法观察ECT、化疗药阿霉素 (ADR )结合的抑癌效应 ,应用“多药效应分析软件”分析两者之间的相互作用。流式细胞仪 (FCM )分析ECT对细胞内ADR累积的影响 ,免疫组化法检测ECT对SMMC772 1细胞P gp的影响 ,RT PCR法观察ECT对细胞MDR1mRNA水平的影响。 结果 ECT与ADR结合治疗的合并指数 (CI) >1,提示ECT、ADR呈拮抗效应 ,ECT使化疗耐药性增加 ,敏感性下降。ECT 5V1C处理后 2hSMMC772 1细胞内ADR的积累减少 46 .5 % ,ECT 5V2C处理后 2d细胞的MDR1mRNA及P gp表达水平升高。 结论 ECT上调SMMC772 1细胞MDR1基因的表达 ,增加化疗耐药性。
- 郭伟剑罗建明于尔辛郑颂国沈兆忠
- 关键词:肝肿瘤电化学疗法抗药性
- 逆转录病毒介导肿瘤坏死因子α基因修饰人胰腺癌细胞的建立被引量:4
- 2000年
- 张群华倪泉兴傅德良姚琪远金忱虞先浚张妞沈兆忠郑颂国罗建明张延龄
- 关键词:胰腺癌逆转录病毒TNFΑ
- 外源性TNF-α基因克服多药耐药性的初步研究被引量:4
- 2001年
- 目的:探索外源性细胞因子 TNF-α基因克服多药耐药( multidrug resistance,MDR)的新途径。方法:以重组逆转录病毒为载体,将 TNF-α基因导入具 MDR表型的人乳腺癌细胞系 MCF- 7/Adr,经 G418抗性筛选获阳性克隆 MCF- 7/Adr- TNF1与 MCF- 7/Adr- TNF2。以 PCR和 ELISA法检测目的基因的整合与表达。细胞计数法观察细胞生长速度的改变 , MTT法检测外源性 TNF-α基因的逆转 MDR作用,流式细胞仪分析细胞内 ADR积累的变化。结果: MCF- 7/Adr- TNF1与 MCF- 7/Adr- TNF2细胞中有 TNF-α基因的整合和表达,病毒上清中 TNF-α含量分别为 1 737 pg/ml( 106 cells/48 h)、 2 875 pg/ml。与阴性对照细胞相比, MCF- 7/Adr- TNF1与 MCF- 7/Adr- TNF2细胞的生长速度明显减慢,生长抑制率分别为 32.4%、 54.8%,对 ADR的耐药性明显降低,耐药逆转倍数分别为 5.2倍、 19.3倍,细胞内 ADR的积累明显增加。结论:外源性 TNF-α基因的导入能有效克服耐药性,增加细胞内药物的积累为其逆转耐药性的主要机制。
- 郭伟剑钱关祥沈兆忠罗建明郑颂国胡亮孙欲晓
- 关键词:乳腺肿瘤多药耐药性肿瘤坏死因子TNF-Α基因治疗
- 直流电治疗对人肝癌细胞SMMC7721凋亡的诱导作用被引量:8
- 2000年
- 目的 研究电化学治疗( ECT) 对人肝癌细胞系SMMC7721 凋亡的诱导作用及其机制,为ECT治疗的临床应用提供依据。方法 采用体外模型研究ECT 的效应。以Annexin V 标记法、DNA含量测定、电子显微镜等方法观察ECT 对人肝癌细胞系SMMC7721 凋亡的诱导作用及对细胞周期的阻滞效应。免疫组化法观察ECT 对p53 、p21 WAF1/CIP1 蛋白的影响,RT- PCR 法观察ECT对p21 WAF1/CIP1 m RNA表达水平的影响。结果 Annexin V 标记法显示,与对照组相比,ECT作用后24,48 h 细胞凋亡率明显增高(P< 0 .05) 。ECT(5V2C) 作用后48 h,电镜下见部分细胞核染色质凝聚,DNA 含量检测显示亚G1 峰增高,S期及G2/ M 期细胞比例增高,RT- PCR、免疫组化法检测显示p21 WAF1/CIP1mRNA及蛋白表达水平升高。结论 ECT 治疗能诱导人肝癌细胞SMMC7721 凋亡及周期阻滞,上调p21 WAF1/CIP1 的表达可能为其机制之一。
- 郭伟剑于尔辛吴国华郑颂国罗建明沈兆忠李国安
- 关键词:直流电肝癌电疗法SMMC7721
- TNF-α基因转染多药耐药性人乳腺癌细胞的基因表达与生物学效应
- 2000年
- 目的 探索TNF α基因能否成功导入耐药细胞并获得表达 ,发挥生物学效应。方法 以重组逆转录病毒为载体将TNF α基因导入具有多药耐药 (MDR )表型的人乳腺癌细胞系MCF7/ADR ,经G 418抗性筛选获 4株阳性克隆。PCR、Elisa法鉴定并检测TNF α基因的整合和表达。细胞计数法观察细胞生长速度的改变 ,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果 4株阳性克隆整合了TNF α基因并获得表达 ,分泌TNF α量分别为 341pg/ml(10 6cell/48h)、5 40 pg/ml、1737pg/ml、2 875 pg/ml。与对照细胞相比 ,TNF α分泌量较低的 2株细胞克隆生长速度无明显减慢 ,而 2株高表达TNF α的细胞生长速度明显减慢 ,生长抑制率分别为 32 .4%、5 4.8% ,且细胞周期受阻于S +G2 /M期。结论 TNF α基因能成功导入耐药细胞并获得表达。高表达TNF α的细胞克隆生长明显受抑。
- 郭伟剑沈兆忠钱关祥罗建明郑颂国周振华
- 关键词:乳腺癌肿瘤坏死因子多药耐药生物学
- 健脾理气药诱导人肝癌细胞SMMC7721凋亡的研究被引量:98
- 2000年
- 目的观察健脾理气药的诱导凋亡效应,为其临床应用进一步提供依据。方法采用血清药理学方法研究中药的体外效应,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测含中药兔血清对肝癌细胞的抑制效应,以Annexin V标记法、DNA含量测定、电子显微镜方法检测含中药血清诱导凋亡及细胞周期阻滞效应。免疫组化法观察含中药血清对P53,P21^(WAF1)/CIP1)蛋白的影响,RT-PCR法观察含中药血清对P21^(WAF1/CIP1) mRNA表达水平的影响。结果含中药血清有一定的抑制肝癌细胞作用,其作用3d的抑制率为6.6%,作用6d的抑制率为36.2%。含中药血清作用2d诱导9.8%±4.0%的肝癌细胞凋亡,使细胞周期阻滞于S期,并上调P53蛋白、P21^(WAF1/CIP1) mRNA及蛋白的表达。结论健脾理气药具一定的诱导凋亡及抑制肝癌细胞效应,上调p53,p21^(WAF1/CIP1)基因的表达为分子机制。
- 郭伟剑于尔辛郑颂国沈兆忠罗建明吴国华夏士安
- 关键词:肝肿瘤细胞凋亡中医药疗法