程龙球
- 作品数:25 被引量:68H指数:5
- 供职机构:暨南大学生命科学技术学院生物工程学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省人口和计划生育委员会科研项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学天文地球自动化与计算机技术更多>>
- ITR缺陷对AAV病毒包装与感染力的影响被引量:6
- 2008年
- 腺相关病毒(AAV)是一种复制缺陷性DNA病毒,其基因组两端的两个倒转末端重复序列(ITR)是rAAV包装复制所必需的自身结构.ITR容易缺失并影响病毒颗粒的包装和感染力.比较两个ITR完整的和一端ITR缺失的AAV病毒发现,一端ITR缺失的AAV载体质粒包装病毒的效率明显比ITR完整的质粒低.用这两种AAV病毒感染293细胞、HeLa细胞和小细胞肺癌细胞NCI H446细胞,显示两个ITR完整的AAV病毒感染细胞的能力明显比一个ITR缺失的病毒强.说明ITR缺失对AAV病毒的包装和感染力都有明显的影响.因此,筛选两个ITR完整的AAV载体质粒,并稳定其基因组的结构,对提高病毒生产的产量和增强病毒的感染力都有显著的价值.
- 曹佐武林羿程龙球邹飞雁
- 关键词:腺相关病毒
- TGF-β1在PCOS卵巢间质纤维化形成中的作用被引量:20
- 2008年
- 目的:探讨TGF-β1在PCOS大鼠卵巢间质纤维化、包膜硬化形成中的作用。方法:利用脱氢表雄酮(DHEA)皮下注射的方法建立PCOS病理模型大鼠20只,用微粒子酶免分析法测定血清性激素E2、T、LH、FSH、LH/FSH、空腹胰岛素(FINS)水平,及光镜下观察PCOS大鼠卵巢的病理结构,透射电镜观察细胞超微结构来验证模型。采用免疫组化法检测PCOS组(n=20)卵巢细胞因子TGF-β1的表达,并与20只正常大鼠相比照。结果:TGF-β1在PCOS组各阶段卵泡卵母细胞、颗粒细胞的表达强度与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。而在窦状卵泡膜细胞和卵巢间质细胞中的表达,PCOS组显著高于对照组(P<0.01,P<0.05)。结论:多囊卵巢中TGF-β1表达异常,可能是导致多囊卵巢间质纤维化、包膜增厚的原因之一,TGF-β1也参与PCOS卵泡发育、闭锁的调控。
- 苗竹林王自能杨艳东程龙球崔蓉王小兰欧汝强
- 关键词:纤维化
- Smad4蛋白及mRNA在卵巢不同发育阶段的表达被引量:6
- 2005年
- 目的探讨Smad4在不同发育阶段大鼠卵巢中蛋白及mRNA的表达。方法选择不同发育时期大鼠卵巢,运用免疫组化方法检测卵巢中Smad4蛋白表达,并进行图像分析;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Smad4mRNA在卵巢中的表达。结果免疫组化结果显示Smad4主要表达在各级卵泡中,在卵巢发育早期,Smad4主要在原始卵泡和窦前卵泡中表达;随着卵巢的发育成熟,Smad4在窦状及成熟卵泡颗粒细胞和卵泡膜细胞的表达与间质细胞比较无显著差异(P>0.05)。Smad4在卵泡中的表达强度也发生了变化随着卵泡的发育,Smad4在窦状及成熟卵泡卵母细胞的表达与窦前卵泡卵母细胞比较明显减弱(P<0.05,P<0.01);在卵泡膜细胞的表达逐渐增强(P<0.01),而在各级卵泡颗粒细胞中的表达无显著差异(P>0.05)。RT-PCR结果显示各阶段卵巢均有mRNA的表达,从第3周起Smad4mRNA的表达明显增强,与生后1d比较差异显著(P<0.05)。结论卵巢内存在Smad4,提示TGF-β家族对卵泡发育的调节很可能是通过Smad信号转导模式实现的。
- 苗竹林王自能章韵程龙球
- 关键词:卵巢免疫化学
- GDF-9及其受体在PCOS大鼠卵巢中的表达被引量:1
- 2008年
- 目的:探讨生长分化因子-9(GDF-9)蛋白及其受体BMPR-ⅡmRNA在PCOS大鼠卵巢的表达。方法:皮下注射DHEA建立PCOS模型,用免疫组化法检测卵巢GDF-9表达;用RT-PCR法检测BMPR-ⅡmRNA的表达。结果:GDF-9主要于PCOS发育正常的初级、窦前、窦状卵泡卵母细胞胞浆中表达,表达强度与对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。BMPR-ⅡmRNA相对含量则显著高于对照组(P<0.05)。结论:GDF-9是促进P- COS卵泡发育的主要原因;受体表达上调是诱导雄激素增高的原因之一。
- 苗竹林杨艳东王小兰崔蓉程龙球王自能
- 关键词:多囊卵巢综合征生长分化因子-9受体
- 斜带石斑鱼脂肪酸去饱和酶和延长酶基因全长cDNA序列的克隆与分析被引量:2
- 2009年
- 利用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)方法获得斜带石斑鱼Epinephelus coioides肝脏中控制高不饱和脂肪酸合成的脂肪酸去饱和酶(fatty acid desaturase,FAD)和脂肪酸延长酶(fatty acid elongase,ELO)基因的全长cDNA序列。结果表明,FAD基因的全长cDNA序列长1979 bp,含1338 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),编码445个氨基酸。编码的蛋白序列含有FAD全部的特征结构区,包括3个组氨酸簇、2个跨膜区和1个细胞色素b5结构域,与金头鲷Sparus aurata、大麻哈鱼Oncorhynchus keta、鲤鱼Cyprinus carpio和斑马鱼Danio rerio FAD的氨基酸同源性为66.5%—90.8%。二级结构分析显示其以螺旋和β折叠为主,系统进化分析表明其与金头鲷和欧洲鲈鱼的亲缘关系最近。ELO基因的全长cDNA序列1228 bp,含有885 bp的开放阅读框,编码294个氨基酸。该蛋白序列含有单一的氧化还原中心组氨酸簇、内质网停留信号和多个跨膜区等ELO特征结构区,与金头鲷、大麻哈鱼、尼罗罗非鱼Oreochromis niloticus和斑马鱼ELO的氨基酸同源性为71.1%—85.7%。蛋白二级结构预测表明其含有丰富的螺旋和β折叠结构,系统树分析显示其与金头鲷亲缘关系最近。斜带石斑鱼FAD和ELO全长cDNA序列的获得,为今后进一步研究其高不饱和脂肪酸合成途径奠定基础。
- 李观贵梁旭方何珊郁颖陈晓艳黄柏炎程龙球
- 关键词:脂肪酸去饱和酶基因克隆
- 三种蒽醌衍生物对小鼠外周血淋巴细胞微核影响被引量:1
- 2000年
- 目的 :探讨 1.5—二氨基蒽醌 (1.5 -DAAQ)、1 5—二氯蒽醌 (1 5—DCAQ)和 1 8—二氯蒽醌 (1 8—DCAQ)的遗传毒理。方法 :本文运用小鼠外周血淋巴细胞微核测定方法。结果 :小鼠第一次被注射 1 5—DAAQ ,1 5—DCCQ和 1 8—DCAQ所产生的微核细胞与空白对照组相比无显著性差异 ,第二次以及以后各次分别注入上述三种化合物时 ,与对照组相比有显著差异 (P <0 0 1)。结论 :三种AQs在小鼠体内累积到一定数量时 ,会产生明显的遗传毒性。
- 程龙球梁志成汝明权
- 关键词:蒽醌衍生物遗传毒理微核率外周血淋巴细胞
- 人类染色体R显带法改良初探
- 1998年
- 应用改良的R显带方法进行染色体显带,结果表明:染色体能及时显带,带纹清晰、丰富,其方法稳定、简便、易于识别、重复性佳.
- 林白霜程龙球
- 关键词:染色体显带显带人类染色体
- 慢性粒细胞性白血病骨髓移植后的染色体观察
- 1998年
- 为了观察慢性白血病骨髓移植术后患者的生存情况,笔者对费城染色体进行了检测,结果表明:患者术后9个月,XX核型细胞占87%,XY核型细胞占13%,费城染色体阴性;术后1年,XX核型细胞占64%,XY核型细胞占34%,费城染色体阳性细胞占2%.慢性白血病骨髓移植术后观察费城染色体。
- 林白霜程龙球梁志成
- 关键词:骨髓移植染色体白血病慢性白血病
- 人β地中海贫血β^41/42突变基因的克隆和真核表达体系的构建被引量:3
- 2008年
- 目的:克隆人地中海贫血基因β41/42及调控系列LCR,构建该致病基因的体外真核表达体系,为该病基因治疗的研究提供理想模型。方法:抽提β41/42纯合子患者的DNA,PCR扩增出人β珠蛋白基因座控制区(LCR)和β41/42基因,将其串连克隆至真核稳定表达质粒pcDNA3.1-中,脂质体转染至小鼠红白血病细胞(MEL),DMSO诱导MEL细胞表达,逆转录PCR检测人β41/42基因在MEL中的表达。结果:成功构建了人β41/42突变基因的真核表达系统。结论:β41/42基因在MEL细胞中的表达情况与设计的表达完全一致,为该病的基因治疗研究提供了一个理想模型。
- 唐晖李弘剑张欣李月琴周天鸿汤绍辉张文军程龙球
- 关键词:地中海贫血基因疗法急性白血病幼红细胞
- 极谱氧传感仪快速测定超氧化物歧化酶的实验研究被引量:2
- 2000年
- 超氧化物歧化酶 (简称SOD)是机体内超氧阴离子自由基 (O2 ·- )的清除剂 ,广泛存在于生物界 ,其检测方法较多。为探索一种快速检测SOD的新方法 ,我们自行设计、加工、组装成了极谱氧传感器SOD检测仪 ,并建立了相应的检测方法。用该检测仪测定SOD ,具有快速、简便、经济等优点。
- 凌庆枝程龙球梁云东蔡春德梁志成
- 关键词:超氧化物歧化酶