秦瑞云 作品数:15 被引量:52 H指数:4 供职机构: 河南师范大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 河南省教育厅自然科学基金 国家自然科学基金 河南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
菠菜性别相关EST-SSR标记的开发及应用 被引量:16 2012年 为了明确菠菜EST序列中SSR的总体特点,开发菠菜EST-SSR引物;为利用EST-SSR引物进行菠菜性别相关特异序列的克隆奠定基础,本文从NCBI上获得1093条EST,利用在线软件SSRIT检测所含SSR序列,并进行分析。共检索出68条SSR序列,分布于64条EST中,检出率为6.22%,包括22种重复基元。其中二核苷酸重复基元的EST-SSR占主导地位,占总SSR数目的32.3%。利用在线引物设计软件Primer3.0设计了7对EST-SSR引物,在适合的PCR反应体系下,分别以雌、雄菠菜DNA基因组为模板,对设计的EST-SSR引物进行筛选,结果显示以EST序列HS097148设计的一对引物从菠菜雌雄基因组中扩增出一条雄性特异的条带,表明通过菠菜EST-SSR引物获得菠菜性别相关特异序列是可行的。 邓传良 高俊 曹莹 秦瑞云 高武军 卢龙斗关键词:菠菜 表达序列标签 微卫星 长筒石蒜的C带分析 被引量:3 2007年 对长筒石蒜C-带进行了初步研究,研究表明其染色体2 n=16。对于M型染色体,带纹主要以末端带为主;而对于T型染色体,主要出现了着丝粒带纹,同时也出现了随体带。同时,对于石蒜属染色体可能的进化方式进行了探讨。 秦瑞云 邓传良关键词:长筒石蒜 C-带 染色体 菠菜性别相关的RAPD标记 被引量:9 2009年 菠菜为雌雄异株植物,用CTAB法提取其雌雄成株幼嫩叶片总DNA分别构建雌、雄株的DNA池,以之为模板,用已优化的RAPD体系扩增,在160条随机引物(10 bp)和40个引物对中筛选出44个扩增效果较好的单引物,再从中进行进一步筛选。研究发现,引物S1497扩增出1条雄性特异性条带,检测发现该条带只在雄株DNA池中出现。回收纯化该特异扩增片段,将其连接于pUCm-T载体,转化进大肠杆菌JM109菌株,并进行检测及测序。测序结果显示,该片段全长1 978 bp,该特异条带的获得为菠菜性别相关基因的克隆奠定了基础。 秦瑞云 杨金华 贾彦彦 张准超 高武军 卢龙斗 邓传良关键词:菠菜 RAPD 特异片段 性别相关 菠菜性别相关的ISSR标记 被引量:2 2014年 菠菜为雌雄异株植物,用CTAB法提取其雌、雄株成株幼嫩叶片DNA,分别构建雌、雄株DNA池,以之为模板,用已优化的ISSR体系扩增,在74条ISSR引物中,I62扩增出一条约1 200bp雌性连锁标记,回收纯化该特异扩增片段,将其连接于pUCm-T载体,转化进大肠杆菌JM109菌株,并检测及测序。回收克隆和测序后发现该片段全长1 176bp,富含AT,AT占57.0%。根据测序结果设计1对25bp的特异引物将这个雌性连锁的ISSR标记转化为稳定性和特异性更好的SCAR标记。该特异引物对随机选取的雌雄菠菜单株进行PCR扩增,在雌株中均有1 176bp的特异条带,而雄株中均无。此特异条带的获得为菠菜性别相关基因的克隆奠定基础。 杨金华 付庆云 秦瑞云 邓传良关键词:菠菜 ISSR 特异片段 性别相关 菠菜性别相关SRAP分子标记的筛选及分析 被引量:7 2013年 菠菜(2n=2x=12)是研究雌雄异株植物性别分化的一种理想材料。本研究利用SRAP(sequence related amplified polymorphism)分子标记方法,采用256对引物组合对菠菜雌、雄基因池进行筛选,后利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳进行检测。结果表明,经过对256对引物组合进行筛选,其中20对引物组合扩增效果较好,共获得47个雌性特异片段和29个雄性特异片段,其多态性达到19.9%;在这20对引物组合中,引物对em11+me14、em10+me10经琼脂糖凝胶电泳验证扩增效果最好,可以扩增出菠菜雄、雌稳定的分子标记。本研究获得的性别特异标记可以用于菠菜幼苗期性别鉴定,同时为菠菜性别相关基因的克隆奠定了基础。 邓传良 曹莹 任映雪 秦瑞云 李书粉 高武军 卢龙斗关键词:菠菜 雌雄异株 SRAP 聚丙烯酰胺凝胶电泳 石蒜C带的研究 2007年 对石蒜C带的初步研究表明,其染色体2n=33,由T型染色体组成。带纹不丰富,仅第3号和第5号染色体出现带纹。第3号染色体出现的是着丝点带,为线状;第5号染色体出现的是中间带,带纹出现在长臂上,为斑点状。结果表明,石蒜为同源三倍体。 秦瑞云 邓传良 杨金华关键词:石蒜 C带 染色体 葎草单染色体的显微分离及DOP-PCR技术体系建立 2016年 葎草是具有XX/XY1Y2性染色体系统的雌雄异株植物,是研究植物性染色体演化的模式材料之一.利用染色体显微分离技术从葎草根尖有丝分裂中期分裂相中将单条染色体进行了显微分离及DOP-PCR(Degenerate oligonucleotide primer-PCR)扩增,并构建了单染色体DOP-PCR扩增产物的荧光探针,对葎草根尖有丝分裂中期分裂相染色体进行了荧光原位杂交,其结果表明荧光信号分布在所有的染色体上,表明所建立的技术体系能够成功分离葎草单染色体并进行DNA扩增.本研究结果为进一步进行葎草X,Y染色体的细胞及分子生物学研究提供了技术支持. 秦瑞云 李双双 李书粉 袁金红 高武军 邓传良关键词:葎草 单染色体 显微分离 DOP-PCR 侧金盏花CBF转录激活因子基因片段的克隆 被引量:4 2008年 [目的]探索CBF转录激活因子基因在侧金盏花中是否存在。[方法]以侧金盏花基因组DNA为模板,根据拟南芥CBF基因序列的保守区设计1对特异性引物,通过PCR扩增获得1个DNA片段,将其克隆到pUCm-T载体中,转化大肠杆菌TG1,筛选阳性克隆并对其进行测序鉴定。[结果]测序结果显示通过PCR扩增获得的基因片段长448 bp。在GenBank中检索,该序列与从拟南芥和其他作物中克隆的CBF同源基因序列同源性较低,说明是一个新的基因片段,初步认定该片段是侧金盏花CBF基因片段。[结论]该研究为进一步克隆侧金盏花CBF转录激活因子基因全长序列、鉴定其生物学意义奠定了基础。 邓传良 秦瑞云 王连军 高武军 卢龙斗 王兆龙关键词:侧金盏花 CBF基因 克隆 Fe^+注入诱变莲花突变体的POD和SOD同工酶分析 被引量:1 2013年 以经Fe+注入诱变的白洋淀红莲(Nelumbo nucifera var.Baiyangdian)突变体幼嫩叶片为材料,提取过氧化物酶(POD)同工酶和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶,对莲花POD和SOD同工酶进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测不同莲花突变体POD和SOD同工酶酶谱的差异。结果表明,与对照相比,离子注入诱变后的白洋淀红莲不同突变体间POD和SOD同工酶酶谱发生了改变,在Rf为0.09处,M4、M6突变体同时出现了特异性POD同工酶酶带;在Rf为0.19处,M3、M5突变体同时出现了特异性POD同工酶酶带;在Rf为0.33处,M2、M3、M4、M5突变体同时出现了特异性的POD酶带;在Rf 0.55和0.63处,M1、M2突变体同时出现了POD酶带;在Rf为0.41处,M1、M2、M4、M5、M6突变体同时出现了特异性SOD同工酶酶带。离子注入诱变获得的不同莲花突变体可以用POD和SOD同工酶进行鉴定。 秦瑞云 邓传良 贾彦彦 高武军 卢龙斗关键词:VAR. 过氧化物酶同工酶 悬铃木多倍体诱导的初步研究 被引量:2 2008年 采用顶芽滴液法和种子浸泡法进行悬铃木多倍体诱导,比较了不同秋水仙素浓度和不同处理时间对出苗率和变异率的影响。结果表明,0.2%秋水仙素对种子进行浸泡,染色体未出现加倍,而0.3%秋水仙素对子叶进行连续7天的处理,诱导加倍情况最好。 邓传良 秦瑞云 杨金华 张准超 高武军 赵洁 卢龙斗关键词:悬铃木 秋水仙素 多倍体