田芳 作品数:35 被引量:65 H指数:5 供职机构: 中国农业科学院植物保护研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 自然科学总论 更多>>
一种获得生长特性改良水稻品种的方法 本发明涉及水稻品种生长特性的改良,具体涉及一种获得生长特性改良水稻品种的方法。其特征在于,包括:向水稻受体材料中转入过量表达核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的基因的过表达载体,获得转基因水稻植株;所述生长特性指植株... 陈华民 余超 陈禹彤 田芳 杨凤环 何晨阳文献传递 转基因小麦京411的选育及其利用 以小麦品种京411作为受体材料,取其幼胚进行愈伤诱导,通过基因枪将抗蚜虫的雪花莲凝集素(Galanthus nivalis agglutinin,GNA)基因转入小麦愈伤组织,每代进行PCR检测和接麦蚜实验证明获得了T5... 徐琼芳 陈孝 田芳 李连城 杜丽璞 马有志 辛志勇关键词:GNA基因 转基因小麦 蚜虫 环鸟苷二磷酸代谢相关基因PXO_03877的原核表达 被引量:1 2011年 分别利用表达载体pET-32a(+)和pGEX-4T-1,对水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzae,简称Xoo)中环鸟苷二磷酸代谢相关基因PXO_03877进行了原核表达,并进行可溶性检测。结果显示,用pET-32a(+)载体构建的表达质粒载体经诱导后,重组蛋白大多位于沉淀而非上清中,经诱导条件优化后,蛋白仍以包涵体形式存在;而利用pGEX-4T-1载体表达的含有GST标签的重组蛋白为可溶性蛋白,可用于下一步纯化后进行功能分析。 王红敏 田芳 陈华民 何晨阳关键词:水稻白叶枯病菌 PGEX-4T-1 鞭毛素蛋白FliCaaa诱导水稻免疫反应的活性测定 2015年 为阐明燕麦嗜酸菌(Acidovorax avenae subsp.avenae,Aaa)鞭毛素蛋白Fli Caaa及其结构域对水稻免疫反应的诱导作用,通过分子生物学和生物信息学方法,对Aaa菌株IPN1的鞭毛素进行基因克隆及其序列分析;在大肠杆菌中对该基因全长、N端和C端片段进行了原核表达,纯化了Fli Caaa蛋白及其截短肽段;采用水稻叶片浸润法测定了表达蛋白对水稻免疫反应的诱导活性。结果表明,通过特异性引物的PCR扩增,获得1 479 bp的鞭毛素基因fli Caaa,其编码产物含有492个氨基酸,分子量为49.4 k D,具有flagellin-N和-C两个保守结构域;原核诱导表达获得了Fli Caaa、Fli Caaa-N和Fli Caaa-C可溶性融合蛋白;3种纯化蛋白均能诱导水稻细胞死亡和H2O2产生等免疫反应,但诱导能力略有差异。 刘莹 陈华民 于清 田芳 鲁国东 何晨阳关键词:原核表达 纯化 免疫反应 基于文献计量学的植物保护学科发展态势分析 被引量:5 2021年 采用科睿唯安(Clarivate Analytics)的Web of Science(WOS)核心数据库中Science Citation Index Expanded(SCIE)子库数据,通过文献计量学方法对发文量、篇均被引频次、重点国家、高发文机构和高发文期刊等指标进行分析,结果显示,植物保护学科发文量10年间大体呈现平稳增长趋势,平均增长率为6.42%。中国是发文Top10国家之一,中国农业科学院也跻身Top10重要机构之一,但发文影响力均显不足。在Top10高发文期刊中美国占据5席,英国占据3席,瑞士2席。国家自然科学基金委员会是Top10发文资助机构中资助发文量最多的单位。 邹亚飞 孙爻 田芳 张礼生关键词:文献计量学 燕麦嗜酸菌鞭毛素的提纯及其活性检测 被引量:1 2013年 为阐明燕麦嗜酸菌(Aaa)鞭毛素作为一种病原相关分子模式(PAMP)诱导水稻免疫反应(PTI)的作用机理,采用机械震荡、丙酮沉淀以及离子交换层析进行了蛋白提纯,并用DAB染色法对其诱导水稻产生H2O2的能力进行了测定。结果表明,上述提纯方法的组合使用有效地提纯了分子量约为45 kD的鞭毛素,经浸润接种处理后诱导了水稻叶组织H2O2的产生。因此,Aaa鞭毛素提纯蛋白可用于后续的水稻PTI机理分析。 伍甜 刘莹 余超 边强 田芳 黄琼 陈华民 何晨阳关键词:纯化 生物活性 水稻白叶枯病菌c-di-GMP信号途径及其毒性调控机制 细菌胞内第二信使环二鸟苷酸(c-di-GMP)参与调控了致病性、毒性因子产生、生物膜形成、运动性和细胞周期等过程。为了阐明c-di-GMP 信号途径对致病性/毒性调控机制这一关键科学问题,近年来本实验室对水稻白叶枯病菌c... 杨凤环 田芳 陈华民 何晨阳水稻白叶枯病菌第二信使c-di-GMP代谢酶基因的预测和分析 被引量:2 2015年 旨在从水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)中鉴定出含有GGDEF结构域的鸟苷酸环化酶(DGC)和含有EAL或HD-GYP结构域的磷酸二酯酶(PDE)编码基因。预测分析了Xoo已测序菌株中的GGDEF、EAL和HD-GYP结构域蛋白的种类、数量及其序列特征,鉴别了基序保守的DGC或PDE、基序退化的信号受体以及信号输入结构域,验证了部分不同类型结构域蛋白作为DGC/PDE、信号受体以及在细菌毒性调控等方面的功能。 薛丁榕 田芳 李海云 杨凤环 陈华民 何晨阳关键词:水稻白叶枯病菌 鸟苷酸环化酶 磷酸二酯酶 katExoo基因缺失突变对水稻白叶枯病菌H2O2抗性和致病性的影响 2013年 为了揭示过氧化氢酶基因katExoo在水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)过氧化氢(H2O2)抗性和致病性中的功能,本研究构建了基因缺失突变体ΔkatExoo,测定了突变体的H2O2抗性、过氧化氢酶(CAT)活性、在离体培养条件下的生长速率以及对水稻的致病性。用标记基因置换法获得了ΔkatExoo突变体,其保守的CAT结构域(GATase1_catalase和catalase_clade_2)被GmR片段所替换。katExoo基因缺失突变并不导致病菌的H2O2抗性和CAT活性降低或丧失,反而在一定程度上使之增强和升高。ΔkatExoo离体生长量显著降低,水稻接种叶片病斑明显缩短、在叶组织内的种群量下降。表明基因缺失突变显著地影响了病菌的生长、定殖和致病性。本研究结果为"KatExoo可能是Xoo的一个毒性因子"的假设提供了遗传学证据。 王努 吴茂森 田芳 陈华民 何晨阳关键词:水稻白叶枯病菌 基于瞬时表达系统的水稻miRNA靶基因快速验证系统的建立 被引量:1 2019年 旨在建立一种准确且快速的基于瞬时表达系统的水稻miRNA靶基因验证系统,为研究水稻miRNAs的生物学功能奠定基础。已有研究证实osa-miR169o剪切靶基因OsNF-YA4(LOC_Os03g48970.1)的mRNA,以此为参照,在烟草和水稻原生质体瞬时表达系统中将miR169o前体基因分别与LUC表达载体、LUC-48970和LUC-48970m3融合表达载体瞬时共表达,通过CCD活体成像和Luminometor分析了共表达后LUC活性的动态变化。利用茎环qRT-PCR对miR169o的表达水平进行分析,获得靶基因验证的适合体系。在水稻原生质体体系中,LUC活性和miR169o表达水平在原生质体转化后逐渐增高;24 h时LUC活性最高,相应miR169o表达水平上升10倍左右。综合分析,在原生质体转化后24 h-36 h为适宜检测时间段。在烟草瞬时表达体系中,农杆菌注射72 h后LUC活性最强,而miR169o的表达在48 h后即可上调20倍。因此,农杆菌注射后48 h-72 h为适宜检测时间段。本系统为水稻miRNA靶基因的验证提供了一种简便、快速,且更接近于体内真实情况的实验方法。 胡积祥 曹雅倩 朱秀梅 余超 田芳 杨凤环 陈华民 何晨阳关键词:水稻 MIRNA 荧光素酶