王颖智
- 作品数：17 被引量：42H指数：4
- 供职机构：上海交通大学附属第六人民医院更多>>
- 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 原代培养HUVEC电转导siRNA进行RNA干扰方法的建立
- 目的本研究拟建立一种高效的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)电击转染siRNA的方法,为相关研究奠定基础。方法1.采用方波电压250V.15ms的电击参数及250nM浓度siRNA对原代培养的HUVEC进行RNA干扰;2.采...
- 王颖智刘鷖雯何怡青高锋
- 文献传递
- 原代培养HUVEC电转导siRNA进行RNA干扰方法的建立
- 王颖智刘鷖雯何怡青高锋
- pcDNA3.1（＋）-LYVE-1真核表达质粒的构建及其在COS-7细胞中的表达
- 2010年
- 目的 构建人淋巴管内皮细胞特异标志物LYVE-1融合基因表达质粒,观察其在COS-7细胞中的表达,为进一步探讨该标志物在肿瘤淋巴转移中的作用提供工具.方法 从本院结肠癌根治术患者术所取组织中的淋巴结抽提总RNA,RT-PCR扩增LYVE-1基因片段,并将其插入pMD19-T Simple Vector进行测序,鉴定正确后构建pcDNA3.1（＋）-LYVE-1并转染COS-7细胞,RT-PCR、Western印迹检测目的 蛋白表达,间接免疫荧光检测该基因表达在COS-7细胞上.结果 成功获取了人淋巴管内皮细胞特异标志物LYVE-1全长cDNA,构建了其真核表达载体pcDNA3.1（＋）-LYVE-1,转染COS-7细胞后检测出目的 蛋白的表达,并且证明该基因表达在细胞上.结论 成功构建了pcDNA3.1（＋）-LYVE-1重组质粒,为进一步研究LYVE-1在肿瘤淋巴管转移中的功能提供了重要的实验材料.
- 杜艳杨婉薇马展杨翠霞刘一文何怡青王颖智高锋
- 关键词：质粒构建非洲绿猴肾细胞
- 条索状透明质酸在乳腺肿瘤细胞BT549化疗耐药中的作用
- 2012年
- 目的观察透明质酸的新存在形式——条索状透明质酸在乳腺肿瘤细胞BT549表面的表达情况，探索该结构在BT549细胞耐受紫杉醇杀伤中的作用。方法采用免疫细胞荧光技术观察BT549细胞表面条索状透明质酸的分布情况；分别用流式细胞术和RT—PCR检测透明质酸的条索状结构被破坏前后，紫杉醇诱导的肿瘤细胞凋亡、坏死率的改变以及凋亡相关基因c-junmRNA表达的改变。结果BT549细胞天然表达大量的条索状透明质酸，条索状结构被破坏后，紫杉醇诱导BT549细胞的凋亡和坏死率显著增高（P〈0．05），凋亡基因c扣n的表达水平也显著增高（P〈0．05）。结论乳腺肿瘤细胞BT-549高表达条索状结构的透明质酸，这种透明质酸的新存在形式可能在BT549细胞耐受紫杉醇的杀伤过程中起到一定的保护作用。
- 杨婉薇刘鷖雯何怡青杜艳杨翠霞王颖智高锋
- 关键词：紫杉醇化疗耐药
- 荧光定量PCR检测VEGF-C、CEACAM-1在胃肠肿瘤中的表达及意义被引量：4
- 2011年
- 目的观察血管内皮生长因子C(VEGF-C)和癌胚抗原相关黏附分子1(CEACAM-1)在消化道癌组织和癌旁组织中的表达情况,探讨其表达与肿瘤分期的关系,与术前血清癌胚抗原(CEA)水平一起比较其在肿瘤诊断中的价值。方法采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测53例消化道肿瘤及相应癌旁对照组织中VEGF-C、CEACAM-1 mRNA表达水平;用全自动免疫发光分析仪测量患者术前血中CEA水平。结果 VEGF-C mRNA在癌组织中的表达显著高于相应癌旁对照组织(P<0.05),均值分别为2.65E-03和1.63E-03;CEACAM-1 mRNA在癌组织和癌旁组织中表达差异无统计学意义(P>0.05),均值分别为0.036 2和0.066 4;VEGF-C、CEACAM-1mRNA在癌组织及癌旁对照组织中均有显著相关性(P<0.001);癌组织中肿瘤侵润较深组其CEACAM-1 mRNA显著高于肿瘤侵润较浅组(P<0.05);癌组织VEGF-C mRNA诊断消化道恶性肿瘤的符合率较血清CEA高(P<0.001)。结论胃肠道肿瘤中CEACAM-1和VEGF-C的表达量与肿瘤分期有关;VEGF-C mRNA在癌组织中的表达水平可作为胃肠恶性肿瘤的预测指标,也可在分子水平上作为判断胃肠肿瘤临床分期的辅助指标。
- 周沐青刘鷖雯王颖智何怡青杨翠霞高锋
- 关键词：血管内皮生长因子C胃肠肿瘤实时荧光定量聚合酶链反应
- 应用高效毛细管电泳筛检和鉴定血清中M蛋白被引量：4
- 2005年
- 目的:应用毛细管区带电泳法(CZE)和毛细管区带电泳-免疫削减法(IS-CZE)对M蛋白进行筛检和鉴定。方法:运用CZE和琼脂糖凝胶电泳(AGE)分别对532例血清进行M蛋白的筛检;用IS-CZE和免疫固定电泳(IFE)对M蛋白阳性的64例标本进行免疫分型。结果:与AGE相比较,CZE筛检M蛋白的阳性率为96.9%;与IFE相比较,IS-CZE分型的符合率为89.1%;自包被固相抗体能满足试验要求。结论:毛细管区带电泳可高效、快速完成M蛋白的筛检和鉴定,适合临床推广。
- 顾志冬徐汝明王颖智樊建萌樊绮诗
- 关键词：毛细管区带电泳免疫固定电泳M蛋白
- 原代培养HUVEC电转导siRNA进行RNA干扰方法的建立
- 目的本研究拟建立一种高效的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)电击转染siRNA的方法,为相关研究奠定基础。方法1.采用方波电压250V,15ms的电击参数及250nM浓度siRNA对原代培养的HUVEC进行RNA干扰;2.采...
- 王颖智高锋
- 关键词：人脐静脉内皮细胞RNA干扰
- 文献传递
- 血清CEACAM-1在消化道疾病的表达应用及机理初探
- 目的探讨CEACAM-1与消化道癌疾病的关系及血清CEACAM-1是否对消化道癌具有诊断意义。方法酶联免疫吸附试验检测26例上消化道癌、27例下消化道癌、26例消化道良性疾病以及34例正常人群血清CEACAM-1表达情况...
- 周沐青刘鷖雯王颖智何怡青杨翠霞杜艳高锋
- 乙肝疫苗接种后新生儿乙型肝炎表面抗原一过性阳性的研究被引量：18
- 2015年
- 目的回顾性分析并探讨接种乙型肝炎（简称乙肝）疫苗与新生儿乙型肝炎表面抗原（HBsAg）一过性阳性的关系。方法对进行HBsAg检测的178例新生儿资料进行回顾性分析，对疫苗接种后的HBsAg阳性发生率、“乙肝二对半”模式、HBsAg浓度及与接种时间的关系等进行了统计分析，通过胆红素干扰试验排除新生儿黄疸对HBsAg检测的影响，根据新生儿血容量进行乙肝疫苗体外稀释，检测其HBsAg浓度。结果178例新生儿共检测184次，检出HBsAg阳性16例，其中11例为乙肝疫苗引起的HBsAg阳性，3例为母婴垂直传播引起的HBsAg阳性，2例不确定。新生儿乙肝疫苗接种后HBsAg阳性主要发生于接种疫苗后0～7d，与疫苗接种后8～14d及15～31d比较，HBsAg的阳性率差异有统计学意义（P值分别为0．046、0．032）。疫苗接种后的HBsAg浓度为0．12（0．07～0．25）IU／mL，属低值水平。接种疫苗后0～2d，HBsAg浓度最高，之后逐渐下降。乙肝疫苗接种后11例以HBsAg单项阳性为主，其中3例同时伴乙型肝炎表面抗体（HBsAb）阳性，不同于乙肝病毒感染后常见血清模式。将乙肝疫苗1：600稀释后检测HBsAg为0．13IU／mL，与乙肝疫苗引起的HBsAg阳性浓度[0．12（0．07～0．25）IU／mL]近似。干扰试验显示383．9μmol／L总胆红素、29．9μmol／L直接胆红素不影响HBsAg检测。结论接种乙肝疫苗2周内的新生儿发生HBsAg一过性阳性的可能性较大，建议HBsAg检测在乙肝疫苗接种2周后再进行。
- 刘华王颖智沈云岳庄亦晖康懿王雯静吴树英蒋炜高锋
- 关键词：乙型肝炎表面抗原乙型肝炎疫苗
- 实时荧光定量PCR检测CD44和RHAMM在胃肠肿瘤中的表达研究被引量：6
- 2008年
- 目的探讨CD44和透明质酸介导运动的受体（RHAMM）在胃肠肿瘤组织中的表达，研究其在肿瘤诊断中的价值。方法收集病理分期为Ⅱ～Ⅲ级胃肠道恶性肿瘤样本30例，并通过实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）对CD44和RHAMM进行定量分析。结果CD44和RHAMM在癌组织中相对于管家基因GAPDH的表达中位数分别为1．587和1．074，正常组织中分别为0．704和0．098；肿瘤组织中，区域淋巴结转移组的CD44拷贝数／GAPDH拷贝数的中位数为1．650，未转移组相应的均值为1．431；区域淋巴结转移组的RHAMM拷贝数／GAPDH拷贝数的中位数为1．301，未转移组的中位数为1．064。区域淋巴结转移样本其CD44和RHAMM表达同步增高，肿瘤组织中CD44和RHAMM之间的相关系数（r）为0．96。结论胃肠肿瘤中的CD44和RHAMM表达高于正常组织，且两者表达具相关性。CD44和RHAMM的表达量增加的多少不足以判断肿瘤是否有区域淋巴转移，CD44和RHAMM同时增高可能预示肿瘤的淋巴转移。
- 王颖智杨翠霞刘鷖雯何怡青杨思崔练高锋
- 关键词：透明质酸受体CD44实时荧光定量聚合酶链反应胃肠肿瘤
