王金星
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 嗜水气单胞菌Ⅲ型分泌系统ascV全长基因的克隆及其在不同菌株中的分布被引量:2
- 2013年
- 根据已发表的嗜水气单胞菌Ⅲ型分泌系统(TTSS)的ascV基因保守区核苷酸序列设计合成1对引物,以国内疫苗菌株J-1的基因组为模板,通过PCR扩增得到331bp保守基因片段,将目的片段进行测序。在此基础上,分4段克隆J-1株的ascV基因并进一步拼接,全长为2 166bp,同时PCR检测ascV基因在66株嗜水气单胞菌中的分布情况。测序分析发现,扩增出的J-1株ascV全长基因与嗜水气单胞菌AH-1、SSU、AH-3的同源性分别为97%、86%、86%,与杀鲑气单胞菌杀鲑亚种A449的同源性为86%,与温和气单胞菌的同源性为87%。PCR检测表明,64株能扩增出ascV基因的目的片段,包括2株无毒菌株,而在2株有毒菌株中却未能检测到,说明TTSS在嗜水气单胞菌致病机制上的作用值得进一步探讨。
- 王金星陆承平刘永杰
- 关键词:嗜水气单胞菌
- 嗜水气单胞菌Ⅲ型分泌系统AopN蛋白原核表达及鉴定
- 2013年
- 根据GenBank上登陆的嗜水气单胞菌AH-1株Ⅲ型分泌系统aopN基因序列,设计1对特异性引物,以J-1株的基因组为模板,PCR扩增得到aopN基因,连入pET-32a(+),转化至大肠杆菌表达,同时PCR检测aopN基因在66株嗜水气单胞菌中的分布情况。aopN基因测序分析发现,片段长度为874 bp,与嗜水气单胞菌AH-1、SSU、AH-3的同源性分别为97%、81%、82%,与杀鲑气单胞菌杀鲑亚种A449的同源性为81%,与温和气单胞菌的同源性为82%。PCR检测结果表明,57株能检测到aopN基因的目的片段。SDS-PAGE分析表明重组蛋白分子量为54.5ku,用兔抗J-1株的全菌抗血清进行Western blot分析表明,该蛋白具有较好的免疫反应性。由于多数菌株都含有aopN基因,提示AopN可能是嗜水气单胞菌的共同保护性抗原。
- 王金星陆承平刘永杰
- 关键词:嗜水气单胞菌
- 嗜水气单胞菌Ⅲ型分泌系统基因的克隆表达及密度感应系统对其调控作用
- 嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)是人和多种动物的病原菌,该菌致病性是多种因素作用的结果,涉及外毒素、胞外蛋白酶等多种毒力因子,并且可能与III型分泌系统(type III secretion...
- 王金星
- 关键词:嗜水气单胞菌基因克隆密度感应
- 文献传递