王萍
- 作品数：30 被引量：90H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省卫生厅科研基金内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 星形胶质细胞凋亡和脑缺血被引量：7
- 2006年
- 王萍王伟
- 关键词：星形胶质细胞脑缺血凋亡
- 经流式细胞仪分选神经细胞技术方法的建立被引量：3
- 2008年
- 目的:探索建立一种分离在体模型中不同种类神经细胞的技术方法。方法:采用免疫荧光标记方法和流式细胞仪分选技术。结果:NeuN和GFAP双标显色可见,GFAP阳性的星形胶质细胞无NeuN表达,经过流式细胞仪分选可获得高纯度的星形胶质细胞和神经元,其阳性标记率分别为31.91%±4.67%和47.70%±6.30%。结论:该分选方法可以同时获得纯度高、数量多的不同种类的神经细胞。
- 王萍李润今高学文王伟
- 关键词：星形胶质细胞神经元
- 住院病人医疗服务满意度调查分析被引量：10
- 2004年
- 王萍
- 关键词：住院病人社会人群卫生管理人员满意感管理环节
- 免疫吸附治疗2例重症肌无力的护理
- 2001年
- 李玲王萍
- 关键词：免疫吸附治疗重症肌无力护理
- 急性冠脉综合征患者血尿酸与内皮素的临床意义被引量：1
- 2011年
- 尿酸是人体内嘌呤代谢的终产物,目前认为高尿酸血症与冠心病的发生发展及转归密切相关。内皮素是由21个氨基酸残基构成的短链多肽,具有极强的缩血管效应,它参与各种生理活动和疾病过程,其在心血管作用中正逐渐成为研究热点。现就高尿酸血症、内皮素与冠心病的研究进展作一综述。
- 张如婷高学文王萍
- 关键词：高尿酸血症内皮素冠心病
- 细胞外信号调节激酶对大鼠局灶性脑缺血后细胞周期调控的影响
- 2008年
- 目的研究脑缺血后细胞外信号调节激酶（ERKs）对细胞周期调控的影响。方法建立光化学法诱导大鼠局灶性脑缺血模型，分为脑缺血组（对照组及治疗组）和假手术组。治疗组于缺血前30rain尾静脉注入U0126溶液，对照组尾静脉注入相同体积不含U0126的DMSO稀释溶液。应用免疫组织荧光化学法观察细胞周期蛋白D1（CyclinD11和细胞周期蛋白E（CyclinE）阳性细胞表达；免疫印迹（Westem blot）检测磷酸化ERK1／2（pERKl／2）、CyclinD1和CyclinE的蛋白表达；半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）观察转录因子E2FmRNA的表达。结果治疗组CyclinD1和CyclinE阳性表达的细胞数较对照组显著减少fP〈0．051；缺血对照组pERK1／2蛋白表达显著强于治疗组（P〈0．05），4h时间点表达最为明显，12h时间点恢复到基线水平，CyclinD1和CyclinE表达6h开始升高，12h表达最为明显，治疗组较对照组显著减弱伊〈0．05）；缺血对照组E2FmRNA的表达显著强于治疗组和假手术组伊〈0．05），以7d表达最为明显。结论EeKs在大鼠脑缺血中发挥重要作用，抑制脑缺血引起的ERK1／2磷酸化，可降低细胞周期蛋白CyclinD1、CyclinE和E2F的表达，即ERKs可影响细胞周期的调控。
- 张贵斌付度关王伟徐运兰王萍田代实
- 关键词：ERKSU0126CYCLINEE2F细胞周期
- 大鼠局灶性脑缺血后星形胶质细胞Cyclin D1及Cyclin E的表达
- 2010年
- 目的:研究大鼠局灶性脑缺血后星形胶质细胞细胞周期蛋白Cyclin D1及Cyclin E的表达差异及变化。方法:建立大鼠大脑中动脉闭塞模型,双光源流式细胞术检测假手术组及缺血再灌注后1d、3d、7d、15d组大鼠大脑皮质星形胶质细胞Cyclin D1及Cyclin E的表达。结果:假手术组大鼠星形胶质细胞表达Cyclin D1及Cyc-lin E,Cyclin E的表达高于Cyclin D1(P<0.05);局灶性脑缺血后,星形胶质细胞Cyclin D1的表达逐渐增加,7d及15d时高于假手术组(P<0.05);局灶性脑缺血后,星形胶质细胞Cyclin E的表达无明显变化,各组间比较差异无统计学意义。结论:局灶性脑缺血后星形胶质细胞Cyclin D1表达增强,提示Cyclin D1可能参与脑缺血后星形胶质细胞的活化增殖。
- 席青松朱丽霞王萍王晶陈华先王芳张琼王伟
- 关键词：CYCLIND1CYCLIN脑缺血星形胶质细胞
- 脑缺血后大鼠神经元和星形胶质细胞p15^(ink4b)表达的差异研究
- 2006年
- 目的:比较研究大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p15ink4b在神经元和星形胶质细胞的表达。方法:建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型,应用流式细胞术检测各组MCAO再灌注后不同时期神经元和星形胶质细胞中的p15ink4b的表达。结果:缺血侧皮质区星形胶质细胞中的p15ink4b的表达在再灌注3d后开始下调,14d显著下调,与假手术组比较有显著性差异(P<0.05);缺血侧皮质神经元中的p15ink4b在再灌注14d后表达下调,与假手术组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:局灶性脑缺血再灌注损伤后,缺血侧皮质区星形胶质细胞和神经元均有p15ink4b不同程度的表达下调,星形胶质细胞中的p15ink4b表达下调比神经元更为显著。
- 陈华先王萍朱舟朱丽霞谢翠红喻志源王伟
- 关键词：细胞周期流式细胞术
- 大鼠硫酸软骨素蛋白多糖基因shRNA慢病毒载体的构建及干扰效率鉴定
- 2011年
- 背景:最近研究发现硫酸软骨素蛋白多糖(NG2)在中枢神经系统中参与多种生理病理功能,慢病毒载体可感染分裂期细胞或非分裂期的细胞,并能在细胞内高效稳定的表达。目的:构建大鼠源性NG2基因shRNA慢病毒载体并检测其干扰效率。方法:选择大鼠NG2基因RNA干扰的靶序列,合成OligoDNA,退火形成双链DNA,与HpaⅠ和XhoⅠ双酶切后的pFU-GW-RNAi载体连接产生pLV-NG2-RNAi,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。将重组载体与pHelper1.0载体、pHelper2.0载体通过lipofectamineTM2000共转染293T细胞包装产生慢病毒LV-NG2-RNAi,收集病毒上清并浓缩。采用孔稀释滴度测定法计算病毒滴度。将LV-NG2-RNAi慢病毒感染C6细胞,于感染后96h提取细胞总蛋白,采用Westernblot检测NG2的表达。结果与结论:经PCR和测序证实构建片段大小及DNA序列与目的序列一致,实验成功构建大鼠NG2基因shRNA慢病毒载体LV-NG2-RNAi。包装浓缩慢病毒的滴度为8×1011TU/L。Westernblot检测显示在感染复数为50时,感染LV-NG2-RNAi慢病毒的C6细胞较感染对照慢病毒及未感染细胞NG2的表达明显降低,干扰效率可达100%(P<0.05)。结果证实了实验成功构建大鼠NG2基因shRNA慢病毒载体,且该载体能够在细胞水平有效沉默靶基因。
- 王萍刘成方岩杨凯田学愎田玉科
- 关键词：硫酸软骨素蛋白多糖RNA干扰慢病毒细胞
- 大鼠脑缺血再灌注后神经细胞的细胞周期特征的比较研究被引量：5
- 2006年
- 目的比较观察大鼠局灶性脑缺血后星形胶质细胞和神经元细胞周期的变化特征。方法采用线栓法大鼠大脑中动脉栓塞模型,利用流式细胞技术检测假手术组和缺血再灌注后不同时间点各组大脑皮层和海马中星形胶质细胞和神经元细胞周期的异常激活和动态变化。结果缺血后大脑皮层中神经元24h时即发生明显细胞周期变化,而3d时进入细胞周期的星形胶质细胞才明显增加;海马中星形胶质细胞却先于神经元进入细胞周期,于24h时细胞周期即发生明显变化,与假手术组比较有显著差异(P<0.01)。结论在不同脑区星形胶质细胞和神经元两者对缺血性脑损伤的敏感性互不相同,并且不同脑区的星形胶质细胞对缺血性脑损伤的敏感性也有不同,脑缺血后2种细胞均出现细胞周期的异常激活。
- 王萍王伟谢敏杰喻志源徐运兰张贵斌田代实谢大兴
- 关键词：细胞周期脑缺血流式细胞术
