王沙生
- 作品数：55 被引量：837H指数：17
- 供职机构：北京林业大学生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生理学更多>>
- 天山大黄发根培养物中蒽醌化合物的产生被引量：17
- 1998年
- 目的：探索用发根培养法生产植物次生代谢物的途径。方法：用发根农杆菌Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ９４０２所含Ｒｉ质粒遗传转化药用植物天山大黄以诱导发根用纸电泳法检测发根中冠瘿碱的存在；用高效液相色谱法测定发根中芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、大黄酚８甲醚等游离蒽醌化合物的含量。结果：诱导出了天山大黄发根，并建立了发根离体培养系；从发根中检测到甘露碱、农杆碱的存在；定量分析发现，天山大黄发根中含有多种蒽醌类成分，其中大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚８甲醚的含量分别高于原植物根中的含量。
- 常振战沈昕果德安鲁宽科王沙生郑俊华
- 关键词：蒽醌类
- 大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白的研究被引量：41
- 2001年
- 为了研究在大肠杆菌BL2 1(DE3)中重组蛋白的表达特点 ,探讨重组蛋白在大肠杆菌中表达时可溶性蛋白与包涵体出现的特点 ,从表达载体中表达了植物ACC合成酶 .经SDS PAGE电泳与双波长扫描分析 ,确定目的蛋白随表达时间、菌液密度的增加而增加 .但是其最佳表达时间为 2 5h ,菌液密度OD6 0 0 为 0 6 ,IPTG的最佳浓度为 0 6mmol L ,此时目的蛋白含量占全菌蛋白含量之比最高 .植物ACC合成酶在大肠杆菌中表达时以包涵体的形式存在 。
- 陆海吴薇曾庆银李义蒋湘宁王沙生
- 关键词：ACC合成酶SDS-PAGE包涵体重组蛋白
- 掌叶大黄发根及愈伤组织、悬浮细胞中蒽醌类成分的比较研究被引量：12
- 1998年
- 目的：比较Ｒｉ质粒转化的掌叶大黄发根与愈伤组织、悬浮细胞以及掌叶大黄生药中游离蒽醌成分的含量。方法：用发根农杆菌Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ９４０２野生型菌株感染掌叶大黄外植体以诱导发根，建立发根离体培养系，用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ鉴定发根；分别诱导掌叶大黄愈伤组织和悬浮细胞；用高效液相色谱法测定发根、愈伤组织、悬浮培养细胞以及掌叶大黄生药中芦荟大黄素等游离蒽醌化合物的质量含量。结果：从子叶柄上诱导出了发根，并建立了培养体系；Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果证明Ｒｉ质粒ＴＤＮＡ转移并整合到植物细胞基因组中；用叶片作外植体诱导出了愈伤组织；悬浮培养细胞用叶片、叶柄外植体诱导的愈伤经液体培养获得；掌叶大黄发根中各种游离蒽醌化合物含量普遍高于愈伤组织，但低于生药和悬浮培养细胞。结论：用掌叶大黄发根培养物生产蒽醌化合物是一条值得探索的新途径。
- 常振战沈昕果德安柳林王沙生郑俊华
- 关键词：发根愈伤组织蒽醌类
- 树木木材形成与材性改良及抗旱耐盐性提高机理与基因工程分子基础
- 蒋湘宁尹伟伦王沙生陈雪梅谷瑞升刘群录陆海申晓辉李悦张春晓赵艳玲杨雪萍胡垒
- 该研究为了成功克隆、构建和转化树木并对木材产量、品质和抗旱耐盐特性形成机理的相关基因和启动子进行了研究。研究并建立多种木本植物组织、悬浮细胞和体胚培养转基因体系；获得组织定位表达调控生长和材性的转基因的树木；建立了胡杨细...
- 关键词：
- 关键词：木材形成分子机理
- HPLC法定量分析植物组织中ABA,IAA和NAA被引量：85
- 1992年
- 近年来有关植物激素的提取、分离方法的报道时有出现,但大都是沿用80％甲醇(MeOH)从植物组织中提取IAA和ABA,用乙酸乙酯萃取酸化的提取液后得到粗提液,粗提液再经过纤维素薄层层析、硅胶层析、
- 陈雪梅王沙生
- 关键词：高效液相色谱植物组织植物激素
- 胡杨对渗透胁迫和盐分胁迫的不同响应被引量：20
- 1998年
- 用等渗透势的ＮａＣｌ和ＰＥＧ溶液处理胡杨发现：（１）处理后１ｄ，－２４ｂａｒ渗透势的ＮａＣｌ胁迫使胡杨根ＡＢＡ含量上升为对照的２７倍，而ＰＥＧ处理没有影响．处理后７ｄ，－２４ｂａｒ渗透势的ＮａＣｌ胁迫的胡杨叶腐胺含量是群众杨的３３倍，渗透势胁迫加强到－９６ｂａｒ时腐胺含量扩大到４４倍．说明ＮａＣｌ胁迫由渗透胁迫和专性离子胁迫两部分构成，两者有加合性．这一方面进一步说明在这种情况下ＡＢＡ的增加基本上归咎于专性离子胁迫，另一方面暗示胡杨根系能感知环境中低浓度的专性离子而增加ＡＢＡ合成，ＡＢＡ是前胁迫反应产生的化学信号，作为一种调控剂诱导植株各部分进行代谢调节．
- 马焕成王沙生
- 关键词：脱落酸多胺脯氨酸盐分胁迫渗透胁迫
- 菠菜胆碱单氧化酶(CMO)基因的克隆及在大肠杆菌中的诱导表达被引量：10
- 2003年
- 甘氨酸甜菜碱是一种非毒性的渗透调节物质 ,在植物体内是以胆碱为底物 ,经两步氧化而合成的 .菠菜中 ,催化第一步反应的酶为胆碱单氧化酶 (CholineMonooxygenase ,CMO) .为了研究胆碱单氧化酶基因的功能以及转基因植物的抗逆能力 ,在 30 0mmol L高盐浓度 (n(NaCl)∶n(CaCl2 ) =5 7∶1)的条件下 ,作者分离纯化了菠菜mRNA ,经RT PCR得到全长 (1.3kb)胆碱单氧化酶 (CMO)cDNA ,与已经报道的基因序列相比较 ,同源性为 99% .根据其核苷酸序列推导得到了氨基酸序列 .将PCR纯化产物与pET 30a+ 连接 ,构建了重组表达载体pETCMO ,并转化到大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导获得高效表达 .
- 申晓辉陆海王沙生蒋湘宁Yill Sung ParkM.K.Mahedrappa
- 关键词：菠菜CMO基因克隆甘氨酸甜菜碱抗逆性
- 胡杨悬浮细胞的生长及液泡膜微囊的制备被引量：6
- 2003年
- 改进了胡杨细胞悬浮培养体系,细胞得率提高了3倍多。做出了胡杨悬浮细胞的生长曲线,以培养12～15d为宜。摸索了胡杨细胞破壁技术,使用了研磨、超声、捣碎、FrenchPress法。从蛋白产率、V H+ATPase活力、反应潜势三个方面考虑选用捣碎法,结合差速离心和蔗糖密度梯度分离纯化液泡膜微囊,完善了从胡杨细胞分离纯化液泡膜微囊的试验流程,从而使液泡膜H+ATPase的研究成为可能。
- 马挺军白根本向远寅王沙生
- 关键词：悬浮细胞液泡膜
- 盐胁迫下胡杨细胞的离子区隔化作用和液泡膜ATPase的活性
- ＜正＞液泡是植物细胞内体积最大的细胞器,在植物的生命活动中具有重要的生理作用。首先它具有贮存功能,即可以存贮一些中间代谢物,又可以存贮钙离子等信号物质,所以液泡是CAM途径和信号传递中重要的一环。另外液泡还具有调节细胞渗...
- 刘群录张旭家王沙生黄有国蒋湘宁
- 关键词：盐胁迫
- 文献传递
- 活体叶绿素荧光诱导曲线的原理和应用被引量：10
- 1989年
- 叶绿素荧光是研究光合作用能量传递的重要手段。自从30年代初期Kautsky首次观察到活体叶绿素荧光诱导现象后,有关这方面工作已有不少报道。
- 王沙生沈应柏
- 关键词：叶绿素荧光
