王晓明
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种制备组蛋白质谱分析样品的新方法
- 2013年
- 目的:质谱技术已经广泛应用于分析组蛋白的翻译后修饰。传统的样品制备是将酸提取的组蛋白混合物在溶液中酰基化并胰酶酶解,不但操作过程复杂,而且难以解释鉴定肽段的最终归属,因此有必要对其进行改进。方法:首先对组蛋白纯化试剂盒提取的组蛋白H3/H4组分进行高效液相色谱分离,然后对纯化的的单个H3.1和H4进行胶内丙酰化衍生和胰酶消化,最后将制备的样品进行质谱分析和数据库检索。结果:鉴定到的组蛋白肽段数目至少提高60%且修饰种类和位点都有不同程度的提高。结论:建立了一种简便有效的基于高效液相色谱纯化和胶内丙酰化衍生的制备组蛋白质谱分析样品的新方法。
- 赵志强邱辉华薛鹏陈永峰王晓明杨福全
- 关键词：组蛋白翻译后修饰HPLC质谱
- EGF联合HGF诱导BMSCs向神经元样细胞分化被引量：2
- 2013年
- 目的:通过观察HGF在诱导BMSCs向神经元样细胞分化过程中的作用,尝试寻找一种高效的诱导BMSCs分化途径。方法:从成年大鼠股骨内获取骨髓,分离BMSCs,细胞培养并鉴定,然后加入不同的诱导因子诱导BMSCs分化,利用免疫荧光染色技术、RT-PCR技术及免疫印迹技术检测BMSCs向神经元样细胞的分化情况。结果:形态学观察及流式细胞检测技术结果显示成功的获得了BMSCs,加入诱导因子HGF或EGF联合HGF后,RT-PCR检测结果及免疫印迹检测结果均显示,BMSCs可向神经元样细胞分化。结论:EGF联合HGF可诱导BMSCs向神经元样细胞分化。
- 陈洁沈如娣王璐楠颜烯烯罗振王晓明
- 关键词：EGFHGFBMSCSGFAP
- 抑癌基因WWOX对Lewis肺癌细胞c-jun蛋白表达及其转录活性的影响被引量：3
- 2009年
- 目的研究抑癌基因WWOX对Lewis肺癌细胞c-jun蛋白表达及其转录活性的影响,探讨WWOX基因的抑癌机制。方法采用脂质体转染法将WWOX基因重组真核表达质粒转染Lewis肺癌细胞,RT-PCR和Western blot法检测WWOX基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平;免疫组化法检测WWOX基因转染后Lewis细胞中c-jun蛋白的表达水平;半定量RT-PCR法检测c-jun调控的4种肿瘤相关基因p21、cyclinD1、FasL及VEGF mRNA的转录水平。结果重组真核表达质粒pcDNA4.0/Myc-His-WWOX转染Lewis细胞后,WWOX基因在mRNA和蛋白水平上均得到表达;与未转染细胞和空载体转染细胞相比,WWOX基因转染细胞胞浆中c-jun蛋白的表达量升高,而细胞核中c-jun蛋白的表达量未见明显差异;p21基因mRNA的转录水平升高,cyclinD1、FasL和VEGF基因mRNA的转录水平降低。结论WWOX基因可在Lewis细胞中表达,其转染Lewis肺癌细胞后,不直接调控c-jun蛋白的表达量,但可影响其转录活性。
- 杨巍王晓明
- 关键词：抑癌基因WWOXC-JUN蛋白表达转录活性
- NGF及其受体TrkA和p75在发情周期内Wistar大鼠卵巢内的表达被引量：1
- 2012年
- 目的检测NGF及其受体TrkA和p75在发情周期内Wistar大鼠卵巢内的表达。方法利用免疫组织化学染色技术检测NGF及其受体TrkA和p75在卵巢内的细胞定位及蛋白表达情况;利用原位杂交方法检测在发情周期内大鼠卵巢NGF及其受体TrkA和p75的mRNA表达情况;利用Western blot技术检测发情周期内大鼠卵巢NGF及其受体TrkA和p75的蛋白表达情况。结果 免疫组织化学染色结果显示发情周期内大鼠卵巢内NGF及其受体的表达,在各级卵泡的卵泡细胞、卵母细胞以及黄体内均有不同水平的表达;同时间点的原位杂交检测结果与免疫组织化学染色结果相一致;Western blot检测结果显示整个发情周期内卵巢内的NGF及其受体TrkA和p75的蛋白表达没有明显的波动。结论NGF及其受体TrkA和p75可促进发情周期内Wistar大鼠卵巢卵泡的卵泡细胞及卵母细胞的发育。
- 王晓明白石丁军
- 关键词：卵巢NGFTRKAP75
- 蛋白酶抑制剂MG132在联合NGF诱导PC12细胞分化过程中的作用及机制
- 2011年
- 神经细胞突起的形成是神经系统发育的一个重要过程,这个过程主要受神经营养因子（neurotrophic cytokine）,如神经生长因子（nerve growth factor,NGF）的调控。NGF可诱导神经细胞长出突起,其机制是通过活化其特异性受体,酪氨酸激酶受体A（tyrosine kinase receptor,TrkA）,使其磷酸化,
- 王晓明卢伟丁军
- 关键词：PC12细胞NGFMG132分化过程神经系统发育酪氨酸激酶受体
- 微电流脉冲体外诱导神经干细胞增殖分化的研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨微电流脉冲对神经干细胞体外增殖分化的诱导作用。方法采用联合培养和微电流脉冲技术改变神经干细胞生长的微环境,通过免疫细胞化学技术及电子显微镜技术观察神经干细胞增殖分化情况。结果骨骼肌成肌细胞及微电流脉冲均可诱导神经干细胞分化(细胞ChAT阳性率分别为5.90%和6.48%),与神经干细胞自然分化组相比差异显著(细胞ChAT阳性率为4.03%)。结论微电流脉冲对神经干细胞的体外增殖分化具有一定的诱导作用。
- 杨巍王晓明
- 关键词：神经干细胞成肌细胞细胞培养
- SD胎鼠脑内WWOX表达与神经干细胞及神经元发育相关性初探被引量：3
- 2010年
- 目的探讨胚胎期SD胎鼠脑内WWOX表达与神经干细胞及神经元的发育的相关性。方法通过免疫组织化学染色、尼氏染色及Western blot等方法,检测不同发育时段胎鼠脑内WWOX的表达及神经干细胞和神经元的发育特点。结果尼氏染色及免疫组织化学染色结果显示,E11-E13胎鼠脑发育仍处于神经管阶段,神经管上皮组成细胞多为神经干细胞及神经元前体细胞,WWOX表达呈下降趋势;E15天后,神经干细胞多已分化成神经元及神经胶质细胞等,神经干细胞迅速减少,神经元及神经胶质细胞等细胞成分在脑内迅速发育、增多,此期在SD胎鼠脑内新生的神经胶质细胞及脉络组织中的WWOX表达呈缓慢上升趋势,并维持至成年。结论在胎鼠脑发育过程中WWOX与神经干细胞的分化存在一定的相关性,但与神经元的发育没有直接的相关性。
- 杨巍王晓明
- 关键词：WWOX神经干细胞神经胶质细胞
