王双双
- 作品数:6 被引量:24H指数:2
- 供职机构:山东农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山东省农业良种工程项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 黄瓜液泡膜H^+-PPase基因CuPPase的cDNA克隆、序列分析与表达被引量:5
- 2010年
- 利用GenBank登录的植物液泡膜焦磷酸酶氨基酸保守区序列设计简并引物,利用RT-PCR和RACE-PCR技术从黄瓜叶片中获得了一个液泡膜H+-PPase基因,命名为CuPPase,GenBank注册号为GQ223786。CuPPase蛋白与南瓜、绿豆同源性最高,分别为94%,92%。生物信息学分析表明,该基因全长2650bp,开放阅读框(ORF)2307bp,编码768个氨基酸;CuPPase蛋白大小约80kD,理论pI值为5.32。该基因有14个强的跨膜螺旋结构,PlantCare分析结果显示该基因序列具有脱落酸诱导、生长素诱导、赤霉素诱导、水杨酸诱导、低温诱导、干旱诱导的顺式作用元件。RT-PCR表明,CuPPase在叶和根中表达较高,茎中表达较低。CuPPas表达受盐胁迫以及高温、低温胁迫诱导,但与处理时间有密切关系,其表达均表现先升高后降低的趋势。
- 洪艳艳史庆华王秀峰窦宏伟王双双刘泽洲
- 关键词:黄瓜CDNA克隆
- 植物mRNA前体剪切位点的大规模检测及应用平台构建
- 转录过程产生的信使 RAN前体的剪切作用在基因表达过程中扮演着至关重要的角色,因此,对剪切作用的研究具有非常重要的意义。在已测序物种中,从21个植物物种的基因组注释文件中提取了3,199,967个剪切位点。随着测序技术的...
- 王双双
- 关键词:信使RNA剪切位点测序技术
- 拟南芥AtmiR399f基因在番茄中异位表达对低磷耐性及外观形态的影响被引量:1
- 2015年
- 为了研究miR399过量表达的番茄对低磷胁迫的响应,将拟南芥AtmiR399f基因转入番茄中,获得超表达量不同的2个株系,探讨转基因番茄外观形态表现以及耐低磷的可能机制。构建植物表达载体pBI121-AtmiR399f,用农杆菌介导法将拟南芥AtmiR399f基因转化到番茄体内,用茎环半定量RT-PCR法进一步确定2株不同表达水平的转AtmiR399f基因番茄株系,以此为试验材料,用茎环反转录实时荧光定量PCR检测miR399的表达量,用不同浓度磷处理株系,并且实时荧光定量PCR检测与磷运输有关的基因的表达量以及半定量RT-PCR检测与乙烯信号途径有关的基因的表达量。与野生型番茄株系相比,转基因番茄产生更多的侧根及次级侧根,且种子更大、茎秆更粗壮,对低磷逆境环境耐性更强。另外,磷运输相关基因LePT1没变化,乙烯合成途径中pTOM13基因和ACS基因表达量也升高。异位表达AtmiR399f基因的转基因番茄株系miR399表达量增高,对低磷耐性增强,miR399是通过调控乙烯合成途径来影响植物对磷的吸收。
- 赵先炎刘泽洲王双双陈可钦郝玉金由春香
- 关键词:番茄磷MIRNAS
- 利用反向遗传学策略筛选苹果矮化无融合生殖砧木
- 砧木对控制树体长势、增强抗逆/病能力和扩大品种栽种范围等具有重要意义,目前苹果栽培多用野生资源的种子实生苗或优选的矮化无性系作砧木,但实生苗的高度遗传分离和无性系的低繁殖效率等给生产造成很大不便,无融合生殖矮化砧木可以很...
- 沙广利孙超王双双郝玉金
- 关键词:苹果无融合生殖DELLA蛋白矮化砧木
- 文献传递
- MhGAI2基因在番茄中的异位表达分析
- 赤霉素(gibberellic acid,GA)调控植物生长发育的各个方面,包括种子萌发、下胚轴伸长、叶片生长和开花等。DELLA蛋白的N端具有高度保守的DELLA结构域,该结构域在GA信号诱导的DELLA蛋白降解过程中...
- 王双双
- 关键词:GADELLA蛋白
- 苹果MdFT基因对番茄的遗传转化被引量:18
- 2009年
- 通过RT-PCR扩增,从苹果叶片cDNA中克隆了FT基因的同源基因MdFT,构建了花椰菜病毒35S启动子驱动的MdFT植物表达载体35S::MdFT,并利用根癌农杆菌介导法将其导入番茄栽培品种‘中蔬四号’;同时转化拟南芥AtFT基因作为阳性对照。从添加卡那霉素的筛选培养基上再生了抗性植株,PCR扩增证明,外源基因MdFT和AtFT已经整合到转基因番茄的基因组,半定量RT-PCR则证明它们已经在转基因番茄中得到异位过量表达。形态鉴定发现,转基因番茄植株比非转基因对照植株开花早,表明成功地从苹果中克隆了成花素基因MdFT,该基因具有通过转基因缩短苹果树童期的潜在价值。
- 李伟明王双双姚玉新赵长增郝玉金由春香
- 关键词:苹果番茄