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人胰腺癌hedgehog信号转导途径中PTCH基因的克隆与鉴定: 2006年; 目的克隆人胰腺癌hedgehog信号通路中PTCH基因,构建PTCH基因表达载体并诱导融合蛋白表达。方法从人胰腺癌细胞株SW1990抽提总RNA,经RT-PCR扩增出PTCH基因,经纯化、回收目的基因PTCH,将其插入表达载体PET22b,转化E.coliBL21-CodonPlusTM-RP,构建重组质粒PET22b/PTCH,IPTG诱导表达融合蛋白,免疫印迹进行鉴定。结果从人胰腺癌细胞株SW1990克隆出长为789 bp PTCH目的片段,成功构建重组质粒PET22b/PTCH,并诱导表达目的蛋白。结论构建重组质粒PET22b/PTCH,并表达PTCH融合蛋白,为制备PTCH多克隆抗体打下良好基础。; 邵建国李兆申屠振兴高军龚燕芳许爱芳满小华金晶; 关键词：基因克隆融合蛋白

十二指肠NaCl刺激对大鼠孤束核c-fos表达的影响: 2005年; 目的:探讨生理状态下,大鼠十二指肠受到不同浓度氯化钠刺激后,孤束核(NTS)中神经元的活动性。方法:在大鼠十二指肠内恒流灌注0.86 mol/L NaCl、0.15 mol/L NaCl、去离子水以及10-4mol/L 5-HT,然后对各处理组中不同的NTS部位进行c-fos免疫组化,并作定量分析。结果:0.86 mol/L NaCl以及5-HT组可以引起NTS各平面c-fos阳性神经元数量的增加,而且明显高于0.1 5 mol/L NaCl组、去离子水组以及假手术组。结论:在大鼠十二指肠给予0.86 mol/L NaCl,可以经迷走神经通路上传到NTS,由NTS整合内脏信息上传至更高一级中枢;而给予0.15 mol/L NaCl和去离子水,则不能激活NTS内的内脏感觉神经元。; 夏青李兆申屠振兴龚燕芳满小华; 关键词：十二指肠氯化钠孤束核 C-FOS 感觉神经元

胰腺癌组织中PTCH蛋白免疫组化检测被引量：7: 2005年; 目的:分析胰腺癌组织中Hedgehog信号转导通路的PTCH分子异常表达情况及其临床意义。方法:收集20例手术切除的胰腺癌及癌旁胰腺组织石蜡标本,利用EnVision免疫组化法分别检测癌组织和癌旁胰腺组织PTCH的表达情况,并统计分析其阳性率与肿瘤大小、分化程度及转移的相关性。结果:20例胰腺癌中PTCH阳性表达11例(55%),20例癌旁胰腺组织中无阳性表达病例;PTCH阳性率与肿瘤分化程度呈正相关(P<0.05),与肿瘤的大小、淋巴及远处转移无关。结论:PTCH异常表达与胰腺癌分化程度显著相关,高分化肿瘤组织中其表达率较高,检测其表达有助于胰腺癌的诊断。; 邵建国许国铭屠振兴高军龚燕芳许爱芳满小华吴红玉金晶; 关键词：胰腺肿瘤 PTCH

溃疡性结肠炎患者血清细胞因子的变化: ＜正＞目的:测定血清中几种细胞因子的含量,并分析这些细胞因子与溃疡性结肠炎病变范围、病变程度和复发与否的关系。方法:收集2001年5月-2001年11月在我院就诊经内镜证实的溃疡性结肠炎患者的血清,储存于-70℃的深低温...; 张文俊李兆申许国铭龚燕芳屠振兴满小华; 文献传递

基因重组溶瘤腺病毒与无水乙醇瘤内注射联合化疗治疗胰腺癌的对比实验研究被引量：1: 2013年; 目的比较瘤内注射删除ElB基因的重组溶瘤腺病毒与无水乙醇消融两种方法联合吉西他滨化疗治疗裸鼠原位种植胰腺癌的有效性和安全性。方法构建裸鼠胰腺原位种植瘤模型并将造模成功的54只裸鼠随机数字表法分为6组，其中4组分别给予瘤内注射溶瘤腺病毒、无水乙醇、联合或不联合吉西他滨静脉化疗，另2组一组给予化疗并瘤内注射生理盐水，一组瘤内注射生理盐水对照，4周后处死裸鼠并观察各组瘤体生长、转移情况，间接免疫荧光观察肿瘤及正常组织中病毒分布情况，TUNEL法观察肿瘤细胞凋亡情况，电镜观察注射病毒后肿瘤细胞内结构的变化。结果注射无水乙醇组3只裸鼠于注射后48h内死亡，死亡率16．7％，注射溶瘤病毒组均存活。注射病毒联合化疗组肿瘤体积增长明显小于对照组和单纯化疗组（P值分别为0．008和0．040），注射无水乙醇联合化疗组亦有同样变化（P值分别为0．000和0．006），同时单纯瘤内注射无水乙醇组肿瘤体积增长也明显小于对照和单纯化疗组（P值分别为0．012和0．041）。间接免疫荧光表明注射后溶瘤病毒除肿瘤组织外在其余组织中无明显分布。TUNEL法检测表明各组问凋亡率存在显著差异（P=0．021），其中注射溶瘤病毒联合化疗组的凋亡率为（83．2±35．7）％远高于其余各组。电镜观察见病毒注射后肿瘤细胞内部出现趋向凋亡变化。结论溶瘤病毒瘤内注射对于加强吉西他滨的抗肿瘤作用是有益的，这种作用没有无水乙醇瘤内注射那么明显，但在安全性上是高于无水乙醇的。同时，该溶瘤病毒具有较明显的嗜肿瘤特性，瘤内注射对其它组织影响极小，是安全的。另外，溶瘤病毒抗肿瘤的效应可能还存在诱导凋亡等其它途径。; 肖斌杜亦奇满小华江静娴龚燕芳金震东李兆申; 关键词：溶瘤病毒胰腺肿瘤

人胰腺癌Hedgehog信号通路中膜蛋白受体PTCH的纯化: 2006年; 目的构建人胰腺癌PTCH基因表达载体并诱导融合蛋白表达。方法从人胰腺癌细胞株SW1990抽提总RNA,经RT-PCR扩增出PTCH基因,经纯化、回收目的基因PTCH,将其插入表达载体pET22b,转化E.ColiBL21-CodonPlus(TM)-RP,构建重组质粒pET22b/PTCH,IPTG诱导表达融合蛋白,免疫印迹进行鉴定,Ni-螯合亲和层析纯化融合蛋白。结果从人胰腺癌细胞株SW1990克隆出长为789bpPTCH目的片段,成功构建重组质粒pET22b/PTCH,并诱导表达目的蛋白;经Ni-螯合亲和层析得到纯化的融合蛋白。结论成功构建了重组质粒pET22b/PTCH,并获得纯化的融合蛋白,为进一步研究Hedgehog信号通路在胰腺癌中的发病机制提供了有效工具。; 邵建国许国铭屠振兴高军龚燕芳许爱芳满小华吴红玉金晶; 关键词：HEDGEHOG PTCH基因

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满小华

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