滕菲
- 作品数：17 被引量：81H指数：5
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- 黄芩苷对小鼠T淋巴细胞体外增殖和细胞周期的影响被引量：22
- 2009年
- 目的:分析黄芩苷(BA)对小鼠T淋巴细胞体外增殖和细胞周期的影响,探讨其免疫抑制作用的机制。方法:无菌分离小鼠淋巴结,制备淋巴细胞悬液,以羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰脂(CFDA-SE)染色,不同终浓度的BA预孵育4h,加入刀豆蛋白(ConA)或佛波醇酯类多克隆刺激剂PDB和离子霉素Ion进行刺激,以流式细胞术(FCM)结合荧光抗体染色技术检测黄芩苷对CD3+T细胞增殖率的影响;以碘化丙锭(PI)染色结合FCM分析其细胞周期分布。结果:BA(10、15、20、25mg/L)对ConA或PDB和Ion诱导的小鼠CD3+T细胞增殖均有明显的抑制作用(P<0.05),且呈浓度依赖性。对细胞周期分析表明,BA能使ConA或PDB和Ion刺激的小鼠淋巴细胞停滞于G0/G1期、S期,阻止其进入G2/M期,阻止作用随浓度的增加而增强。结论:BA对ConA或PDB和Ion诱导的小鼠CD3+T细胞增殖有明显抑制作用,能够将淋巴细胞阻滞在G0/G1期和S期,表现出明显的周期特异性。本研究提示黄芩苷有发展成免疫抑制剂的潜力。
- 李林曾耀英黄秀艳宋兵杨志滕菲姚满林
- 关键词：黄芩苷T细胞细胞增殖细胞周期
- 米诺环素对PDB刺激的小鼠淋巴细胞体外活化和增殖的影响被引量：1
- 2008年
- 为了分析米诺环素(MNC)对小鼠淋巴细胞体外活化和增殖的影响,探讨其免疫抑制作用机制.我们通过分离小鼠淋巴结细胞,以佛波醇酯(PDB)刺激,用不同终浓度的MNC与淋巴细胞共培养,荧光抗体染色结合流式细胞术,检测淋巴细胞早期和中期活化抗原CD69与CD25的表达;以CFSE染色,加入多克隆刺激剂佛波醇酯(PDB)和离子霉素(Ion)进行刺激,以流式细胞仪分析MNC对淋巴细胞增殖的影响;结果,荧光抗体染色显示MNC能显著抑制PDB诱导的T细胞CD69和CD25的表达;CFSE染色结果显示,MNC对佛波醇酯(PDB)和离子霉素(Ion)诱导48 h的小鼠淋巴细胞增殖,具有明显的抑制作用(P<0.05),且呈剂量依赖性.从而我们认为MNC对小鼠淋巴细胞的体外活化和增殖具有明显的抑制作用.具有独立于其抗菌活性的抗炎作用.
- 姚满林曾耀英黄秀艳宋兵李林杨志滕菲
- 关键词：米诺环素流式细胞术T细胞活化
- 淫羊藿甙对小鼠腹腔巨噬细胞体外增殖、吞噬和产生NO的影响被引量：18
- 2008年
- 无菌分离小鼠腹腔巨噬细胞,制备单细胞悬液,加入不同终浓度的淫羊藿甙孵育4 h后,加入细菌脂多糖LPS(终浓度20 mg/L)48 h后以MTT法检测其增殖;加药孵育4 h后,分别加入直径1μm和2μm的微球(终浓度1×1010/L),5 h后利用流式细胞术(FCM)检测吞噬情况;加入LPS(终浓度20 mg/L)24 h后Griess试剂盒检测巨噬细胞NO的量。结果显示ICA在终浓度1.5、3.0μmol/L时能明显抑制LPS刺激的巨噬细胞增殖(P<0.01)和NO的产生,并促进其吞噬微球的功能。提示ICA可能抑制LPS信号转导从而抑制巨噬细胞增殖,并且通过抑制其活化,下调iNOS有关的炎症因子,使NO减少;对于未活化的巨噬细胞,ICA可能通过上调其吞噬功能,增强固有免疫系统来抵御病原体侵入。
- 滕菲曾耀英黄秀艳杨志姚满林宋兵李林
- 关键词：淫羊藿甙巨噬细胞增殖NO
- 红车轴草提取物对小鼠T淋巴细胞体外活化的抑制作用被引量：1
- 2008年
- 探讨红车轴草提取物(Trifolium pratense Leguminosae extract,TLE)对小鼠T淋巴细胞的体外活化的影响。无菌条件下制备小鼠淋巴细胞悬液;双色荧光抗体染色结合流式细胞术分别分析TLE对小鼠T淋巴细胞在刀豆蛋白A(ConA)或佛波醇酯(PDB)刺激下的体外分化抗原CD69、CD25、CD71表达的影响。终质量浓度为20、30、40 mg/L的TLE对小鼠T淋巴细胞在ConA或PDB刺激下的体外分化抗原CD69、CD25、CD71表达具有明显的抑制作用(P<0.01)。TLE对ConA或PDB刺激的不同时期的小鼠T淋巴细胞的体外活化具有明显的抑制作用。
- 杨志曾耀英黄秀艳李林姚满林宋兵滕菲
- 关键词：红车轴草提取物CD69CD25CD71
- Forskolin对小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖的影响被引量：2
- 2009年
- 通过研究Forskolin对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠体外CD3+T淋巴细胞活化、细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10和TNF-α及增殖的影响,初步探讨其免疫调节作用机制。无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,与不同浓度的Forskolin孵育,用流式细胞术结合双色荧光抗体染色技术来检测CD3+T细胞中期、晚期活化标志CD25、CD71的表达水平;LuminexTM100检测晚期活化淋巴细胞培养上清中5种细胞因子的变化;羧基荧光素已酰已酸(CFDA-SE)染色技术结合流式细胞术和CELLQuest、ModFitLT软件,分析CD3+T细胞增殖情况。结果显示,终浓度为10-7、10-6、10-5mol/L的Forskolin均能降低CD3+T细胞中CD25、CD71的表达水平和平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI),还能抑制IL-10、IL-2、TNF-α的产生和淋巴细胞的增殖,但能促进IFN-γ的产生,对IL-4的影响却不大。表明Forskolin在一定浓度范围内通过改变T淋巴细胞细胞因子的表达水平,进而抑制T淋巴细胞的活化和增殖,发挥免疫抑制作用。
- 宋兵曾耀英黄秀艳李林滕菲杨志姚满林
- 关键词：FORSKOLIN活化细胞因子增殖
- 双黄连粉针剂对小鼠T淋巴细胞体外活化与增殖的影响被引量：5
- 2008年
- 目的:探讨双黄连粉针剂(以下简称SHL)对小鼠T淋巴细胞的体外活化和增殖的影响。方法:MTT法检测SHL对小鼠淋巴细胞的毒副作用;双色荧光抗体染色技术结合流式细胞术分析SHL对小鼠T淋巴细胞在多克隆刺激剂(ConA)刺激下体外活化抗原CD69表达的影响;MTT法以及羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)标记技术结合流式细胞术分析SHL对小鼠T淋巴细胞在ConA诱导下体外增殖的影响。结果:SHL对小鼠淋巴结来源的淋巴细胞毒副作用非常小;终质量浓度为60、80、100、120mg/L的SHL对ConA刺激下的T淋巴细胞体外活化抗原CD69表达具有抑制作用(P<0.01);MTT法和CFDA-SE染色法都显示,终质量浓度为60、80、100、120mg/L的SHL对ConA诱导的T淋巴细胞增殖作用具有明显的抑制作用(P<0.01)。结论:SHL对小鼠T淋巴细胞的体外活化和增殖具有明显的抑制作用。
- 杨志曾耀英黄秀艳滕菲李林宋兵姚满林
- 关键词：双黄连粉针剂T淋巴细胞体外活化增殖
- 淫羊藿提取物对小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖的影响被引量：1
- 2008年
- 目的研究淫羊藿水溶性提取物对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠T淋巴细胞体外早期活化和增殖的影响。方法无菌分离小鼠各部位淋巴结,制备单细胞悬液,加入不同终质量浓度(5、25、50mg/L)的淫羊藿提取物,以MTT法检测药物对T细胞活性的影响;利用流式细胞术(FCM)结合双色荧光抗体染色技术检测早期活化标志CD69分子的表达;运用流式细胞术结合活体染料CFDA-SE染色技术和荧光抗体染色技术检测T细胞增殖。结果MTT法检测淫羊藿提取物在50mg/L时细胞存活率达52.36%。ConA作用6h后,对照组CD69+表达率为(4.61±0.85)%,ConA组CD69+T细胞的比率上升至(38.30±2.54)%,淫羊藿提取物在终质量浓度5、25、50mg/L时均抑制ConA诱导的CD3+T淋巴细胞CD69的表达(P<0.01),其表达率分别下调为(36.16±2.14)%,(30.5±1.72)%,(15.99±0.87)%。培养48、72后,对照组增殖指数(PI)分别为1.01±0.01和1.05±0.01,ConA组PI分别达到1.42±0.01、2.32±0.01,淫羊藿提取物在终质量浓度5、25、50mg/L均抑制T淋巴细胞增殖(P<0.01),48h时PI分别为1.28±0.01、1.26±0.01、1.21±0.01;72h时PI分别为2.30±0.03、2.13±0.02、2.10±0.01。结论淫羊藿提取物能明显抑制ConA刺激的小鼠T淋巴细胞的早期活化和增殖,并呈剂量依赖性。
- 滕菲曾耀英黄秀艳杨志姚满林宋兵李林
- 关键词：淫羊藿提取物T淋巴细胞活化增殖
- 淫羊藿甙对小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖的影响被引量：5
- 2008年
- 目的研究淫羊藿甙(ICA)对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠T淋巴细胞体外早期活化和增殖的影响。方法以MTT法检测T细胞药物毒性;利用流式细胞术(FCM)结合双色荧光抗体染色技术检测早期活化标志CD69分子的表达;运用流式细胞术结合活体染料羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色技术和荧光抗体染色技术检测T细胞增殖。结果ICA在终浓度0.3、1.5、3.0μmol·L-1时对于CD69的表达以及淋巴细胞48和72h增殖,均有明显的抑制作用(P<0.01)。结论ICA能抑制ConA刺激的小鼠T淋巴细胞的早期活化和增殖,并呈剂量依赖性,即在最高浓度3.0μmol·L-1时抑制率最强。
- 滕菲曾耀英黄秀艳杨志姚满林宋兵李林
- 关键词：淫羊藿甙T淋巴细胞活化增殖流式细胞术
- 红车轴草提取物对小鼠淋巴细胞[Ca^(2+)]_i及腹腔巨噬细胞NO分泌和吞噬的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨红车轴草提取物(Trifoliumpratense Leguminosae extract,TLE)体外对小鼠淋巴细胞[Ca2+]i及腹腔巨噬细胞NO分泌和吞噬微球的影响。方法无菌条件下制备小鼠淋巴细胞悬液及小鼠腹腔巨噬细胞悬液;MTT法检测药物对细胞悬液的毒性情况;Fluo-4/AM染色结合流式细胞术分析TLE对小鼠淋巴细胞[Ca2+]i的影响;Griess反应系统检测TLE对脂多糖(LPS)刺激的小鼠腹腔巨噬细胞NO分泌的影响;1μm与2μm直径的荧光微球结合流式细胞术分析TLE对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用的影响。结果终质量浓度为20、40mg/L的TLE对细胞的毒性小;TLE促进了淋巴细胞的Ca2+内流;TLE抑制了巨噬细胞的NO分泌与吞噬作用,与非TLE组比较P<0.01。结论对淋巴细胞[Ca2+]i及巨噬细胞的NO分泌和吞噬的作用可能是TLE调节小鼠免疫系统的途径。
- 杨志黄秀艳曾耀英滕菲李林宋兵姚满林
- 关键词：红车轴草提取物淋巴细胞钙离子巨噬细胞
- 淫羊藿甙对小鼠同种异基因皮片移植的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:研究淫羊藿甙(ICA)对小鼠同种异基因皮片移植的影响。方法:试验分为腹腔注射生理盐水、ICA、环孢素A(CsA)以及CsA与ICA联用4组,5 d后将C57BL/C小鼠的背部皮片移植到BALB/c小鼠的相同位置,用眼科缝合线缝合,观察皮片愈合情况并记录皮片外观性状、排斥时间,于第11天取移植皮片做病理石蜡切片,取淋巴结细胞和脾细胞做增殖实验(CFDA-SE染色)。结果:CsA+ICA联用能够延长皮片排斥时间,使皮片愈合得更好,胸腺和脾脏指数均比单独CsA组高,切片显示浸润的炎症细胞也较少,其淋巴结细胞增殖能力明显降低。结论:CsA与ICA联合能抑制移植造成的免疫排斥反应,可能是通过抑制受体小鼠的反应性T细胞的活化增殖来降低细胞免疫反应。
- 滕菲曾耀英黄秀艳狄静芳杨志
- 关键词：淫羊藿甙皮片移植增殖流式细胞术
