梁巍
- 作品数：7 被引量：8H指数：2
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- 干扰CLC-2基因表达对人眼小梁细胞细胞周期进程的影响被引量：1
- 2010年
- 目的观察抑制CLC-2基因的表达对人眼小梁细胞细胞周期进程的影响。方法构建针对CLC-2的小干扰(siRNA)重组表达载体,脂质体LipofectamineTM2000介导转染人眼小梁细胞后,应用RT-PCR半定量检测小梁细胞CLC-2mRNA表达量的变化;流式细胞仪检测干扰CLC-2表达后,人眼小梁细胞细胞周期进程。结果与空载体组比较,重组载体组的CLC-2mRNA表达明显降低,且有效抑制小梁细胞由G0期到G1的转位。结论抑制CLC-2的表达可以干扰人眼小梁细胞正常细胞周期进程。
- 梁巍郑雅娟
- 关键词：小梁细胞RNAI
- 氯离子通道阻滞剂对人眼小梁细胞增生及凋亡的影响被引量：1
- 2012年
- 背景氯离子通道阻滞剂5-硝基-2-（3-苯丙胺）苯甲酸（NPPB）对家兔心肌细胞缺血-再灌注损伤时的细胞凋亡有促进作用，而小梁细胞上也存在C1C型氯离子通道及容积敏感性氯离子通道，但NPPB究竟会对小梁细胞的形态和功能产生什么影响尚不清楚。目的探讨氯离子通道阻滞剂NPPB对人眼小梁细胞增生及细胞周期、细胞凋亡的影响。方法将处于对数生长期的永生株人眼小梁细胞进行培养并以1×10^6个／ml的密度接种于96孔培养板，将不同浓度（10、50、100μmol／L）的NPPB分别加入小梁细胞培养基中，通过四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测各组小梁细胞的增生情况以吸光度（A）值表示；采用流式细胞术测定小梁细胞的细胞周期。将100mg／L5-氟尿嘧啶（5-Fu）加入培养的细胞中，而另-组培养的细胞中加入100mg／L5-FU＋100μmol／LNPPB，用AnnexinV—PI法检测各组小梁细胞的凋亡情况；罗丹明123法检测细胞线粒体膜电位（Adam），分别评估各浓度NPPB对培养的人小梁细胞生长和存活的影响。结果3种不同浓度的NPPB与小梁细胞共同孵育48h后4个组小梁细胞的增生率差异有统计学意义（F=7．230，P=0．006），50Izmol／L、100Fxmol／LNPPB作用后小梁细胞的A值明显低于10μmol／LNPPB组，50μmol／LNPPB组、100μmol／LNPPB组与空白对照组比较差异均有统计学意义（t=1．610，P=0．025；t=12．270，P=0．001）。小梁细胞培养基中加入NPPB48h后，G0／G1期的细胞比例增多，S期细胞比例减少，各细胞周期小梁细胞的比例与未加NPPB的组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。用5-FU作用24h及48h后，100mg／L5-Fu组和100mg／L5-FU＋100μmol／LNPPB组的细胞凋亡率均较其各自空白对照组增加（t24h=2．130，P=0．023；t48h=4．810，P=0．011）；100mg／L5-Fu＋100μmol／LNPPB组细胞凋亡率明显高于100mg／L5-Fu组，差异均有统计学意义（t
- 尹元郑雅娟王霁雪梁巍
- 关键词：小梁细胞凋亡增生
- 氯离子转运通道在人视网膜色素上皮细胞吞噬过程中的作用
- 2010年
- 目的:探讨丁脲胺或DNDS作用下视网膜色素上皮(RPE)细胞顶端膜和基底膜上氯离子转运通道对RPE吞噬功能的影响,阐明氯离子转运通道参与PRE吞噬作用的机制。方法:利用微孔滤膜培养系统体外培养极性化单层RPE细胞,以荧光包被的乳胶株作为吞噬标记物,建立RPE细胞吞噬模型,分别以1、5、10、50、100、500和1000μmol.L-1丁脲胺,以及0.01、0.10、0.50、1.00、3.00、5.00和10.00mmol.L-1DNDS作用RPE细胞6h后,应用流式细胞仪定量检测RPE细胞吞噬指数。结果:不同浓度丁脲胺作用于RPE细胞顶端膜或基底膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数与对照组比较差异无显著性(P>0.05);0.01和0.10μmol.L-1DNDS作用于RPE细胞基底膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数与对照组比较差异无显著性(P>0.05),而0.50、1.00、3.00、5.00、10.00mmol.L-1的DNDS作用于RPE细胞基底膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数降低(P<0.05或P<0.01),并随着浓度的增加,吞噬指数逐渐降低;但同样浓度的DNDS作用于RPE细胞顶端膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数无明显改变(P>0.05)。结论:顶端膜的丁脲胺敏感性Na+-K+-2Cl-协同转运载体不参与RPE吞噬乳胶株的过程,而基底膜的DNDS敏感性Cl-/HCO3-交换蛋白及氯离子通道在DNDS作用后,对人RPE细胞非特异性吞噬过程发挥抑制作用。
- 梁巍郑雅娟辛华
- 关键词：视网膜色素上皮细胞离子通道
- 氯离子通道2对压力应激状态下人眼小梁细胞功能的影响被引量：3
- 2012年
- 目的探讨分布于小梁细胞上的氯离子通道2(ClC-2)与小梁细胞数量及功能之间的关系,以进一步了解原发性开角型青光眼的形成机制。方法首先分别利用反转录聚合酶链反应、台盼蓝染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法检测不同压力,以及不同压力作用时间下小梁细胞ClC-2mRNA表达、小梁细胞活力及凋亡情况的变化;再利用RNAi技术抑制ClC-2mRNA的表达,观察一定压力及作用时间下小梁细胞活力、凋亡情况的变化。结果与0mm Hg(1mm Hg=0.133kPa)、20mm Hg相比,30mmHg及40mm Hg时,随压力作用时间的增加,ClC-2mRNA的表达明显增高,差异有统计学意义;表达最高点为24h;60mm Hg时,各时间点下ClC-2mRNA的表达较30mm Hg、40mm Hg时明显降低,差异有统计学意义,且随时间延长,ClC-2mRNA的表达逐渐下降。当40mm Hg及60mm Hg的压力持续作用一段时间后,小梁细胞活力明显降低,凋亡指数明显增加,差异有统计学意义。抑制ClC-2mRNA表达后,压力应激状态下小梁细胞活力下降及凋亡增加更显著,差异有统计学意义。结论压力应激条件下,ClC-2表达的变化与小梁细胞的活力及凋亡有一定的相关性,提示ClC-2对小梁细胞存在保护作用。
- 梁巍郑文旭孙丽霞郑雅娟
- 关键词：小梁细胞眼压原发性开角型青光眼
- 闭角型青光眼滤过术后浅前房与术前睫状体脱离及眼压关系的研究被引量：3
- 2010年
- 目的探讨闭角型青光眼患者滤过术后浅前房、术前睫状体脱离与眼压的关系。方法回顾分析2007年6月至2008年12月在我院住院的457例(472眼)原发性青光眼患者,入院时行UBM及眼压检查,将术前发生睫状体脱离且需行滤过手术的闭角型青光眼患者共22例(26眼)列为A组,随机选取30例(32眼)非睫状体脱离且行滤过手术的闭角型青光眼患者为B组,将A、B2组合并,根据术后是否发生浅前房分为浅前房组(C组)和非浅前房组(D组)。分析闭角型青光眼患者滤过术后浅前房、术前睫状体脱离与眼压的关系。结果 A、B2组患者所有检测指标差异均无统计学意义(均为P>0.05)。术后浅前房者14例(17眼),C、D组患者术前眼压分别为(49.90±4.70)mmHg(1kPa=7.5mmHg)、(3.71±3.02)mmHg;术后第1天眼压:C组(9.75±0.98)mmHg;D组(15.76±1.74)mmHg;眼压下降幅度:C组(38.30±4.33)mmHg、D组(19.04±2.72)mmHg;差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。术后C组与D组的角膜厚度、前房深度、小梁虹膜夹角为0°的象限个数及小梁睫状体距离比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05),而虹膜晶状体夹角(C组:14.53°±0.44°;D组:12.74°±0.70°)差异有统计学意义(P<0.05)。结论小梁切除术前是否并发睫状体脱离与术后是否发生浅前房未见统计学相关性。术前眼压越高,虹膜晶状体夹角越大,治疗后眼压下降幅度越大,及术后第1天眼压越低,发生浅前房的可能性越大。
- 梁巍郑雅娟赵婧王丹王洁
- 关键词：闭角型青光眼小梁切除术睫状体脱离浅前房超声生物显微镜
- 压力对人眼小梁细胞CIC-2表达及细胞活力、凋亡影响的实验研究
- 原发性开角型青光眼(primary open angleglaucoma,POAG)是一种慢性进行性视神经病变,病理性高眼压伴有典型的视神经凹陷、萎缩及视野缺损,房角是开放的。POAG患者眼压升高,主要是由于房水排出的
- 梁巍郑雅娟
- 关键词：小梁细胞细胞活力
- 氯离子通道阻滞剂对人眼小梁细胞吞噬作用的影响
- 2010年
- 目的探讨氯离子通道阻滞剂—5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸5-nitro-2-(3-phenyl-propylamino)-benzoic acid,NPPB对人眼小梁细胞吞噬功能的影响。方法培养人眼小梁细胞,对其进行免疫化学染色鉴定,采用RT-PCR技术检测小梁细胞CLC-2mRNA的表达,然后应用流式细胞仪定量检测不同浓度NPPB作用下,小梁细胞对乳胶株的吞噬指数。结果体外培养的人眼小梁细胞NES染色阳性,且成功检测出CLC-2mRNA表达。当加入10μmol/L的NPPB作用6h后,小梁细胞对乳胶株的吞噬指数与对照组相比无明显改变(P>0.05),而50μmol/L的NPPB作用后,小梁细胞对乳胶株的吞噬作用明显降低(P<0.01),低于对照组,且随着加入NPPB浓度的增加,吞噬指数逐渐降低。结论氯离子通道阻滞剂浓度依赖的抑制小梁细胞的吞噬功能,且氯离子通道CLC-2可能参与调节小梁细胞吞噬过程。
- 梁巍郑雅娟
- 关键词：小梁细胞
