林鉴
- 作品数：12 被引量：119H指数：5
- 供职机构：厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：教育部跨世纪优秀人才培养计划福建省科技重大专项福建省重大科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 戊型肝炎病毒衣壳蛋白同源二聚体的相互作用结构域被引量：12
- 2004年
- 为了探讨戊型肝炎病毒衣壳蛋白同源二聚体形成的关键区域和相互作用结构域 ,以及二聚体形成与主要天然中和表位的形成之间的关系 ,通过末端缺失、定点突变技术研究戊型肝炎病毒 (HEV)ORF2的aa394_aa6 0 6片段NE2的聚合现象 ,发现其C端的aa5 97_aa6 0 2 (AVAVLA)疏水区是该片段同源聚合的核心区域 ,提高该区域氨基酸的亲水性将妨碍聚合现象的发生 ;半胱氨酸化学交联实验表明NE2形成同源二聚体时 ,aa5 97在空间位置上相接近 ,处于可生成化学键的距离 ,提示所处区域为疏水聚合的作用结构域 ;通过Blast程序估算核心区域的天然突变率 ,发现其疏水性高度保守 ;N端缺失实验表明 ,至少 6 5个氨基酸既不影响同源聚合也不直接参与主要的天然中和表位的形成 ,但可协助中和表位构象的形成 ,而这种协助作用可被ORF2的末端肽段所代替。aa5 97_aa6 0 2 (AVAVLA)疏水区为戊肝病毒衣壳组装的第一步骤的核心区域 ,并与重要的天然中和表位的形成直接相关 ,从而为戊肝病毒疫苗的研究提供更详细的信息。
- 李少伟何志强王颖彬陈毅歆刘如石林鉴顾颖张军夏宁邵
- 关键词：戊型肝炎病毒基因突变
- 戊型肝炎病毒衣壳蛋白同源二聚体的相互作用结构域
- 戊型肝炎病毒(HEV)是一种无包膜、二十面体对称结构的RNA病毒,其基因组包含3个开放读码框架(ORF),其中ORF2编码660个氨基酸的结构蛋白(PORF2),组成病毒衣壳.本研究通过疏水性分析、肽段末端缺失、氨基酸定...
- 李少伟何志强王颖彬陈毅歆刘如石林鉴顾颖张军夏宁邵
- 关键词：戊型肝炎病毒衣壳蛋白同源二聚体生物信息学
- 文献传递
- 大肠杆菌表达的戊型肝炎病毒ORF2片段的聚合现象研究
- 在大肠杆菌中表达了戊型肝炎病毒(HEV)ORF2的aa394-aa604片段，得到的重组蛋白NE2在SDS-PAGE中主要以可被尿素解聚的二聚体形式存在，二聚体对病人血清的反应性明显强于单体;质谱分析表明NE2可形成从二...
- 李少伟张军何志强葛胜祥顾颖林鉴刘如石夏宁邵
- 关键词：大肠杆菌戊型肝炎病毒二聚体原核表达
- 文献传递
- 大肠杆菌表达的戊型肝炎病毒ORF2片段的聚合现象研究被引量：47
- 2002年
- 在大肠杆菌中表达了戊型肝炎病毒 (HEV)ORF2的a .a .394～a .a .6 0 4片段 ,得到的重组蛋白NE2在SDS PAGE中主要以可被尿素解聚的二聚体形式存在 ,二聚体对病人血清的反应性明显强于单体 ;质谱分析表明NE2可形成从二聚体到至少六聚体的多种聚体 ;动态光散射测定表明平均分子半径约 4nm ,相当于四聚体 ,但分散度较大 ,提示为多种大小不一的聚合体的混合物。这些证据表明NE2蛋白可形成以同源二聚体为基本单位的多种聚合体形式 ,其中以二聚体间的结合最为紧密 ,并且以二聚体为基础可进一步装配出多种更高级结构 ,从而具有作为HEV疫苗及诊断试剂抗原的良好前景。
- 李少伟张军何志强葛胜祥顾颖林鉴刘如石夏宁邵
- 关键词：大肠杆菌二聚体原核表达
- 戊型肝炎病毒衣壳蛋白中和表位间的构象诱导被引量：3
- 2004年
- 重组蛋白NE2包含了戊型肝炎病毒(HEV)衣壳蛋白(pORF2)的aa394～606片段。在NE2上已鉴定出了2个HEV中和表位,并获得了3个识别中和表位的单克隆抗体(MAb)8C11、13D8和8H3。这3个MAb间的交叉阻断ELISA实验发现,8C11和13D8可以彼此完全阻断,8H3对8C11和13D8均不能阻断,而8C11非但不能阻断8H3,反而显著增强了8H3与抗原的结合。用生物传感器进行的抗体与抗原结合的动力学分析也证实了这一现象。这些结果提示,在NE2上8H3表位区域受到抗原上某些结构的掩盖,而8C11与NE2的结合引起了抗原空间结构的改变,导致了掩盖8H3表位的结构的去除和8H3表位的充分暴露。免疫捕获RT PCR发现,8C11同样可以显著增强8H3对天然HEV病毒的捕获能力,提示这种结合诱导的衣壳蛋白空间构象改变在天然HEV病毒颗粒上同样存在。
- 张军顾颖欧山海王颖彬叶祥忠林鉴葛胜祥夏宁邵
- 关键词：戊型肝炎病毒衣壳蛋白中和表位构象单克隆抗体
- 颗粒化重组戊型肝炎病毒衣壳蛋白及其抗原性与免疫原性被引量：37
- 2004年
- 过去的研究发现大肠杆菌表达的戊型肝炎病毒 (HEV)衣壳蛋白ORF2的aa3 94_60 6片段NE2可以形成同源多聚体 ,并具有良好的免疫保护性 ,但纯化后的免疫原性较弱。这里表达了 3个NE2蛋白的N端延伸突变体 ,发现对应于ORF2aa3 68_60 6的重组蛋白HEV 2 3 9在体外可以形成颗粒性抗原。HEV 2 3 9抗原颗粒与戊肝患者血清反应性良好 ,对中和性单克隆抗体 8C11的反应性与NE2抗原相当 ,而对另一中和性单克隆抗体 8H3的反应性较NE2抗原有显著提高 ,表明HEV 2 3 9抗原颗粒具有比NE2更好的抗原性。纯化后的HEV 2 3 9抗原颗粒直径约为 15～3 0nm。铝佐剂吸附的HEV 2 3 9免疫Balb c小鼠的半数有效剂量 (ED5 0 )在 0 0 8～ 0 2 5μg之间 ,而同样以铝佐剂吸附的NE2抗原 60 μg剂量免疫的抗体阳转率仅 2 5% ,表明HEV 2 3
- 何志强张军李少伟林鉴刘如石陈毅歆王颖彬夏宁邵
- 关键词：戊型肝炎病毒衣壳蛋白原核表达抗原性免疫原性
- 集美大学2002级福建籍新生肝炎感染现状被引量：7
- 2004年
- 目的 了解集美大学 2 0 0 2级福建籍新生甲、乙、戊 3型肝炎感染情况。方法 采用血清流行病学调查方法。结果 学生中抗HAV -IgG ,HBsAg和抗HEV -IgG阳性率分别为 77.0 8% ,1 5 .2 3 % ,1 7.1 5 % ,地区差异明显 ;HAV ,HEV无性别差异 ,而HBV以男性为高 ;农村HAV和HBV感染率均高于城镇 ,而HEV感染率无城乡差别。结论 应该加强对本地区大学生的甲、乙肝预防 。
- 李玉宝郑英杰叶祥忠王刚欧山海葛胜祥林鉴张军夏宁邵
- 关键词：乙型肝炎抗体乙型
- SARS冠状病毒核衣壳(N)蛋白不同区域的原核表达被引量：5
- 2005年
- 利用大肠杆菌表达系统对SARS冠状病毒的核衣壳(N)蛋白全长及N末端或/和C末端缺失突变体进行了表达,共表达了39个重组蛋白,表达量在15%～30%之间。分别利用电洗脱或金属鳌合介质纯化重组蛋白,用蛋白印迹实验检测纯化蛋白对SARS病人恢复期血清的反应性,结果发现全长N蛋白活性最好,其余的末端缺失蛋白均无法达到同一活性水平。由此说明N蛋白的完整性对于其优势表位的充分暴露是必要的。
- 林鉴葛胜祥王颖彬罗文新吴婷李少伟程通张军夏宁邵
- 关键词：SARS冠状病毒SARS病人N蛋白表位核衣壳缺失突变体
- 外源基因的导入对Synechococcus sp.PCC7942SOD活性和同工酶谱的影响
- 2004年
- 外源DNA导入Synechococcussp.PCC7942后,通过NBT光化还原和PAGE电泳检测发现转基因藻Syne chococcussp.PCC7942的SOD活性和同工酶谱发生了改变.若外源基因整合在受体细胞染色体DNA上,根据整合位点的不同则能提高或减弱Synechococcussp.PCC7942的SOD活性,同时增加同工酶谱带.若外源基因不是整合在染色体上而是以质粒的形式存在,则只改变Synechococcussp.PCC7942SOD活性而不影响其同工酶谱.
- 徐虹章军谭维娜林鉴刘仁海周克夫
- 关键词：外源基因基因导入SYNECHOCOCCUSSP.PCC7942同工酶
- 三种戊型肝炎诊断试剂可靠性的研究被引量：23
- 2004年
- 目的 评价不同戊型肝炎诊断试剂对临床急性戊型肝炎诊断的可靠性。 方法 用273份健康人血清和525份肝炎患者血清对三种戊型肝炎诊断试剂进行比较。 结果 E2-IgM试剂用于急性戊型肝炎诊断的特异度为100.0％,显著优于GL-IgM试剂(96.7％)和GL-IgG试剂(85.4％)。E2-IgM、GL-IgG试剂用于急性戊型肝炎诊断的灵敏度(分别为97.9％、93.8％),均显著高于GL-IgM(72.9％)。在65例GL-IgM阳性而E2-IgM阴性的患者中,有58例(89.2％)同时为抗甲型肝炎病毒IgM抗体阳性,提示GL-IgM试剂的检测受其他IgM抗体的干扰较大。 结论 E2-IgM是良好的戊型肝炎急性诊断指标。
- 郑英杰姜庆五张军赵琦葛胜祥高眉扬林鉴欧山海夏宁邵
- 关键词：戊型肝炎试剂抗体HEV
