林峻
- 作品数:75 被引量:61H指数:4
- 供职机构:福州大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金福建省科技重大专项福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生轻工技术与工程农业科学更多>>
- 一种在总状毛霉休眠孢子中表达蛋白质的方法
- 本发明公开了一种在总状毛霉休眠孢子中表达蛋白质的方法,包括总状毛霉培养和孢子收集、总状毛霉孢子预处理以及使用HDEN法电击总状毛霉孢子三个步骤,该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤,采用HDEN电转化技术,将体外的单链编码蛋白...
- 林峻
- 文献传递
- 利用单链核糖核酸转化尼琦青霉孢子并制造蛋白质的方法
- 本发明公开了利用单链核糖核酸转化尼琦青霉孢子并制造蛋白质的方法,包括尼琦青霉培养和孢子收集、尼琦青霉孢子预处理以及使用HDEN法电击尼琦青霉孢子三个步骤,该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤,采用HDEN电转化技术,将体外的单...
- 林峻
- 文献传递
- 利用外源RNA在扩展青霉休眠孢子中制造蛋白质的方法
- 本发明公开了一种利用外源RNA在扩展青霉休眠孢子中制造蛋白质的方法,包括扩展青霉培养和孢子收集、扩展青霉孢子预处理以及使用HDEN法电击扩展青霉孢子三个步骤,该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤,采用HDEN电转化技术,将体外...
- 林峻
- 文献传递
- 一种递送外源DNA进入烟曲霉未萌发孢子的方法
- 本发明公开了一种递送外源DNA进入烟曲霉未萌发孢子的方法,包括烟曲霉培养和孢子收集、烟曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击烟曲霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的烟曲霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材...
- 林峻
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- 哺乳动物单细胞研究技术的现状与未来
- 2019年
- 近年来,生命科学和医学的基础研究已深入到单细胞阶段。单细胞研究为揭示生命活动的基本规律、探索细胞异质性、提高对疾病发病机制的认识等提供了重要的线索和依据,同时,单细胞技术已被应用于日常实践中,如法医学和临床生殖医学。单细胞研究中使用的技术也在不断变化,并越来越复杂。文中主要介绍单细胞分离技术,包括手工挑取、激光捕获显微切割和微流控技术,以及单细胞中DNA、RNA和蛋白质分析方法的各种技术。此外,文中总结了近年来生命科学和医学领域的主要单细胞研究成果,讨论了单细胞相关技术和研究的不足,并介绍了其未来的发展方向。
- 姜文倩田亚茸左锐林峻
- 关键词:单细胞激光捕获显微切割微流控
- 不依赖介质直接转化外源DNA进入里氏木霉休眠孢子的方法
- 本发明公开了一种不依赖介质直接转化外源DNA进入里氏木霉休眠孢子的方法,包括里氏木霉培养和孢子收集、里氏木霉孢子预处理以及使用HDEN法电击里氏木霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的里氏木霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作...
- 林峻
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- T4多聚核苷酸激酶的原核表达、纯化及初步应用
- 2019年
- 原核表达、纯化T4多聚核苷酸激酶,并尝试将纯化的T4 PNK用于短探针序列的连接。本研究以合成的pseT基因为模板,PCR扩增出带有NdeⅠ和Bam HⅠ位点的目的片段,构建pseT-pET-15b原核表达载体,并转入E. coli ER2566中诱导表达。Ni-Agarose亲和层析柱纯化重组蛋白后,再进行Western blot鉴定。用纯化后再浓缩的T4 PNK参与探针连接反应,并设置商品T4 PNK和阴性对照。PCR扩增成功获得大于900 bp的目的基因片段,原核表达载体pseT-pET-15b构建成功,经诱导表达的重组蛋白分子量大小约为35 kD,Western blotting确认蛋白表达正确,浓缩后的蛋白浓度达到826μg/m L。电泳结果显示,重组T4 PNK在探针连接中效果较好。本研究成功表达并纯化了可溶性的T4多聚核苷酸激酶,且具有较好的活性,该蛋白可进一步用于后续大批量探针连接反应或其他相关研究,具有一定实际应用价值。
- 左锐林峻蔡伟文
- 关键词:原核表达
- 一种调控基因表达的方法
- 本发明提供一种调控基因表达的方法,包括:确定靶基因以及该靶基因的转录因子结合位点;设计一具有与该转录因子结合位点相同序列的寡聚核苷酸探针;将该寡聚核苷酸探针导入含该靶基因的系统中进行基因表达,在该基因表达过程中,该寡聚核...
- 陈鲤群刘国娟林峻蔡伟文
- 文献传递
- 内切葡聚糖酶基因及其编码蛋白
- 本发明公开了一种内切葡聚糖酶基因及其编码蛋白,所述内切葡聚糖酶基因的核酸序列如SEQ ID NO.1所示,该内切葡聚糖酶基因的编码蛋白具有如SEQ ID NO.2所示的蛋白序列。本发明内切葡聚糖酶基因编码的内切葡聚糖酶兼...
- 林峻
- 一种递送外源DNA进入总状毛霉未萌发孢子的方法
- 本发明公开了一种递送外源DNA进入总状毛霉未萌发孢子的方法,包括总状毛霉培养和孢子收集、总状毛霉孢子预处理以及使用HDEN法电击总状毛霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的总状毛霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分...
- 林峻
- 文献传递