李希宁
- 作品数：26 被引量：81H指数：5
- 供职机构：湖州师范学院医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金吉林省科技厅重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 肌醇酶1信号通路对氟诱导的成骨细胞分化的影响被引量：2
- 2016年
- 目的观察染氟成骨细胞未折叠蛋白反应肌醇酶1（IRE1）-Xbp1信号通路的表达及siRNA干扰抑制IRE1表达后成骨细胞内成骨细胞标志物的变化趋势。方法细胞增殖毒性（CCK-8）实验检测成骨细胞MC3T3-E1增殖活性，设置0．0、0．1、1．0、2．0、4．0、8．0、16．0、20．0、32．0、64．0mg／L10个不同氟含量组；选取具有代表性的低、中、高剂量氟（含量分别为2．0、8．0、20．0mg／L）作用于MC3T3-E1细胞2d，采用实时荧光定量PCR（Real-timePCR）检测MC3T3-E1细胞中未折叠蛋白反应相关基因和成骨细胞标志物[碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（OCN）、Runx2、osterix、免疫球蛋白重链结合蛋白（Bip）、蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）、活化转录因子6（ATE6）、Xbp1]的表达：IRE1siRNA转染MC3T3-E1细胞并联合染氟，Real-timePCR和蛋白免疫印迹法检测MC3T3-E1细胞中IRE1信号通路和成骨细胞标志物的表达。结果CCK-8检测结果显示氟的双向效应，即与0．0mg／L组[1．00±0．01（1d）、1．00±0．02（3d）、1．00±0．08（7d）]比较，成骨细胞活性在2．0mg／L染氟组[1．11±0．02（1d）、1．29±0．02（3d）]、8．0mg／L染氟组[1．16±0．02（1d）、1．44±0．03（3d）]显著增强（P均〈0．05），而2（1．0mg／L染氟组却抑制细胞活性[0．83±0．01（1d）、0．81±0．01（3d）、0．96±0．04（7d），P均〈0．05]。2．0mg／L染氟组显著诱导MC3T3-E1细胞内ALP（12．80±3．62）、Runx2（6．61±0．48）和osterix（21．42±1．56）的表达，与0．0mg／L组（6．86±2．13、2．65±0．38、12．48±3．96）比较，差异有统计学意义（P均〈0．05），而20．0mg／L染氟组抑制ALP（0．88±0．17）、OCN（0．16±0．05）和osterix（1．35±0．51）的表达，与0．0mg／L组[4．58±1．52（OCN）]比较，差异均有统计学意义（P均〈0．05）。与0．0mg／L组[1．36±0．58（IRE1）、0．96±0．45（Xbp1�
- 李希宁三旗春张婷高喜仁俞峰孙波
- 关键词：氟骨症未折叠蛋白反应基因干扰成骨细胞
- 硒和维生素E对克山病病区粮喂饲大鼠心肌纤维化的影响被引量：4
- 2011年
- 目的:观察适时适量补充硒(Se)和维生素E(VE)对心肌纤维化和心肌重构的影响,探讨克山病病区的低Se和低VE膳食是否在心肌损伤后的修复过程中持续发挥作用。方法:30只Wistar大鼠随机分为:正常对照组(Control,混合饲料喂养)、病区粮饲料组(EG,病区粮喂养)、病区粮饲料加Se组(EG+Se)、病区粮饲料加VE组(EG+VE)和病区粮饲料加Se加VE组(EG+Se+VE)。喂养21d后,取大鼠心脏,比色法测定大鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;硫代巴比妥法测定血清丙二醛(MDA)含量;马松三色染色测定大鼠细胞外基质沉积情况;免疫组织化学法和Western blotting法测大鼠心肌组织中转化生长因子β(TGF-β)和结缔组织生长因子(CTGF)表达。结果:与正常对照组比较,EG组心肌纤维化大鼠血清中GSH-Px活力下降(P<0.01),MDA含量升高(P<0.05),心肌组织胶原蛋白大量沉积,并伴有TGF-β和CTGF表达上调(P<0.01)。与EG组比较,EG+Se组和EG+Se+VE组病区粮心肌纤维化大鼠血清中GSH-Px活力均提高(P<0.01和P<0.05),MDA含量降低(P<0.05);大鼠心肌细胞外基质沉积缓解;克山病大鼠心肌TGF-β和CTGF表达下调(P<0.01)。结论:低Se和低VE在心肌损伤后的修复过程中持续发挥作用,适时适量补充Se和VE有利于减轻和逆转过度的心肌纤维化和心肌重构。
- 贾春澍陈爱军李敏李相军苗春生李希宁任立群
- 关键词：硒维生素E心肌重构克山病
- 《病理生理学》课程教学方法创新策略被引量：1
- 2018年
- 病理生理学教学方法的创新对于医学生综合思维能力的培养具有重要意义。综合运用"跨科联系法"、"归纳推理法"、"假设排除法"、"网络互动法"及"病例再现法"等创新教学方法,有助于提升医学生的"发散思维"、"聚合思维"、"比较思维"、"互动思维"及"临床思维"等综合思维能力,为医学生胜任未来的临床分析及研究工作奠定基础。
- 张婷王旗春李希宁张慧
- 关键词：病理生理学教学方法思维能力
- 胃癌患者糖脂代谢指标与临床病理学特征的相关性分析被引量：14
- 2016年
- 目的探讨胃癌患者糖脂代谢水平与临床病理学特征的相关性。方法收集443例人住湖州师范学院附属第一医院的胃癌患者临床病理参数，统计胃癌患者初入院空腹糖脂代谢指标水平及所占百分比，分析糖脂代谢指标水平与临床病理参数的相关性。结果与糖脂代谢指标正常水平的胃癌患者相比，血清低水平总胆固醇（X^2=7．676）男性胃癌患者显著较少（P〈0．05），低水平高密度脂蛋白（X^2=7．520）、低水平载脂蛋白A1（X^2=6．253）男性胃癌患者均显著较多（P〈0．05）。血清总胆固醇水平与患者年龄（r=-0．116）、肿瘤直径（r=-0．117）及TNM分期（r=-0．111）均呈负相关（P〈0．05）；HDL与肿瘤直径（r=-0．094）、转移淋巴结数量（r=-0．106）、原发灶浸润深度（r=-0．112）、淋巴结转移分级（r=-0．102）及TNM分期（r=-0．107）均呈负相关（P〈0．05）；低密度脂蛋白水平与患者年龄（r=-0．116）呈负相关（P〈0．05）；血清脂蛋白a与肿瘤直径（r=0．170）、转移淋巴结数量（r=0．151）、原发灶浸润深度（r=0．160）、淋巴结转移分级（r=0．153）及TNM分期（r=0．115）均呈正相关（P〈0．05）；载脂蛋白A1与远处转移（r=-0．168）、TNM分期（r=-0．120）均呈负相关（P〈0．05）；载脂蛋白B与远处转移（r=-0．132）呈负相关（P〈0．05）。血糖及三酰甘油水平与胃癌患者临床病理特征无明显关联（P〉0．05）。结论低脂代谢水平、高脂蛋白A血症可能是胃癌恶性程度及进展的代谢特征，监测血脂指标变化可能对胃癌患者病程评估有一定参考价值。
- 张婷崔戈冯文明石麒麟崔杰李希宁王旗春沈洪
- 关键词：胃肿瘤糖代谢脂质代谢病理过程
- 投氟对大鼠胰岛素水平的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察给以不同剂量氟的大鼠胰岛素水平的变化。方法经灌胃给氟复制氟中毒模型。利用Siemens ADVIA Centaur XP全自动化学发光免疫分析仪检测大鼠血清胰岛素水平,酶联免疫吸附法分析糖化血红蛋白水平,使用贝克曼全自动生化分析仪检测血脂。结果胰岛素和糖化血红蛋白水平的变化显示出低剂量和高剂量的氟都能够诱导胰岛素分泌,其高剂量氟组大鼠胰岛素水平更高。高剂量氟对胰岛素耐受影响不大,而低剂氟组大鼠胰岛素耐受能力下降,联合胰岛功能受损,进一步降低了大鼠对胰岛素的敏感性。结论一定剂量的氟刺激大鼠胰岛素的分泌,且对胰岛素的分泌成剂量-效应关系。此外,氟能够影响大鼠对胰岛素的敏感性,甚至降低其敏感性。
- 史立群陈晓亮李希宁徐辉李广生
- 关键词：氟中毒胰岛素
- 槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷对阿霉素致体外心肌细胞损伤的保护作用被引量：1
- 2017年
- 目的观察槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷对阿霉素(ADR)致心肌细胞损伤的保护作用及机制。方法实验选用出生24 h内的Wistar大鼠6只,雌雄不限,分离心肌细胞。采用纯化培养的心肌细胞建立ADR损伤模型,实验分为6组:空白对照组(正常细胞培养,加入等数量的MEM培养基,不加入任何药物)、二甲基亚砜(DMSO)对照组(加入含DMSO浓度为5μg/ml的MEM培养液)、ADR损伤组(加AOR浓度为1μg/ml的MEM培养液)、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷保护组(分别为低剂量12.5μg/ml、中剂量25μg/ml、高剂量50μg/ml槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷保护组)。分组给药后孵育24 h。显微镜下观察心肌细胞形态,MTT法测定心肌细胞存活率,应用试剂盒分别检测样品中乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果与ADR损伤组比较,低、中、高剂量保护组均可使心肌细胞存活率增高(P<0.01),LOH活性降低(P<0.01或P<0.05),NO活性降低(P<0.01),SOD活性增强(P<0.01)。结论 12.5~50μg/ml槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷均能减轻ADR对心肌细胞损伤,具有明显的心肌细胞保护作用,其机制可能与其抗氧化作用有关。
- 李希宁吴璇周余来杨锦竹姜波
- 关键词：阿霉素心肌细胞损伤
- 雷帕霉素通过抑制mTOR通路激活自噬缓解氟骨症大鼠早期的骨质疏松被引量：3
- 2021年
- 目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路与自噬对大鼠氟骨症骨质疏松中骨形成和骨吸收的影响。方法于2018年9月,采用灌胃给氟建立大鼠氟骨症模型,设立对照组、10 mgF-/kg组、20 mgF-/kg组、2 mg/kg雷帕霉素(RAPA)+10 mgF-/kg组和2 mg/kg RAPA+20 mgF-/kg组,每组20只,实验周期3个月。苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠骨组织的变化,骨密度仪和力学生物仪检测骨组织骨密度和生物力学指标弹性模量、刚度、最大应力及最大承受力,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清内碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)、骨保护素(OPG)、I型前胶原氨基端原肽(PINP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)含量,蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测骨组织磷酸化mTOR(p-mTOR)、自噬相关指标选择性自噬接头蛋白p62和微管相关蛋白II(LC3-II)、ALP、成骨细胞转录因子(Osterix)、Runt相关转录因子2(Runx2)和骨吸收指标RANKL的蛋白表达。结果与对照组比较,10 mgF-/kg和20 mgF-/kg组大鼠氟斑牙表现明显,骨膜厚度增加且出现吸收陷窝,血清中BGP、OPG、PINP、TRACP和RANKL含量上升(P<0.05),骨组织骨密度、弹性模量、刚度、最大应力和最大承受力明显降低(P<0.05),骨组织p-mTOR和p62表达减弱(P<0.05),ALP、Osterix、Runx2和RANKL表达增加(P<0.05)。与10 mgF-/kg和20 mgF-/kg组比较,2 mg/kg RAPA+10 mgF-/kg和2 mg/kg RAPA+20 mgF-/kg组无明显氟斑牙症状出现,血清中ALP、BGP和OPG水平明显升高(P<0.05),TRACP和RANKL含量降低(P<0.05),骨组织骨密度、弹性模量、刚度、最大应力和最大承受力明显上升(P<0.05),骨组织p-mTOR、p62和RANKL表达减弱(P<0.05),LC3-II、LC3-II/LC3-I、ALP、Osterix和Runx2表达增加(P<0.05)。结论RAPA可能通过抑制mTOR磷酸化激活自噬,促进骨形成的同时抑制骨吸收,从而缓解氟骨症大鼠早期骨质疏松。
- 李希宁董颖赵宇张婷李建有
- 关键词：氟中毒氟骨症骨质疏松雷帕霉素靶蛋白自噬骨形成
- 孕期尼古丁暴露致成年雄性仔鼠心肌纤维化被引量：1
- 2017年
- 目的研究孕期尼古丁暴露对子代大鼠心射血功能和心肌纤维化的影响。方法尼古丁暴露组孕鼠从妊娠第4~20天每天sc尼古丁6.0 mg·kg-1,连续17 d,正常对照组sc生理盐水。检测孕21 d胎鼠、出生后15和90 d雄性仔鼠的体质量和心脏质量。心电图记录90 d雄性仔鼠的心率;多普勒超声仪检测仔鼠心射血功能,包括每搏输出量(SV)、心输出量(CO)、左室长轴缩短分数(FS)、射血分数(EF)、左室后壁舒张期厚度(LVPWd)和室间隔舒张期厚度(IVSd);电镜检测心肌超微结构,Masson染色定性检测心肌胶原蛋白的沉积,放射免疫法定量检测心肌组织Ⅰ型胶原蛋白水平。结果与正常对照组仔鼠比较,孕期尼古丁暴露组21 d胎鼠和15 d雄性仔鼠心脏质量和体质量下降(P<0.05,P<0.01),但90 d雄性仔鼠的心脏质量和体质量无明显差异。尼古丁暴露组90 d雄性仔鼠心率升高[366±10 vs(418±10)min-1](P<0.05);超声心动图检测显示,CO,FS和EF明显降低(P<0.01),IVSd和LVPWd明显增加(P<0.05,P<0.01);电镜观察显示,心肌纤维紊乱,细胞外基质增加;Masson染色显示,心肌胶原蛋白沉积;放射免疫法检测结果显示,心肌组织Ⅰ型胶原蛋白水平升高[0.59±0.09 vs(0.40±0.05)μg·g-1组织](P<0.01)。结论孕期尼古丁暴露可导致成年雄性仔鼠心肌组织Ⅰ型胶原蛋白水平升高,心肌纤维化,心射血功能下降。这些病理变化可能导致其心血管疾病易感性增加。
- 董伟家李希宁夏志恒张于娟
- 关键词：尼古丁怀孕心肌纤维化
- 内质网应激及PERK信号通路在氟骨症发病机制中的作用
- 研究背景： 慢性氟中毒时成骨细胞怎样被激活、骨转换怎样被加速，是地方性氟中毒发病机制中亟待解决的关键问题。以往研究中发现，染氟成骨细胞中与内质网应激相关的蛋白BiP、蛋白质二硫键异构酶、蛋白酶体26SATP酶和硫氧还蛋白...
- 李希宁
- 关键词：氟骨症骨转换内质网应激PERK基因干扰
- 文献传递
- 1,25二羟维生素D3通过抑制mTOR通路而激活自噬以促进大鼠成骨细胞增殖和分化被引量：3
- 2021年
- 目的探讨1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对大鼠原代成骨细胞培养的第4代细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的作用及其对成骨的影响。方法由新生SD大鼠颅骨获取原代成骨细胞,用培养的第4代细胞进行研究,分为对照组(control)、雷帕霉素组(rapamycin,RAPA)(20nmol/L)、MHY1485组(2nmol/L)、1,25(OH)2D3组(5nmol/L)和MHY1485+1,25(OH)2D3组,作用0、12、24、36、48、60、72、84、96、108和120h后,以CCK8检测成骨细胞增殖活性。Western blot和RT-PCR检测mTOR及下游因子真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)和核糖体S6激酶1(S6K1)、自噬标志物Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)和成骨细胞分化相关因子碱性磷酸酶(ALP)、成骨相关转录因子(Osterix)和Runt相关转录因子2(Runx2)的表达,ALP染色观察各组细胞内ALP含量变化。以上分组条件作用21d后茜素红染色检测各组矿化情况。结果与对照组比较,1,25(OH)2D3明显促进成骨细胞增殖,逆转MHY1485抑制的成骨细胞增殖活性。Western blot和RT-PCR结果显示1,25(OH)2D3抑制mTOR、4E-BP1和S6K1的蛋白磷酸化,并使自噬标志物Beclin-1和LC3-Ⅱ、分化标志物ALP、Osterix和Runx2表达显著增加。ALP染色和茜素红染色结果显示,1,25(OH)2D3早期促进ALP的分泌,晚期促进矿化结节形成。结论 1,25(OH)2D3可以促进大鼠成骨细胞的增殖、分化与矿化,其可能与其通过抑制mTOR信号通路而激活自噬有关。[营养学报,2021,43(1):71-78,85,96]
- 李希宁刘重斌高喜仁赵宇王旗春翁伟
- 关键词：成骨细胞1,25(OH)2D3MTOR自噬
