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鸡MHC Ⅰ多态性与马立克氏病遗传抗性相关性的研究进展被引量：2: 2008年; 主要组织相容性复合体（MHC）由一组紧密连锁、高度多态的基因座位所组成，它在动物机体的移植排斥反应、抗原递呈、免疫应答和调控等方面具有极其重要的作用。MHC的多态性决定了其生物学功能的多样性。研究发现，鸡的MHC与许多重要疫病的抗性、易感性密切相关，为抗病育种提供了广阔的研究领域。其最令人感兴趣的特点是它可极大地影响鸡马立克氏病（Marek＇s disease，MD）的遗传抗性。细胞水平上，细胞介导的免疫反应是鸡MD遗传抗性的关键，; 金元昌韦平李娅韦信贤; 关键词：遗传抗性多态性 MHC 马立克氏病主要组织相容性复合体细胞水平

一株具有急性致瘤特性的马立克氏病病毒的分离与鉴定被引量：14: 2007年; 应用鸭胚成纤维细胞(DEF)从免疫过CVI988/Rispens疫苗株患马立克氏病(MD)的三黄鸡中分离到一株马立克氏病病毒(MDV)(命名为YL040920株)。从该分离株蚀斑克隆获得的9个克隆在蚀斑形成时间及其形态大小上均无明显差别,表明它较为单一;应用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增并测定了毒株的致瘤相关基因meq的核苷酸序列,并与其他MDV-1参考毒株的序列进行比较分析,发现其序列具有MDV-1强毒株的特征;用基于抗MDV-1 MEQ蛋白的单克隆抗体3G12E6的免疫荧光试验(FA)对毒株的DEF培养物进行检测,发现有特异性的荧光定位于细胞核内;应用毒株感染霞烟鸡,最早在接种后(PI)21d即可诱发明显的内脏器官,在各器官肿瘤中以心脏、肝脏和皮肤的肿瘤发生率最高;用禽肿瘤病三重PCR鉴别诊断技术对毒株的DEF培养物以及感染鸡的内脏器官组织进行检测,均能扩增到MDV-1强毒株的特异性带,而网状内皮增生症病毒(REV)和禽白血病病毒(ALV)的检测则均为阴性。研究的结果表明,分离株YL040920为单一的MDV-1强毒株,无REV、ALV以及疫苗株CVI988/Rispens的混杂,并具有以心脏、肝脏和皮肤肿瘤为主的急性致瘤特性。; 左天荣赵子轶韦平韦信贤李娅磨美兰; 关键词：马立克氏病病毒免疫荧光试验聚合酶链式反应致瘤性

实时定量PCR检测霞烟鸡MD抗性相关基因方法的建立: 马立克氏病(Marek's disease,MD)是由疱疹病毒引起的一种鸡恶性T淋巴细胞增生性疾病,对养禽业危害极大。目前以疫苗免疫和生物安全为主的防制手段已经不能很好的控制MD,因此抗病育种将成为一个重要的策略。抗病育...; 李娅; 关键词：马立克氏病实时定量PCR; 文献传递

实时荧光PCR检测鸡GAPDH基因方法的建立被引量：10: 2008年; 根据GenBank上鸡的3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehy-drogenase,GAPDH)基因的序列,在保守区域设计并合成一对引物,采用SYBR GreenⅠ染料建立了荧光定量PCR法。采用梯度浓度的GAPDH基因重组标准品质粒DNA进行荧光定量PCR并建立了标准曲线,经分析显示标准曲线的Ct值与标准品浓度的对数值之间存在良好的线性关系;动力学曲线分析表明,在本研究所建立的反应体系和反应条件下,标准曲线的灵敏度都达到10拷贝/反应。实时荧光定量PCR检测GAPDH基因表达水平标准品质粒和标准曲线的建立,为GAPDH基因作为内参基因进行鸡功能基因与病原基因表达的定量分析奠定了基础。; 李娅韦平金元昌韦信贤杨先荣牛搏学梁韦芬苏清康; 关键词：实时荧光定量PCR 内参基因

鸡抗马立克氏病遗传机制的研究进展: 2007年; 鸡的马立克氏病(MD)遗传抗性是由多个基因控制着,其中主要组织相容性复合体(MHC)基因是最确定的抗性影响因素。遗传抗病性研究根据病毒的生活史可分为抗感染和抗发病两个阶段,鸡抗MD的遗传机制研究目前主要集中在抗发病阶段,主要包括抗性基因的选择、抗性基因的表达水平、抗病性的遗传力。文章对上述与鸡马立克氏病遗传抗性相关的各个因素的研究进展进行了综述。; 韦信贤韦平李娅金元昌; 关键词：马立克氏病抗性抗性相关基因

pEGFP-C1-GnRH/TRS在HeLa细胞中的遗传稳定性: 2007年; 目的研究质粒pEGFP-C1-GnRH/TRS在HeLa细胞中的遗传稳定性。方法取0代及传至第10、20、30和40代的工程细胞,在有选择压力(加G418)的条件下,测定pEGFP-C1-GnRH/TRS质粒丢失率。分别提取各代次工程细胞质粒DNA进行双酶切鉴定。将经酶切鉴定正确的第40代工程细胞质粒测序,并将各代次工程细胞加压筛选后,于荧光显微镜下观察。结果连续传10、20、30和40代后,质粒丢失率均不超过2%。不同代次的工程细胞质粒DNA经BamHⅠ/EcoRⅠ双酶切,酶切图谱相同。第40代质粒的GnRH/TRS序列与原代质粒相同。第40代细胞荧光分析与原代细胞相似。结论质粒pEGFP-C1-GnRH/TRS在HeLa细胞中有较好的遗传稳定性。; 金元昌李景鹏李娅; 关键词：促性腺激素释放激素 HELA细胞

鸡主要组织相容性复合体的研究进展被引量：2: 2006年; 本文就鸡主要组织相容性复合体(MHC)的基因结构和功能;鸡MHC的遗传;鸡MHC编码的抗原;鸡MHC与疾病抗性、生产性能关系;鸡MHC的应用等方面进行了全面的综述,提出了今后的研究方向和存在的问题。; 磨美兰左天荣赵子轶韦平李娅韦信贤李康然; 关键词：主要组织相容性复合体

马立克氏病抗性纯合基因型鸡的检测方法: 本发明公开了马立克氏病抗性纯合基因型鸡的检测方法。采用PCR-RFLP技术，对MDV-1攻毒的99羽霞烟鸡BLB2基因第2外显子进行PCR扩增，并对其PCR产物进行Alu I、Cai I、Cfr I、Hin1 I、Hin...; 韦平金元昌韦信贤赵子轶李娅; 文献传递

实时荧光定量PCR检测鸡生长激素基因方法的建立被引量：1: 2012年; 本研究旨在建立定量分析鸡生长激素(Growth hormone,GH)基因mRNA表达水平的实时荧光定量PCR方法,为鸡GH基因mRNA表达水平的定量分析及探讨其与马立克氏病遗传抗性间关系奠定基础。根据GenBank数据库中鸡的GH基因序列,使用Oligo7软件在该基因保守区域设计合成一对引物并扩增GH基因片段,经回收纯化后连接到pGM-T载体,成功构建了含有GH基因片段的pGM-T-GH标准质粒。在此基础上,通过SYBR GreenⅠ染料法建立了pGM-T-GH重组质粒的实时荧光定量PCR标准曲线及其回归方程,成功建立了实时荧光定量PCR检测鸡GH基因的方法。; 崔帅李娅金元昌韦平黄亮; 关键词：GH基因实时荧光定量PCR 重组质粒

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李娅