李培芬
- 作品数：9 被引量：12H指数：2
- 供职机构：河北农业大学更多>>
- 发文基金：河北省科技支撑计划项目河北省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学化学工程更多>>
- 灰葡萄孢分生孢子发育相关基因的克隆及功能研究
- 本实验室前期从灰葡萄孢ATMT突变体库中筛选获得了一株不产生分生孢子的突变体BCt183,明确了其突变基因为BC1G_07455,该基因的编码产物与皮炎外瓶霉和马尔尼菲青霉菌的水杨酸羟化酶同源性较高.
- 李培芬赵福鑫郑会欣司贺龙邢继红韩建民董金皋
- 灰葡萄孢犬尿氨酸单氧酶基因BcKMO调控病菌致病力的机制分析被引量：5
- 2014年
- 【目的】揭示灰葡萄孢犬尿氨酸单氧酶基因BcKMO(kynurenine 3-monooxygenase)调控病菌致病力的机制,阐明灰葡萄孢致病的分子机理。【方法】利用DNS和Hoffman方法,对BcKMO的T-DNA插入突变体BCG183和回复突变体(BCG183/BcKMO)的多聚半乳糖醛酸酶(PMG)、果胶酶(PG)、纤维素酶(Cx)、多聚半乳糖醛酸反式消除酶(PGTE)和果胶甲基反式消除酶(PMTE)的活性进行分析;提取灰葡萄孢野生型和BCG183、BCG183/BcKMO突变体的粗毒素并进行生物活性测定;利用溴百里酚蓝显色试验,对突变体BCG183和BCG183/BcKMO的产酸能力进行分析;利用洋葱表皮穿透试验,检测突变体BCG183和BCG183/BcKMO的穿透能力;利用real-time PCR技术,检测突变体BCG183和BCG183/BcKMO中已知致病相关基因腺苷酸环化酶编码基因Bac、异源三聚体G-蛋白G?亚基基因Bcg2和Bcg3、蛋白激酶调节亚基基因PkaR、MAP激酶编码基因Bmp1和Sak1、MAP激酶Bmp3和BcSak1下游的靶基因Bcreg1、TCHK-MAPK信号途径基因Bos1、亲环蛋白A编码基因Bcp1、小G蛋白基因Ras2、多聚半乳糖醛酸酶基因Bcpg1和超氧化物歧化酶基因Sod1的表达水平。【结果】突变体BCG183中的PMG和PG的酶活性较野生型和回复突变体明显增强,CX、PGTE和PMTE的酶活性与野生型和回复突变体没有明显差别;突变体BCG183的毒素活性较野生型和回复突变体明显增强;突变体BCG183的产酸能力较野生型和回复突变体明显减弱;突变体BCG183能够穿透洋葱表皮,在培养基上形成菌落,与野生型和回复突变体没有明显差别;突变体BCG183中已知致病相关基因Bac、Bcg2、Bcg3、PkaR、Bmp1、Sak1、Bcreg1、Bos1、Bcp1、Ras2、Bcpg1和Sod1的表达水平明显强于野生型和回复突变体。【结论】灰葡萄孢BcKMO通过调控病菌的胞壁降解酶活性、毒素活性、产酸能力、致病相关基因的表达而影响病菌的致病力。
- 李培芬赵福鑫董丽萍郑会欣赵斌韩建民邢继红董金皋
- 关键词：灰葡萄孢突变体致病力
- 灰葡萄孢BcPDR1在病菌生长发育和致病过程中的功能
- 实验室前期从灰葡萄孢T-DNA插入突变体库中筛选获得了一株致病力完全丧失的突变体BCt89,明确了其突变基因为BcPDR1,该基因编码一个功能未知的假定蛋白,无同源基因和保守结构域。为进一步明确该基因的功能,本研究利用基...
- 李培芬赵福鑫郑会欣司贺龙邢继红董金皋
- 关键词：灰葡萄孢生长发育致病力
- 拟南芥AtBT4基因在抗灰霉病过程中的功能
- 本研究将拟南芥抗灰霉病生态型Col-0接种灰葡萄孢后,利用DDRT-PCR等技术获得了拟南芥抗灰霉病相关基因AtBT4；从拟南芥SALK库中获得了AtBT4基因的T-DNA插入突变体SALK_ 015577(bt4)和S...
- 樊锦涛蒋琛茜郝丛丛赵福鑫李培芬邢继红董金皋
- 关键词：拟南芥灰葡萄孢
- 灰葡萄孢BcPDR1调控病菌致病力的机制分析
- 实验室前期获得了一个新的灰葡萄孢致病相关基因BcPDR1,明确了该基因的缺失突变体的致病力完全丧失。为明确该基因缺失导致病菌致病力丧失的机制,本研究对BcPDR1基因的T-DNA插入突变体BCt89和敲除突变体△BcPD...
- 赵福鑫李培芬郑会欣司贺龙邢继红董金皋
- 关键词：灰葡萄孢突变体致病力
- 灰葡萄孢BcKMO在病菌生长、发育和致病过程中的功能被引量：11
- 2014年
- 【目的】明确灰葡萄孢BcKMO在病菌生长、发育和致病过程中的功能,为阐明该基因调控灰葡萄孢生长、发育和致病的分子机理奠定基础,并为灰霉病的防治提供理论依据。【方法】利用生物信息学方法,对BcKMO及其编码产物进行分析。扩增BcKMO的编码区,与pBARKS1-eGFP载体连接,构建基因的表达载体pBARKS1-BcKMO-eGFP;利用PEG介导的原生质体转化方法,转化BcKMO的T-DNA插入突变体BCG183的原生质体;利用PCR、Southern blotting和real-time PCR技术,对所获得转化子进行鉴定;对野生型菌株BC22、突变体BCG183和回复突变体BCG183/BcKMO的表型(菌落形态、菌丝形态、生长速度、产孢量等)和致病力进行分析。【结果】BcKMO编码犬尿氨酸单氧酶(kynurenine 3-monooxygenase,KMO),含有单氧酶FAD的保守结构域和4个类似芳香环羟化酶(Aromatic-ring hydroxylase-like)的基序,与核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的Rossmann卷曲NAD(P)(+)-结合蛋白(Rossmann-fold NAD(P)(+)-binding proteins,gi156049701)和从线嘴壳(Ophiostoma piceae)的FAD依赖性氧化还原酶(FAD-dependent oxidoreductase,gi512192943)同源性较高。成功构建了BcKMO的表达载体pBARKS1-BcKMO-eGFP,利用PEG介导的转化方法,转化突变体BCG183的原生质体,获得了草胺膦抗性的转化子;利用PCR、Southern blotting和real-time PCR技术鉴定转化子,获得了BcKMO的回复突变体BCG183/BcKMO。对突变体BCG183和回复突变体BCG183/BcKMO的表型进行了分析,发现BCG183突变体的生长速率减慢,不产生分生孢子和菌核,菌丝纤细;回复突变体和野生型菌株的生长速率、菌丝形态基本一致,均产生分生孢子和菌核。致病力分析发现,BCG183突变体在芸豆叶片和黄瓜叶片上的致病力均较野生型和回复突变体明显增强。【结论】灰葡萄孢BcKMO正调控病菌的生长、发育,负调控病菌的致病力。
- 李培芬赵福鑫董丽萍郑会欣赵斌张靖司贺龙邢继红韩建民董金皋
- 关键词：灰葡萄孢突变体生长发育致病力
- 灰葡萄孢分生孢子产生能力丧失突变体的筛选及相关基因的功能分析
- 灰葡萄孢(Botrytis cinerea)是一种典型的死体营养型植物病原真菌,能引起200多种植物的灰霉病,常给农业生产造成严重的经济损失.灰葡萄孢的分生孢子在病害循环和流行过程中起着关键作用,通过抑制病菌分生孢子的产...
- 赵福鑫李培芬董丽萍韩建民邢继红董金皋
- 关键词：灰葡萄孢T-DNA插入突变体TAIL-PCR
- 灰葡萄孢BC1G_02176在生长、发育和致病过程中的功能
- 本研究从灰葡萄孢的ATMT突变体库筛选,获得了一株不产生菌核、分生孢子产量明显减少的突变体BCt41;利用TAIL-PCR、Southern blotting、RT-PCR等技术结合生物信息学方法,明确了其突变基为BC1...
- 赵福鑫李培芬郑会欣司贺龙邢继红董金皋
- 灰葡萄孢BcKMO基因对病菌生长发育和致病力的影响
- 通过筛选灰葡萄孢ATMT突变体库，从中获得了一株致病力增强的突变体BCG183，通过对该突变体的致病力和表型进行分析，发现该突变体致病力增强，在PDA培养基上菌丝生长缓慢，不产生分生孢子和菌核，菌丝较野生型变细，明确了其...
- 李培芬
- 关键词：灰葡萄孢突变体
- 文献传递
