李劲 作品数:18 被引量:55 H指数:5 供职机构: 中南民族大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家民委自然科学基金 武汉市科技计划项目 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
不同民族大学生乙肝病毒感染状况调查 被引量:5 2010年 目的了解不同民族大学生乙型肝炎病毒感染情况,为乙肝的预防和治疗提供科学依据。方法以中南民族大学2007级4015名新生和2008级5006名新生作为调查对象;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙肝5项,并进行统计学分析。结果2007,2008年的整体HBsAg阳性率为4.59%,男性阳性率为6.22%,明显高于女生的3.11%(P<0.01);壮族(10.29%)、畲族(9.13%)和瑶族(8.04%)学生的HBsAg阳性率较汉族(4.5%)学生约高1倍,差异有统计学意义(壮族、畲族与汉族间P<0.01,瑶族与汉族间P<0.05)。回族(2.97%)、满族(1.61%)学生的HBsAg阳性率较汉族(4.5%)学生低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乙型肝炎病毒感染率在不同民族学生之间存在较大的差异,提示不同民族学生的不同卫生和生活环境条件可能与乙肝病毒的感染率相关。 胡文娟 邓志芳 高雯琪 王红 欧阳刚 李劲关键词:乙型肝炎病毒 少数民族 大学生 不同去污剂对细胞膜溶解作用的实验设计和思考 被引量:2 2010年 以不同去污剂对红细胞细胞膜溶解作用为例,结合教学所得,探讨了实验设计的科学性和严谨性。该实验有于助学生获得不同去污剂对细胞膜溶解作用强弱的感性认识,也有助于学生分析问题和解决问题能力的提高。 赵燕杰 金磊 程旺元 李劲 余光辉关键词:细胞膜 去污剂 实验教学 不同民族大学生乙肝病毒基因型分布状况调查 被引量:5 2012年 为了解不同民族大学生乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因型和亚型分布状况,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)技术,对中南民族大学93例来自15个民族乙肝大三阳学生血清HBV进行基因分型.结果表明:患者中HBV基因B型占61.3%(57/93),C型占25.8%(24/93),D型占4.3%(4/93).说明各民族HBV基因型分布中,B型占绝对优势,C型次之,D型最少(P<0.01).且不同民族不影响HBV基因型的分布(P>0.05),C型和D型分布基本符合我国HBV基因型地理区域分布规律. 李劲 刘莹 邓志芳 胡文娟 高奎 赵瑞杰 王红 宋发军关键词:乙型肝炎病毒 中药“龙泉复方”的不同配伍对肿瘤细胞系HepG-2和EC-1增殖的影响 被引量:2 2011年 通过MTT(四甲基偶氮唑盐)法绘制细胞增殖曲线观察药物对肝癌细胞系HepG-2和食管鳞癌细胞系EC-1细胞增殖的影响,用荧光染色法进一步确定"龙泉复方"有效成分诱导细胞凋亡的较佳配伍及其有效作用浓度范围.结果表明:对抑制HepG-2细胞增殖有效作用的浓度:七味单方(马钱子、山慈菇、喜树果、龙葵、石上柏、青黛、紫菀)浸膏混合物和龙葵单方浸膏均〈125μg/mL,七味药物复方总浸膏为250~1000μg/mL;对抑制EC-1细胞增殖有效作用的浓度:三味药物混合浸膏(马钱子,喜树果、青黛提取的浸膏的混合物)〈50μg/mL和150~400μg/mL,七味单方混合浸膏〈25μg/mL和50~400μg/mL,喜树果单方浸膏为25μg/mL和50~200μg/mL;3种浸膏促进EC-1细胞增殖的浓度依次为:50~100、25~50、25~50μg/mL.通过对EC-1荧光染色观察发现诱导细胞凋亡的有效作用浓度:七位单方浸膏混合物为5~10μg/mL,三味药复方混合浸膏为10~25μg/mL,喜树果约为50μg/mL.研究结果提示,药物浓度范围和细胞系的不同导致其效果也不尽相同,临床应据具体情况调整,使之用药少效果佳. 李劲 邓志芳 高雯琪 胡文娟 刘莹 姚品芳 李广灿 陈焕朝 梅之南关键词:配伍 药物浓度 肿瘤细胞 复方二精灵多糖对谷氨酸诱导的海马神经元凋亡的保护作用 被引量:12 2008年 目的探讨中药复方二精灵多糖(EJL)预防阿尔茨海默病的机制。方法实验分为正常对照组、模型(100μmol.L-1谷氨酸诱导)组、阳性对照组(50μmol.L-1多奈哌齐)及EJL实验组(0.5,1.0,2.0及3.0g.L-1)。体外培养9d的海马神经元先用各药物预处理一定时间后,加入谷氨酸。采用MTT法、Hoechst 33258荧光染色、流式细胞术和Western蛋白质印迹法等方法检测细胞凋亡。结果MTT检测发现,随着EJL浓度的增加,细胞的存活率也增加;与模型组〔(59.6±4.6)%〕比较,EJL2.0及3.0g.L-1组细胞存活率明显升高〔(82.8±2.8)%和(89.4±4.1)%;n=3,P<0.05〕。荧光染色观察形态学变化发现,EJL预处理组凋亡细胞明显减少。FITC-Annexin Ⅴ和PI双染,在直方图中可以发现,模型组的凋亡率为32.33%,EJL预处理组则分别为24.33%,22.01%及12.12%。Western蛋白质印迹法结果显示,与模型组比,EJL2.0g.L-1预处理可以显著提高Bcl-2蛋白表达量,减少Bax蛋白表达量。结论EJL对海马神经元有一定的保护作用。 徐玲玲 程玉洁 李劲 梅之南关键词:多糖 海马 神经元 禽类多瘤病毒APV-1晚期基因多顺反子的EGFP标记载体构建和表达 2016年 为研究禽类多瘤病毒晚期基因多顺反子翻译起始调控的机制,设计和构建了以增强绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因替代病毒APV-1野生型的晚期结构蛋白VPs基因的真核双顺反子表达载体,并观察其在转染进入禽类原代成纤维细胞中的表达翻译状态.以APV-1的c DNA克隆(p HL1003)为模板,运用PCR技术扩增出与野生型病毒APV-1相同的Ori区、早期编码区和晚期Agno-1a区序列作为载体片段;从质粒p EGFP-N1中扩增出编码绿色荧光的EGFP DNA片段;经连接构成重组质粒p HL1003-GFP,通过脂质体细胞转染方法将质粒DNA转染到鸡胚胎和鹌鹑胚胎成纤维细胞中,通过细胞培养观察荧光表达状况.DNA序列分析证实了重组克隆中的EGFP序列与已知的质粒p EGFP-N1中EGFP序列一致.转染72 h后观察鸡和鹌鹑胚胎成纤维细胞,转染成功胚胎细胞明显表达较强的荧光,说明GFP可以在构建的双顺反子重组质粒的下游中正常表达并产生荧光.p HL1003-GFP重组质粒的构建及其在禽类原代成纤维细胞中的高效表达,为我们研究多顺反子翻译起始调控中Agno-1a基因的表达对下游病毒结构蛋白基因的翻译调控机制提供了简洁易用的系统和模型. 李劲 刘琳87例食管鳞癌治疗方式与淋巴结转移的关系 2011年 目的探讨胸段食管鳞癌单纯手术、术后放化疗和单纯放疗等3种治疗方式与淋巴结转移的关系及对生存率的影响。方法对87例胸段食管鳞癌3种不同治疗方式的临床资料进行回顾性分析。结果全组淋巴结转移率44.82%(39/87)。淋巴结转移率与肿瘤部位、临床分期和分化程度等有关(P<0.05);术后放化疗组淋巴结转移率明显低于单纯手术组、单纯放疗组(P均<0.05);术后放化疗组5年生存率显著高于单纯手术和单纯放疗组(P<0.05)。结论术后放化疗是防止食管鳞癌术后局部复发和淋巴结转移的有效治疗方式。肿瘤部位、临床分期和分化程度是影响食管癌淋巴结转移的重要因素;治疗方式与淋巴结转移率密切相关,是影响食管癌患者预后的主要原因。对单纯行放疗的中晚期胸下段食管鳞癌,建议照射膈下淋巴引流区,以延长患者生存期,提高生存质量。 陈清波 李劲 王洪波 徐明垚 郭银关键词:食管鳞癌 淋巴结转移 预后 87例食管鳞癌淋巴结转移治疗方式及预后分析 目的探讨胸段食管鳞癌单纯手术、术后放疗和化疗、单纯放疗三种治疗方式对患者生存期、生存率的影响,了解其淋巴结转移的特点。方法对87例胸段食管鳞癌三种不同的治疗方式的临床资料进行回顾性分析。结果全组淋巴结转移率44.82%(... 陈清波 李劲 王洪波 徐明垚 郭银文献传递 禽类多瘤病毒APV-1的cDNA病毒突变体构建 被引量:3 2013年 为进一步研究禽类多瘤病毒晚期基因多顺反子翻译调控的分子机制,设计和构建了与野生型病毒APV-1相同的在AUG位点有agno-1a突变区和7个插入氨基酸的新型重组病毒.用碱裂解法提取了APV-1 cDNA克隆pHL1003,全长线性目的片段由Acc I部分酶切后回收,再用T4连接酶将合成的agno插入片段磷酸化后与目的片段连接得到了重组质粒,最后转化至E.coli DH10b感受态细胞中筛选阳性克隆.经PCR,PAGE和DNA测序验证获得了APV-1突变cDNA克隆. 李劲 高奎 李可可 刘浏 刘学群关键词:CDNA克隆 DNA测序 PCR-RFLP中Chelex-100制备DNA模板的方法建立及其条件优化 被引量:8 2009年 目的:建立一种快速、可靠、经济的DNA纯化技术用于分子流行病学调查及群体遗传学的研究.方法:根据MMP3基因外显子2中rs679620的SNP区域(-Lys45Glu-)设计引物,采用Chelex-100法从微量全血中提取人基因组DNA,利用PCR-RFLP对其进行检测,观察基因分型结果.结果表明:取10μL全血,加入200μL 5%Chelex-100溶液,56℃水浴保温30 min后,100℃水浴8 min,离心取上清为最佳用于PCR的DNA模板提取条件.经PCR扩增及酶切验证,其DNA条带特异、清晰,适用于基因分型.结论:提取人基因组DNA的Chelex-100法所需血样微量、操作简单、快速、可靠、经济,特别适合于大量样本的DNA提取,可用于人群分子流行病学调查及群体遗传学的研究. 欧阳刚 胡文娟 姚品芳 王红 陈思礼 王朝元 李劲关键词:基因组DNA提取 基因分型