朱娟
- 作品数：5 被引量：4H指数：2
- 供职机构：安徽农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 枯草杆菌ylnF基因编码蛋白产物性质的研究
- 2006年
- 将枯草杆菌ylnF基因经PCR扩增,酶切后插入表达质粒pET15b中,转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达,金属螯合亲和层析一步纯化,酶活性测定。结果表明:ylnF基因编码产物是依赖于NAD+的前咕啉-2氧化酶,一个西罗血红素生物合成末端的酶。SDS-PAGE显示YlnF亚基分子量约22kD,全酶分子量约25kD,显示酶为单体酶。将Asp102定点突变Ala102,酶活丧失,表明Asp102在催化中起重要作用。
- 范军陈小峰朱娟程备久
- 关键词：枯草杆菌定点突变
- 对生玉米幼叶尿卟啉原脱羧酶的纯化及部分性质研究被引量：2
- 2006年
- 尿卟啉原Ⅲ脱羧酶是植物血红素和叶绿素合成的一个关键调控酶。对生玉米叶片中叶绿素含量较比互生玉米高。对生玉米幼苗经硫酸铵分级沉淀,DEAE Sepharose CL-6B、Sephacryl S-200、羟基磷灰石和B lueSepharose CL-6B层析,纯化了尿卟啉原脱羧酶。纯化倍数为1 060倍,得率约8%,比活约880 U/mg蛋白。纯化的UROD在SDS/PAGE显示一条带,亚基分子量约为40 kD,Sephacryl S-300测得全酶分子量约为55 kD。IEF-PAGE显示UROD为一条带,等电点约为6.0,酶的最适pH值约7.0,在55℃下保温12 m in,酶活力丧失90%,在100 mm ol/L的巯基乙醇下,UROD的酶活力提高7倍。体外5 mm ol/L的磷酸吡哆醛修饰显示UROD活力下降约30%。
- 范军何晓梅朱娟朱苏文程备久
- 关键词：对生玉米纯化酶性质
- 重组枯草杆菌5-氨基酮戊酸脱水酶的纯化和性质研究
- 2009年
- 大肠杆菌中表达的枯草杆菌5-氨基酮戊酸脱水酶（5-aminolevulinate dehydratase，ALAD），其N端含有组氨酸标签，Ni—NTA一步纯化至均一。纯化的酶比活为3．6U／mg蛋白，酶的最适pH为8．0—10．0，Km为0．95mmol～Vmax为16．7mmol/h，在55℃温浴10min，酶活保留85％，2mmol／L的K^＋、Zn^2＋、Mg^2＋、Li^＋、Fe^3＋和Mn^2＋提高酶活，2mmol／L的Co^2＋和Ca^2＋对酶活没有显著影响，2mmol/L的Cu^2＋和1mmol/L的Hg^2＋完全抑制酶活。在2mmol/L的EDTA存在下酶活性丧失，表明酶催化依赖金属离子。100mmol／L的酮戊酸抑制酶活约50％。10mmoL／L的2-巯基乙醇时提高酶活3倍，而100mmol/L的二硫苏糖醇几乎完全抑制酶活。氨基酸修饰表明赖氨酸和半胱氨酸残基可能是酶催化必需的，组氨酸和丝氨酸残基对酶催化不起关键作用。
- 朱娟朱苏文程备久范军
- 关键词：枯草杆菌组氨酸标签酶学性质
- 含组氨酸标签的枯草杆菌5-氨基酮戊酸脱水酶的高效表达被引量：2
- 2006年
- 以枯草杆菌基因组为模板,通过PCR扩增枯草杆菌编码5-氨基酮戊酸脱水酶基因hemB。将NdeⅠ和EcoRⅠ双酶切的纯化产物插入同样处理的pET-28 a中构建成表达载体。表达蛋白的N端含有6个组氨酸标签。构建的表达载体转入大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下,重组蛋白获得高效表达。SDS-PAGE检测到41 kD的特异带,表达菌株的上清检测到ALAD的比活为337 mU.mg-1,表明组氨酸标签不显著影响酶活。
- 朱娟范军朱苏文程备久
- 关键词：枯草杆菌组氨酸标签
- 含组氨酸标签的枯草杆菌5-氨基酮戊酸脱水酶性质研究
- 所有四吡咯化合物如血红素、叶绿素和维生素B12等对大部分生物体有非常重要的作用,它们合成的第一个共有底物是5-氨基酮戊酸。共有反应的第一步是两分子的5-氨基酮戊酸缩合成一分子的胆色素原,由5-氨基酮戊酸脱水酶(5-ami...
- 朱娟
- 关键词：枯草杆菌组氨酸标签酶学性质
- 文献传递
