张红莲
- 作品数:23 被引量:32H指数:3
- 供职机构:广东海洋大学食品科技学院更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:文化科学农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- “微生物工程”实验和实践教学探索与改革被引量:2
- 2015年
- 高等学校的实验和实践教学是培养学生动手能力、独立分析问题和解决问题能力的重要环节。针对"微生物工程"实验和实践课程中存在的问题,从课程内容优化、教学模式改革、多元化考核制度建立以及强化实践教学等方面,对该课程进行了探索与改革,以激发学生学习的自主性和积极性,培养其创新意识和创新能力,提高教学质量,培养综合型高素质人才。
- 张红莲夏立群刘慧玲丁燏
- 关键词:实践课程
- 鰤鱼诺卡氏菌与黄粉色诺卡氏菌原生质体融合的研究
- 2016年
- 鰤鱼诺卡氏菌是鱼类诺卡氏菌病的主要病原,黄粉色诺卡氏菌为一种近缘无毒环境诺卡氏菌.本实验研究主要以鰤鱼诺卡氏菌和黄粉色诺卡氏菌为两亲本,开展了原生质体融合研究.针对诺卡氏菌细胞壁厚的特性,本实验对原生质体制备时的溶菌酶脱壁时间进行了筛选,确定鰤鱼诺卡氏菌和黄粉色诺卡氏菌的最佳脱壁时间分别是65 min和100 min.用聚乙二醇促使两亲本菌的原生质体融合后,通过选择性培养基培养、菌落形态筛选、革兰氏染色观察、16S rRNA测序等方法,对融合菌株进行了初步鉴定.鉴定结果表明:融合菌株的菌落形态较两亲本发生了改变,为革兰氏阳性菌,通过16S rRNA基因序列比对,其与鰤鱼诺卡氏菌的同源性为99%.融合菌株的毒力较鰤鱼诺卡氏菌野生株有所降低.本研究为鰤鱼诺卡氏菌活疫苗的研制提供了新思路,对鱼类诺卡氏菌病的防治具有一定的潜在价值.
- 王英华陈建林徐亮张红莲夏立群
- 关键词:原生质体融合
- 生物化学课堂模块教学的构建
- 2020年
- 生物化学作为一门研究生命化学物质和化学反应的重要基础理论课程,不仅是食品相关专业、生物工程与生命科学等相关专业的基础课程,其原理、技术以及研究思维已经渗透到各个专业核心课程之中。该课程具有概念抽象、术语生僻和内容繁杂等特点,导致学生不好理解和掌握生化知识,而课程教学工作的好坏直接关系着学生能否掌握生物化学相关知识。此文就课程教学工作综合论述近些年来几种关于生物化学的考核模式及教学改革方法,为探索出更为高效且能够令学生牢固掌握该课程的教学考核模式和教学方法提供一些参考。
- 张锐张红莲庞春锦尚壮壮杜慧廖艳
- 关键词:生物化学模块教学
- 含油废水中絮凝剂产生菌DX-3的分离鉴定及特性研究被引量:1
- 2011年
- 从湛江市东兴炼油厂附近污水中分离筛选得到1株具有高絮凝活性的细菌,编号DX-3。经形态、生理生化和16S rDNA鉴定为Bacillus sp.。DX-3的絮凝特性研究表明,DX-3产生的絮凝剂为微生物胞外产物,絮凝活性成分主要分布在发酵液中;0.3 mL的菌悬液可使100 mL4 g.L-1高岭土悬浊液的絮凝率达到91.5%,对含油废水的絮凝率也高达85%。当温度为37℃、pH值为8、废水体积分数为60%时,DX-3菌株处理含油废水的COD去除率达37.2%、除油率达50.1%。
- 张红莲夏立群段东霞谢悦芬
- 关键词:絮凝剂产生菌含油废水芽孢杆菌属
- 新加坡石斑鱼虹彩病毒ORF086蛋白的原核表达、纯化及抗体制备被引量:2
- 2010年
- 新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)是导致石斑鱼养殖严重经济损失的主要病原体。本研究构建了含有新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)ORF086基因的重组表达质粒载体pET32a-ORF086,将其转化到大肠杆菌中进行融合表达,经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,证实重组大肠杆菌融合表达了SGIV ORF086蛋白。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isoprophl-thio-β-D-galactopyranoside,IPTG)浓度、诱导温度、诱导时间等诱导表达条件的优化,确定在0.7 mmol/L IPTG、16℃诱导14 h时可溶性SGIV ORF086重组蛋白占重组蛋白的60%。经镍琼脂糖凝胶柱纯化重组蛋白,纯化度达95%以上。用纯化的SGIV ORF086蛋白免疫小鼠,获得了高效特异的SGIV ORF086抗血清。
- 夏立群张红莲梁海鹰刘森林
- 关键词:原核表达多克隆抗体
- 鰤鱼诺卡氏菌HYD基因的克隆及亚细胞定位研究被引量:2
- 2018年
- 鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)是鱼类诺卡氏菌病的主要病原。鰤鱼诺卡氏菌水解酶(hydrolase,HYD)可能是鰤鱼诺卡氏菌的毒力因子。研究结果表明鰤鱼诺卡氏菌HYD的肽段不是分泌蛋白。亚细胞定位研究发现HYD-GFP融合蛋白均匀地分布在胖头鲤(FHM)细胞的细胞质中。亚细胞定位和过表达研究都显示HYD蛋白在FHM细胞中表达后,细胞核出现固缩浓染、凋亡小体等细胞凋亡特征,但Caspase-3活性检测表明HYD并未显著增加细胞凋亡水平。研究为进一步了解鰤鱼诺卡氏菌的致病机理奠定了基础。
- 陈建林陈建林鲁义善徐亮鲁义善徐亮
- 关键词:水解酶亚细胞定位
- RNA干扰技术抑制新加坡石斑鱼虹彩病毒感染细胞多肽ICP46与绿色荧光蛋白融合基因的表达被引量:3
- 2010年
- 新加坡石斑鱼虹彩病毒(singapore grouper iridovirus,SGIV)是一种严重的能引起全身性疾病的病原体,对石斑鱼养殖造成了重大的经济损失。将含有SGIV感染细胞多肽ICP46(infected cell polypeptides 46)基因的真核表达载体pEGFP-ICP46转染到胖头鲤细胞(fathead minnow cells,FHM)中进行融合表达,用荧光显微镜观察到ICP46-GFP融合蛋白主要分布于FHM细胞的细胞质中。根据SGIVICP46的序列,设计并体外化学合成了特异性干扰SGIVICP46的siRNA(siRNA-ICP46),与pEGFP-ICP46共转染到FHM细胞中,通过荧光显微镜观察不同时间点荧光强度的变化。转染后24~48h,实验细胞(共转染siRNA-ICP46和pEGFP-ICP46)和阳性对照细胞(共转染siRNA-GFP和pEGFP-ICP46)中的荧光微弱,发荧光的细胞数量较阴性对照(共转染siRNA-Negative和pEGFP-ICP46)少70%左右,但其后实验细胞和阳性对照细胞的荧光强度开始增强,在转染后72h其与阴性对照组已差别不大。说明体外化学合成的siRNA-ICP46转染后24~48h可有效抑制FHM细胞中外源导入SGIV ICP46基因的表达。
- 夏立群梁海鹰张红莲秦启伟
- 关键词:RNA干扰绿色荧光蛋白
- 石斑鱼虹彩病毒结构蛋白VP39的分子克隆与特性分析
- 新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)是近年从养殖石斑鱼中分离到的一种高致病性病原,可导致石斑鱼死亡率达90%以上,引起了巨大的经济损失。该病毒属虹彩病毒科(Irido...
- 张红莲夏立群曹剑豪公杰黄晓红黄友华秦启伟
- 关键词:结构蛋白
- 新加坡石斑鱼虹彩病毒ORF39L基因克隆、表达及抗体的制备
- 2018年
- 为研究新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)核心基因ORF39L在病毒侵染过程中的作用,制备了SGIV ORF39L表达蛋白的抗体;通过生物信息学软件预测SGIV ORF39L的抗原表位基因,并以所选抗原表位基因片段39Ag1和39Ag2构建原核表达质粒pET32a-39Ag1和pET32a-39Ag2;将质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达融合蛋白pET32a-VP39Ag1和pET32a-VP39Ag2;用所得融合蛋白分别免疫小鼠,获得了高效特异抗体39Ab1和39Ab2;利用制备的抗体进行间接免疫荧光试验,结果显示,VP39参与了SGIV的装配。本研究结果为进一步研究ORF39L基因在SGIV感染过程中的作用机制提供了数据资料。
- 张红莲夏立群秦启伟
- 关键词:克隆抗体间接免疫荧光
- 新加坡石斑鱼虹彩病毒(SGIV)ORF083L基因克隆与表达分析
- 最近15年来,脊椎动物虹彩病毒在全球各地爆发和流行,特别是在野生和养殖的鱼类及两栖动物中引起较高的发病率和死亡率.2003年,Qin等利用细胞培养方法,从养殖石斑鱼(Grouper Epinephelus tauvina...
- 张红莲秦启伟
- 关键词:克隆原核表达