张乐宜
- 作品数：37 被引量：76H指数：6
- 供职机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目广东省农科院院长基金“十二五”国家科技计划农村领域更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种猪葡萄球菌灭活疫苗及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种猪葡萄球菌灭活疫苗及其制备方法与应用。本发明所述的制备方法为将表达脱落毒素的猪葡萄球菌进行纯培养，然后加入甲醛进行灭活，甲醛的终浓度为体积百分比0.6％；得到灭活的猪葡萄球菌；再将灭活的猪葡萄球菌和佐剂混...
- 宋长绪张乐宜陈亚强蔡汝健李艳刘燕玲
- 文献传递
- 一种猪流行性腹泻病毒疫苗
- 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒疫苗，属于生物工程技术领域。其包括采用SEQ ID NO.1所示的核酸序列，或与SEQ ID NO.1所示的核酸序列具有95％以上同源性的核酸序列，编码所产生的具有相同功能的猪流行性腹泻病...
- 宋长绪郑继豪梁鹏帅刘燕玲张乐宜
- 一种可供PEDV复制用的原代子宫内膜细胞系及其分离方法
- 本发明公开一种可供PEDV复制用的原代子宫内膜细胞系及其分离方法，所述的原代子宫内膜细胞系通过以下步骤获得：（1）取健康的成年母猪子宫，用含有双抗的PBS缓冲液冲洗干净，剪开子宫内膜，PBSS缓冲液冲洗干净；（2）采取猪...
- 宋长绪洪林君刘献辉周臣张歆明徐舸刘燕玲张乐宜
- 文献传递
- 猪伪狂犬病毒的分离鉴定及其gE、TK全基因序列遗传变异分析被引量：7
- 2016年
- 将分离到的8种PRV分离株的g E、TK基因与国内外的毒株进行核苷酸及氨基酸的序列同源性分析,结果发现,分离毒株的gE、TK基因与15株国内外已发表的代表毒株核苷酸及氨基酸的序列同源性分别为97.3%~99.9%、98.7%~99.9%;遗传进化分析结果表明,分离毒株与国内近年分离自不同省份的代表毒株亲缘关系较近,与国外分离的代表毒株亲缘关系较远;而对gE、TK基因氨基酸主要变异位点分析表明,gE和TK基因都有一些位点已经发生突变。结果表明猪PRV广东部分地区分离毒株已发生变异,为规模化猪场对猪伪狂犬病的净化以及疫苗的选择提供参考。
- 王宇李段张乐宜刘燕玲王磊徐铮宋长绪
- 关键词：PRVTK
- 仔猪渗出性皮炎的实验室诊断和综合防治被引量：1
- 2013年
- 猪渗出性皮炎是由葡萄球菌属细菌引起的一种急性、超急性的高度接触性传染病,该病的主要特征是全身油脂样渗出性皮炎、破溃、结痂,可导致腹水和死亡。本文针对一例猪渗出性皮炎的病例,对其实验室诊断方法、防治措施进行了探讨。
- 陈亚强张乐宜彭津津
- 关键词：猪渗出性皮炎葡萄球菌
- 猪红斑丹毒丝菌GZ株的分离鉴定及序列分析被引量：4
- 2014年
- 2013年11月从广州某猪场发生急性败血症死亡的母猪心脏、肺脏、脾脏分离到1株病原菌，经形态学观察、培养特性、生化特性及16SrRNA、spaA基因测序，确定为猪红斑丹毒丝菌，命名为GZ株。结果表明，该菌株对阿莫西林、利福平、庆大霉素、头孢类抗生素高度敏感，对其他药物广泛耐药，对BALB／c小鼠的致死剂量为1．5×10^8cfu／mL。测序结果与NCBI收录的猪红斑丹毒丝菌进行Blast比对分析，16SrRNA基因与不同地区分离自人、蛋鸡、猪、白海雕、野猪、野兔、鼠等动物的同源性为95．9％～99．8％。spaA基因与NCBI收录的分离菌株核苷酸同源性为98．9％～99．9％，氨基酸同源性为99．5％，3处发生突变，其中，第36位缬氨酸突变为亮氨酸，第203位异亮氨酸突变为蛋氨酸，第257位亮氨酸突变为异亮氨酸；与1998年和2006年日本1a型Fujisawa株的核苷酸同源性最高，为99．8％，因此确定分离的GZ株为1a血清型。
- 张乐宜蔡汝健蒋智勇宋长绪
- 关键词：RRNA
- 1株猪葡萄球菌强毒株的分离鉴定及致病性试验被引量：13
- 2015年
- 为确定广东省增城某猪场产房仔猪暴发渗出性皮炎的致病菌,从病猪心脏、肺脏、病变皮肤分离并纯化细菌,经形态学观察,镜检,生化特性及gap基因的序列分析,确定为猪葡萄球菌,命名为ZC-4株。药敏试验结果显示该菌株对头孢拉定、头孢唑啉、新生霉素高度敏感,对头孢噻肟、万古霉素、庆大霉素中度敏感,对青霉素、阿莫西林、磺胺类药物、链霉素、恩诺沙星等均耐药。对分离株毒素基因进行检测,结果显示,分离株携带ExhA毒素基因,测序结果表明,其编码区全长为822bp,编码274个氨基酸;氨基酸序列与丹麦分离株ExhA基因(AF515453)的同源性最高,为99.6%;遗传进化分析显示,分离株所携带的毒素基因与参考菌株猪葡萄球菌ExhA毒素基因聚类紧密,位于一个小的分支内。分离株致病性试验结果显示,分离株接种25日龄健康断奶仔猪后24h,病猪耳根、四肢内侧、背部、腹部、臀部、尾根等部位出现蜕皮并露出有液体渗出的鲜红创面,继而皮肤形成一层厚厚的结痂,说明该菌株具有较强的致病性。本试验为猪葡萄球菌疫苗的研制及致病机制研究提供了理论依据。
- 李艳张乐宜宋长绪
- 关键词：猪渗出性皮炎猪葡萄球菌
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒华南株GDjm全基因组测序与遗传进化分析被引量：1
- 2020年
- 为监测猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)基因变异情况,对广东地区某猪场患有猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)仔猪的肺脏样品进行检测及病毒分离,在猪肺泡巨噬细胞(PAM)上成功分离1株病毒并命名为GDjm株,然而分离的毒株不能感染Marc-145细胞。全基因组进化分析、同源性比对及重组分析结果显示,GDjm属于重组毒株,与GDZS2016的同源性为96.2%,与中国高致病性毒株HUN4同源性为96.0%,与美洲型经典毒株VR-2332的同源性为87.4%,与NADC30同源性为82%,与欧洲型毒株Lelystad-virus同源性为57.9%。NSP2序列比对和同源性分析结果显示,GDjm与高致病性毒株HUN4、JXA1、JXwn06相似,在511、534~562位存在氨基酸缺失。GP5序列比对以及同源性分析结果显示,GDjm毒株在GP5抗原表位存在氨基酸突变。经重组分析得出GDjm株为高致病性毒株HUN4与华南地区流行毒株GDZS2016的重组毒株,重组区域为6723~9521 bp、11998~15019 bp。
- 张驰董建国于林洋王爽云范兰兰张乐宜刘燕玲王磊宋长绪
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒遗传进化
- 一种可用于猪伪狂犬病毒复制的猪滋养层系的感染鉴定
- 本发明公开一种可用于猪伪狂犬病毒复制的猪滋养层系的感染鉴定，采用永生化猪胚胎滋养层细胞作为一种新颖的细胞器来研究猪伪狂犬病毒和繁殖障碍疾病的联系，永生化的滋养层细胞系可高效/稳定的传代，且培养体系成熟。本发明的细胞系能支...
- 宋长绪刘献辉洪林君张歆明徐舸熊谋康张乐宜刘艳玲徐铮
- 文献传递
- 猪葡萄球菌脱落毒素ExhA的表达与纯化
- 2018年
- 为了研究猪葡萄球菌脱落毒素ExhA的生物学活性,试验以猪葡萄球菌的基因组DNA为模板,PCR扩增ExhA全基因序列,连接到pCold TF表达载体上,构建重组质粒pCold TF-ExhA,将重组质粒转入E.coil BL2（DE3）,IPTG低温诱导目的蛋白可溶性表达,重组表达的蛋白用Ni-IDA琼脂糖纯化树脂纯化,Western-blot及攻毒试验验证表达蛋白质的生物学功能。结果表明：成功构建了pCold TF-ExhA重组质粒,并且脱落毒素ExhA主要以可溶性形式表达,表达纯化的脱落毒素ExhA具有完整的生物学活性。说明表达的脱落毒素ExhA具有良好的抗原性。
- 张鹏飞申翰钦刘相聪刘燕玲张乐宜王磊宋长绪
- 关键词：葡萄球菌渗出性皮炎蛋白表达WESTERN-BLOT
