张乐
- 作品数：24 被引量：93H指数：5
- 供职机构：南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京市医学科技发展项目南京市卫生局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脂质体介导的VEGF_(165)基因转染对内皮细胞生长的作用被引量：3
- 2004年
- 构建血管内皮细胞生长因子基因VEGF165真核表达载体pcDNA3 VEGF165,以阳离子脂质体介导的基因转染技术 ,将基因转入原代培养的人脐静脉内皮细胞中。结果表明 ,基因转染 1h后细胞内就有VEGFDNA存在 ,VEGFmRNA水平显著上升 ;基因转染 2d后培养液上清VEGF蛋白表达显著上升 (135 5 12± 6 2 34)pg/ml和 (19 2 7± 2 96 )pg/ml,P <0 0 1。转染VEGF165基因 2d的内皮细胞再经程序降温冷冻保存复苏后 ,其存活率显著高于对照组 (pcDNA3 组 ) (90 13%± 2 84 %和81 5 2 %± 2 15 % ,P <0 0 5 ) ,凋亡率显著低于对照组 (7 15 %± 0 4 2 %和 17 6 1%± 1 5 6 % ,P <0 0 5 )。MTT法显示转染VEGF165基因能促进内皮细胞VEGF蛋白的表达 ,促进细胞增殖 ,抑制细胞凋亡。在治疗心脏及下肢动脉缺血性疾病中 ,VEGF165基因治疗可能具有重要的意义。
- 顾松刘长建孙雪梅张乐陈蕾蕾
- 关键词：脐静脉内皮细胞
- 单细胞反转录酶聚合链式反应技术对胰岛干细胞标记物胰岛素促进因子的鉴别
- 2006年
- 目的:利用干细胞分化获得胰岛细胞后目前还没有较理想的鉴别方法,实验通过单细胞反转录酶聚合链式反应技术鉴别胰岛干细胞标记物胰岛素促进因子,以建立一种检测胰岛干细胞的有效方法。方法:实验于2001-10/2005-08在加拿大多伦多大学和南京大学附属鼓楼医院完成。①将收集培养2～4周的单个胰岛干细胞用于实验。②胰岛活性测定实验中,选择1×106分化的胰腺干细胞,用低浓度和高浓度葡萄糖分别刺激1～4h,检测12,14,24d培养液中胰岛素的浓度。③单细胞反转录酶聚合链式反应检测胰岛素促进因子基因实验中,选择12个单个胰腺干细胞进行检测,另取12个单个未分化的干细胞作为对照。聚合链式反应体系为20μL。聚合链式反应扩增反应条件为94℃预变性4min,94℃变性30s,60℃退火30s,72℃延伸2min条件下循环35次。聚合链式反应产物以质量浓度为20g/L的琼脂糖凝胶电泳。结果:①分化的胰腺干细胞培养液中胰岛素浓度的检测:培养12,14,24d时培养液中胰岛素的浓度分别为42.6,68.2,73.5IU/L,随着时间的延长,呈逐渐升高的趋势。②单个胰岛干细胞胰岛素促进因子反转录酶聚合链式反应检测结果:12个单个胰岛干细胞中有7个胰岛素促进因子表达呈阳性,而作为对照的12个未分化干细胞均未检出,两者差异显著(P<0.001)。结论:采用单细胞反转录酶聚合链式反应检测方法为胰腺干细胞的鉴定和纯化提供了技术保障,证明单细胞反转录酶聚合链式反应是一种检测胰腺干细胞标记物的有效方法。
- 耿东进陈军浩陈蕾蕾张乐刘勇周锦勇顾香芳韩鹂
- 关键词：细胞分离胰岛素
- 青少年特发性脊柱侧凸患者雌激素受体基因多态性与骨密度的关系被引量：39
- 2006年
- 目的探讨青少年特发性脊柱侧凸患者雌激素受体基因多态性与骨密度的关系。方法取青少年特发性脊柱侧凸女性患者92例,年龄10～19岁,Cobb角25°～134°,应用聚合酶链反应限制性片段长度多态(PCRRFLPs)的方法分析雌激素受体基因型,同时用双能X线骨密度吸收仪分别对其腰椎(L24)和股骨近端(股骨颈、大转子、Wards三角)的骨密度进行测量。结果特发性脊柱侧凸患者雌激素受体基因型PvuⅡ多态性PP,Pp,pp型分别为19.6%,46.7%,33.7%,XbaⅠ多态性XX,Xx,xx型分别为22.8%,33.7%,43.5%;XX型的腰椎、股骨大转子和Wards三角的骨密度明显低于xx型(P<0.05),而PvuⅡ基因的各基因型与骨密度无关;联合分析PvuⅡ和XbaⅠ位点,PPXX基因型的腰椎、股骨大转子和Wards三角的骨密度明显低于Ppxx和ppxx型(P<0.05)。结论雌激素受体XbaⅠ基因多态性与特发性脊柱侧凸患者的骨密度有关,PPXX基因型的骨密度较低,有助于较早发现特发性脊柱侧凸的低骨量者。
- 吴洁邱勇张乐孙燕芳陈新
- 关键词：青少年特发性脊柱侧凸雌激素受体基因型多态性骨密度
- 一种医用器具灭菌装置
- 本发明涉及一种医用器具灭菌装置，包括灭菌箱体和放置口，所述灭菌箱体的顶板上开设有放置口，所述灭菌箱体上设置有封堵机构；本发明对现有的医用器具灭菌装置结构进行改进，改进后的医用器具灭菌装置结构设计合理，在放置医疗器具时，可...
- 张乐胡鹏
- 南京鼓楼医院引进博士科研绩效的现状分析被引量：5
- 2018年
- 目的通过对南京鼓楼医院引进博士的科研绩效进行分析，了解医院新引进博士科研现状及存在的问题．进而为提升青年博士科研能力提出合理化建议。方法采用描述性统计方法对医院新进博士的申报课题、成果等情况进行分析研究。结果国家自然科学基金青年项目中引进博士获得资助所占比例逐年上升（平均增长率为16．46％），25．33％的博士进院第一年后就申请到国家自然科学基金青年项目，但仍有40．14％的博士未获得国家自然科学基金项目，青年博士每年人均发表1．58篇SCI，平均占全院发表的19．93％，青年博士人院后科研成果少。结论创新博士医师培养方式，开展科研带教制度；完善科研平台建设，搭建博士医师的成长舞台；设立院级青年科研基金，提升博士医师科研积累；构建科研绩效考核制度，促进科研的积极性。
- 储召群周爱平张乐王亦欣戴玉田张冰王健
- 关键词：科研绩效
- 一种治疗肺动脉高压发病的葡萄糖基修饰的纳米制剂及其处方组成
- 本发明涉及一种治疗肺动脉高压发病的葡萄糖基修饰的纳米制剂及其处方组成，包括以下成分：药物、靶向葡萄糖基、聚乙二醇材料和纳米制剂，通过聚乙二醇材料将纳米制剂与靶向葡萄糖基连接。本发明的治疗肺动脉高压发病的葡萄糖基修饰的纳米...
- 李冰冰何伟祝玉玲俞春芳张乐
- 文献传递
- 青少年特发性脊柱侧凸患者骨组织中雌激素受体的表达被引量：6
- 2007年
- 目的:探讨青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者骨组织中雌激素受体的表达情况。方法:28例志愿者分为两组,其中AIS组患者18例,男3例,女15例,年龄12～18岁,平均(14.4±1.4)岁,Cobb角40°～125°,平均60.1°;先天性脊柱侧凸(CS)组患者10例,男6例,女4例,年龄11～19岁,平均(15.4±2.6)岁,Cobb角37°～120°,平均63.3°。术中取髂骨,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测骨组织中雌激素受体α(ERα)和β(ERβ)的表达情况。结果:AIS组和CS组患者骨组织中ERα mRNA和ERβ mRNA的阳性表达率均无显著性差异(P>0.05);AIS组中ERα mRNA和ERβ mRNA表达阳性患者中的相对含量分别为1.24±0.08和1.07±0.10,CS组为1.24±0.09和1.08±0.10,两组比较无显著性差异(P>0.05);但两组患者ERβ mRNA的阳性表达率与其Cobb角大小呈明显负相关(AIS组r=-0.613,P=0.007;CS组r=-0.648,P=0.043)、与Risser分级无关,ERα mRNA的阳性表达率与Cobb角、Risser分级无关,AIS患者的ERα mRNA和ERβ mRNA的阳性表达率与其Lenke分型无关。结论:AIS患者骨组织中ERα mRNA和ERβ mRNA的表达可能不是引起AIS的主要原因,但ERβ mRNA的表达可能对骨生长的调控作用较大,值得进一步研究。
- 吴洁邱勇张乐王斌俞扬朱泽章
- 关键词：青少年特发性脊柱侧凸雌激素受体骨组织
- HCCR1和HCCR2可溶性蛋白在细菌中表达、纯化及在早期肝癌诊断中的应用(英文)被引量：2
- 2006年
- 目的评估HCCR1和HCRR2克隆、细菌表达及可溶性蛋白的纯化及应用于早期肝癌诊断的可行性。方法cDNA克隆、表达、蛋白质的纯化、Westernblot分析用于评估HCCR1和HCCR2蛋白的生产,Elisa方法用检测血清抗原。结果HCCR1和HCCR2能够高水平地在细菌中表达,纯化的可溶性蛋白能用于生产抗体并应用于肝癌的早期诊断。结论HCCR1和HCCR2蛋白质可以在细菌中生产,并能成功地用于肝癌的早期诊断。
- 耿东进陈军浩顾香芳陈蕾蕾张乐刘勇韩鹂
- 关键词：肝细胞性肝癌重组蛋白
- microRNA与病毒感染
- 2009年
- microRNA是一类新近发现的由20-23个核苷酸构成的非编码RNA分子,它在生命进程中起着重要作用。病毒的复制和繁殖依赖于宿主细胞,而且对细胞环境的变化敏感。研究表明宿主和病毒都可以编码microRNA,病毒可通过小RNA介导的干扰作用影响宿主细胞,也能利用自身的"独特战略"改变宿主细胞从而满足自己生存的需求,所以,宿主与病毒间存在microRNA-mRNA相互作用的机制。尽管对microRNA与病毒感染的关系研究时间不长,但目前的研究结果为我们理解病毒和宿主之间的相互作用提供了一条途径,并为寻找病毒感染的生物标志物和治疗方法提供了新的思路。
- 张乐周乙华
- 关键词：病毒MICRORNA宿主细胞
- 普通成年人群隐匿性乙型肝炎病毒感染情况分析被引量：4
- 2009年
- 目的:调查普通成年人群隐匿性HBV感染率。方法:收集普通成年人血清1440份,ELISA检测HBV血清学标志物,分别设计HBV DNA不同区域的引物,用巢式PCR检测HBV DNA,对阳性标本进行DNA序列分析,并确定HBV基因型。结果:1440份血清中,HBsAg阳性70例(4.86%);HBsAg阴性的1370份血清中,3例(0.21%)至少2组不同特异性引物巢式PCR显示HBV DNA阳性。其DNA序列与基因库中已知HBV序列同源,证实了PCR产物的特异性,而各HBV DNA序列又不完全相同,排除了因污染造成的假阳性。3例隐匿性HBV感染中2例为基因型B型,另1例为C型。结论:普通成年人群存在隐匿性HBV感染。输血和器官移植时,仅以血清学标志物作为筛查HBV的手段,可能会引起HBV的传播。
- 刘勇张乐张乐朱天礼毕永春潘金顺
- 关键词：乙型肝炎病毒隐匿性感染巢式PCRDNA测序
