廖成水
- 作品数：182 被引量：276H指数：8
- 供职机构：河南科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 猪源A型和D型多杀性巴氏杆菌强毒菌株的生物学特性比较研究
- 赵战勤刘倩玉龙塔李静薛云刘志军廖成水
- 食源性病原菌激发固有免疫细胞胞外诱捕网的研究进展被引量：1
- 2021年
- 固有免疫细胞在外源物质刺激后向细胞胞外环境释放由染色质DNA和多种胞内颗粒蛋白组成的纤维样网状物质,称为胞外诱捕网(extracellular traps,ETs)。ETs是一种新型的宿主防御机制,能够捕获或杀灭病原菌,有效控制病原菌的扩散,从而使机体免受感染。大肠杆菌、沙门菌等食源性人兽共患病病原体引发的疾病是全球广泛关注的公共卫生问题。本文就食源性病原菌激发固有免疫细胞ETs的形成、ETs的生物学活性以及细菌部分蛋白对ETs形成的影响等研究进展进行综述,以期为食源性疾病的防控提供相关理论参考。
- 钱满廖成水张春杰
- 关键词：食源性病原菌防御机制
- cya/crp基因缺失对鸡白痢沙门菌生物学特性影响的研究
- 2023年
- 为了解crp/cya基因对鸡白痢沙门菌毒力和生物学特性的影响,本研究构建缺失1182 bp cya基因的重组自杀性质粒pREΔcya,并经酶切和测序鉴定正确后,转化大肠杆菌χ7213作为供体菌,分别以鸡白痢沙门菌C79-13株和本研究室前期构建的其crp基因缺失株C79-13Δcrp(简写为Δcrp)为受体菌,利用重组自杀性质粒介导的同源重组技术构建C79-13菌株的单基因缺失株Δcya以及双基因缺失株ΔcrpΔcya,并均经PCR和测序鉴定。将这3株菌连续传60代后每隔10代分别利用PCR鉴定cya基因缺失的遗传稳定性;利用玻片凝集试验鉴定各菌株的血清型,并鉴定各菌株的生化反应特性;绘制各菌株的生长曲线分析缺失株与亲本株的生长特性;通过微量结晶紫法检测各菌株的生物被膜(BF)形成能力。PCR和测序鉴定结果显示Δcya、ΔcrpΔcya均正确构建,且cya基因缺失均具有稳定的遗传性。血清型及生化鉴定结果显示,菌株Δcya、Δcrp、ΔcrpΔcya均保留了C79-13的O9血清型,而失去了发酵蔗糖、鼠李糖、葡萄糖、麦芽糖等糖类的能力。生长曲线及BF形成能力的检测结果显示,各缺失株的生长速度较亲本株相比均显著降低,尤其双基因缺失株ΔcrpΔcya的生长速度极显著下降(P<0.01),且基因缺失株BF的形成能力均极显著降低(P<0.01),其中双基因缺失株BF的形成能力更低。将3株缺失菌及亲本菌分别以不同的剂量(5×10^(8)cfu/只~7×10^(11)cfu/只)经腹腔注射感染雏鸡进行毒力试验,计算各菌株对雏鸡的半数致死量(LD_(50))。将各缺失株以10^(7) cfu/mL两次经灌服免疫雏鸡,100μL/只,二免后7 d各组雏鸡均以5.0×10^(8)cfu/mL经腹腔注射亲本菌株C79-13进行攻毒试验,500μL/只,在42 d的观察期内观察并记录各组鸡的发病及死亡情况,计算各基因缺失株对雏鸡的免疫保护率。结果显示,缺失株Δcya、Δcrp、ΔcrpΔcya对雏鸡的LD_(50)分别为2.84×10^(9) cfu/mL、1.41×10^(10)cfu
- 茹鹏辉王文婕钱满廖成水张春杰
- 关键词：鸡白痢沙门菌生物学特性
- 鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白FliC的表达纯化及其生物学特性的研究?
- 为研究鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白FliC 的生物学特性,利用PCR 方法扩增鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白FliC 基因,构建重组表达质粒pET-32a-FliC,经大肠杆菌Rosetta(DE3)表达、镍离子亲和层析法纯化后用SDS-...
- 田文静廖成水郁川余祖华张梦珂李婧张春杰程相朝
- 关键词：鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白FLIC巨噬细胞
- 猪源抗菌肽结构优化的研究进展
- 2022年
- 抗生素的大量使用甚至滥用导致细菌耐药性的产生和药物残留,进而对畜禽和人类健康造成了严重危害[1-22]。解决细菌耐药性和药物残留问题已成为世界各国科学家们的重要课题。我国农业部于2020年全面禁止饲料端抗生素的使用,后抗生素危机已经到来,开展新型抗菌药物的研究已迫在眉睫。
- 师帅兵陈亮亮王晓利廖成水
- 关键词：细菌耐药性抗菌肽抗生素结构优化畜禽
- 项目教学法在动物病理学实验课中的研究与探索
- 动物病理学是研究动物疾病病理形态学的一门学科,是兽医基础学科与临床学科互相衔接的一门桥梁课程[1]。大多数农业院校在所开设的动物病理学实验课中通常采用“教师示范,学生看片”的模式进行授课,在课堂上经常出现部分学生缺乏学习...
- 李静刘志军赵战勤程相朝龙塔廖成水
- 鼠伤寒沙门菌SL1344?cya平衡致死系统的构建及其雏鸡免疫保护试验
- <正>研究目的构建鼠伤寒沙门菌环化腺苷酸合成酶缺失株平衡致死系统,并对其生物学特性进行检测。材料方法本研究以鼠伤寒沙门菌SL1344?cya为亲本株,利用重组自杀性质粒(p REΔasd)介导的同源重组技术,经两步法缺失...
- 李静陈松彪张春杰程相朝龙塔李银聚赵战勤廖成水
- 文献传递
- 重组旋毛虫plancitoxin-1-like活性位点突变体蛋白的核酸酶活性
- 2017年
- 旋毛虫plancitoxin-1-like(Ts-Pt)是旋毛虫125种DNaseⅡ家族蛋白中唯一具有典型DNaseⅡ活性区域HKD基序的核酸酶,且普遍认为,组氨酸位点是DNaseⅡ的活性氨基酸位点。为研究Ts-Pt活性位点突变体蛋白的核酸酶活性,利用重叠PCR方法获得Ts-Pt活性位点突变体片段,以p ET-28a(+)为载体构建重组表达质粒并在大肠杆菌中诱导表达。重组Ts-Pt突变体蛋白经亲和层析纯化后进行SDS-PAGE分析。利用琼脂糖凝胶电泳法和核酸酶酶谱分析重组Ts-Pt突变体蛋白的核酸酶活性。成功构建含Ts-Pt突变体重组质粒的基因工程菌,SDS-PAGE和亲和层析纯化结果显示,重组Ts-Pt突变体蛋白呈包涵体表达。重组蛋白经复性后并没有表现出核酸酶活性,但核酸酶酶谱分析结果显示,包涵体表达的重组Ts-Pt突变体蛋白表现出降解DNA的能力。同时,N端和C端活性位点H及HCK和DHSK突变并不影响Ts-Pt的核酸酶活性,研究结果为进一步研究庞大的DNaseⅡ家族蛋白在旋毛虫发育和感染方面的作用提供一定的参考。
- 廖成水王晓利田文静张梦珂张春杰李银聚吴庭才程相朝
- 关键词：旋毛虫活性位点突变体核酸酶
- 低氧诱导因子-1α在旋毛虫感染过程中的动态变化
- 田文静廖成水郁川张春杰余祖华程相朝
- gga-miRNA-155对MDCC-MSB1细胞增殖的影响
- 2019年
- 【目的】构建gga-miRNA-155前体基因(pre-gga-miRNA-155)真核表达载体,验证gga-miRNA-155在MDCC-MSB1细胞中的表达效果,探究其对MDCC-MSB1细胞增殖的影响。【方法】采用PCR方法从鸡肝脏基因组DNA中扩增gga-miRNA-155前体基因片段pre-gga-miRNA-155,并将其克隆入pMD-18T载体,构建克隆载体pMD-18T-pre-gga-miRNA-155。用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切pcDNA6.2-GW/EmGFP-miRNA真核表达载体和pMD-18T-pre-gga-miRNA-155,将pre-gga-miRNA-155酶切回收片段与pcDNA6.2-GW/EmGFP-miRNA的酶切回收片段进行连接,构建重组真核表达载体pcDNA6.2-pre-gga-miRNA-155,对其进行PCR、EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切及DNA测序鉴定。将重组载体转染到MDCC-MSB1细胞中,应用实时荧光定量PCR (Real-time PCR)检测gga-mi-RNA-155的表达水平,利用MTT法检测细胞增殖能力的变化。【结果】PCR扩增获得了长度约154bp的鸡pre-gga-mi-RNA-155基因。成功构建了pre-gga-miRNA-155的真核表达载体pcDNA6.2-pre-gga-miRNA-155,瞬时转染MD-CC-MSB1细胞后gga-miRNA-155表达水平显著增加,且MDCC-MSB1细胞的体外增殖能力增强。【结论】成功构建了pre-gga-miRNA-155的真核表达载体,其可在MDCC-MSB1细胞中过表达gga-miRNA-155,且可促进MDCC-MSB1细胞的体外增殖。
- 余祖华丁轲丁轲贾艳艳郁川廖成水贾艳艳张梦珂何雷张春杰廖成水
- 关键词：细胞增殖
