孙芳
- 作品数：7 被引量：26H指数：3
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- 鸭心苹果酸脱氢酶的分离纯化及性质和功能基团研究
- 苹果酸脱氢酶(malatedehydrogenase，MDH)广泛存在于动物、植物以及微生物体内，是生物体进行糖代谢的关键酶之一，主要催化草酰乙酸和苹果酸之间进行可逆转化。根据辅酶特异性，MDH可分为NAD-依赖型MDH...
- 孙芳
- 关键词：苹果酸脱氢酶分离纯化酶学性质功能基团
- 文献传递
- 鸡心SOD的分离纯化及部分性质研究被引量：3
- 2013年
- 为从新鲜鸡心中获得锰超氧化物歧化酶的电泳纯制品并进行性质研究,将鸡机心匀浆,抽提,正丁醇除脂,丙酮分级沉淀,DEAE-Sepharose层析和Superdex-200层析结果为:酶的比活是1 633U/mg,纯化倍数是139.16,全分子相对分子质量是1.037×105,亚基相对分子质量2.63×104.该酶在50℃～70℃有较好的稳定性,最适温度是40℃,pH值在3～9之间有较好的稳定性.Ca2+、二硫苏糖醇、尿素对鸡心SOD有一定的激活作用,Ba2+和Zn2+对鸡心SOD抑制作用较弱,Cu2+抑制作用较强,低摩尔浓度乙二胺四乙酸二钠对酶有激活作用,高摩尔浓度有抑制作用.
- 任美凤胡瑞斌孙芳唐云明
- 关键词：SOD分离纯化
- 鸭心苹果酸脱氢酶功能基团的研究被引量：2
- 2014年
- 分别用对氯汞苯甲酸、苯甲基磺酰氟、N-溴代琥珀酰亚胺、琥珀酸酐、乙酰丙酮、溴代乙酸、N-乙酰咪唑、二巯基苏糖醇、氯胺-T等化学修饰剂对鸭心苹果酸脱氢酶进行修饰。结果表明:半胱氨酸巯基、色氨酸侧链吲哚基和丝氨酸羟基是鸭心细胞质苹果酸脱氢酶和线粒体苹果酸脱氢酶发挥活性的必需基团;而甲硫氨酸的硫醚基、组氨酸的咪唑基、精氨酸胍基、二硫键、酪氨酸的酚羟基、赖氨酸的ε-氨基与鸭心苹果酸脱氢酶活性不直接相关,不是酶活性中心的必需基团。
- 孙芳王红扬王洁李星唐云明
- 关键词：苹果酸脱氢酶功能基团化学修饰
- 浙江省高职院校“双师型”教师培养机制研究
- 高等职业教育是以培养“操作型、应用型”技术人才为主要任务的教育类型，从上世纪八十年代开始获得长足进步，发展至今已经成为我国高等教育产业中不可或缺的类型，也是职业教育体系中的重要组成部分。进入21世纪以来，我国的高等职业教...
- 孙芳
- 关键词：双师型教师师资队伍
- 鸭心苹果酸脱氢酶的分离纯化及酶学性质被引量：3
- 2013年
- 取新鲜鸭心,通过匀浆、硫酸铵沉淀、有机溶剂沉淀、DEAE-Sepharose层析以及Superdex-200层析等方法纯化,获得鸭心中所含的两种电泳纯的苹果酸脱氢酶同工酶（c-MDH和m-MDH）,并对粗酶液中含量较高的c-MDH进行酶学性质研究。结果表明：c-MDH和m-MDH纯化倍数分别为69.07倍和130.40倍,酶活力回收率分别为25.54%和10.98%,亚基分子质量分别为39.58ku和37.62ku。c-MDH酶学性质研究表明：该酶最适反应温度为55℃,在30℃以下时比较稳定;最适反应pH为7.2,在pH6-9范围内稳定性较好;其对草酰乙酸的K m值为140.93 mol/L;草酸、SDS、Cu2＋、Ag＋对该酶的抑制作用非常强烈,而Mg2＋、K＋、Ba2＋对该酶表现出明显的激活作用。
- 孙芳胡瑞斌任美凤唐云明
- 关键词：苹果酸脱氢酶分离纯化
- 韭菜酸性磷酸酶的分离纯化及酶学性质被引量：10
- 2013年
- 取新鲜韭菜,通过匀浆、缓冲液抽提、硫酸铵分级沉淀、CM-Sepharose离子交换层析、Superdex-200凝胶过滤层析等方法纯化,获得韭菜中所含的一种电泳纯的酸性磷酸酶(ACP)。经纯化后的酶溶液比活力为645.83U/mg,纯化倍数达到454.81倍,回收率为10.50%。酶学性质研究表明:该酶的分子质量约为58.97kD;最适反应温度和pH值分别为65℃和5.4;该酶对对硝基苯磷酸二钠(pNPP)的K m值为0.896×10-3mol/L;较高浓度的Mg2+、Mn2+对该酶的激活作用更强;抗坏血酸、甲醇、乙醇、氯仿、异丙醇、Cu2+、Ag+的浓度越大,对该酶的抑制作用越强。
- 孙芳任美凤胡瑞斌唐云明
- 关键词：韭菜酸性磷酸酶分离纯化
- 蒜苗过氧化氢酶的分离纯化及部分性质研究被引量：3
- 2013年
- 新鲜蒜苗经匀浆、缓冲液浸提、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、Superdex-200凝胶过滤层析,获得电泳纯的过氧化氢酶。该酶比活力达到25975.36U/mg,酶活回收率为40.05%,纯化倍数为125.97。该酶的全分子质量为234.93kD,亚基分子质量为59.16kD;最适温度为45℃,最适pH值为7.2,该酶在25～45℃及pH5.0～10.0的范围内有较好的稳定性;在最适条件下测得其Km值为38.2mmol/L;甲醇、乙醇、异丙醇及SDS、KSCN、Ag+、Cu2+、Mn2+、Co2+、Cd2+、Zn2+、Ca2+、Mg2+、Ba2+对该酶有抑制作用,Li+、Pb2+及低浓度K+对该酶具有一定的激活作用。
- 胡瑞斌孙芳任美凤唐云明
- 关键词：蒜苗过氧化氢酶分离纯化
