孙洁芸 作品数:7 被引量:22 H指数:3 供职机构: 重庆医科大学神经科 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市卫生局医学科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 电子电信 更多>>
过表达脑红蛋白对SH-SY5Y细胞损伤的神经保护作用及其机制 被引量:2 2013年 目的探讨过表达脑红蛋白(neuroglobin,NGB)对水溶性β-淀粉样蛋白片段1-42(beta-amyloid1-42,Aβ1-42)诱导的神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤的神经保护作用及其机制。方法将质粒pEGFP-NGB转染经Aβ1-42诱导损伤的SH-SY5Y细胞,MTT法检测NGB对损伤细胞存活率的影响;JC-1染色法检测NGB对损伤细胞线粒体膜电位的影响;免疫细胞化学法及Western blot法分别检测损伤细胞中细胞色素C(cytochrome C,cytoC)和caspase-3、caspase-9的表达水平。结果过表达NGB可明显提高Aβ1-42诱导损伤的SH-SY5Y细胞的存活率(P<0.05),抑制损伤细胞线粒体膜电位的降低(P<0.01),使损伤细胞内cytoC和caspase-3、caspase-9蛋白的表达水平均明显降低(P<0.05)。结论 NGB可通过抑制与细胞凋亡密切相关的cytoC、caspase-3和caspase-9等蛋白的表达而发挥其神经保护作用。本实验为阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)的治疗提供了实验依据。 张雄 孙洁芸 高敏娜 李昱关键词:脑红蛋白 SH-SY5Y细胞 细胞损伤 姜黄素影响N2a/APP695swe细胞中ABCA1表达的机制研究 被引量:3 2015年 目的:研究姜黄素(Curcumin)对N2a/APP695swe细胞钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)活性和三磷酸腺苷结合转运子A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)表达的影响;探讨Curcumin影响N2a/APP695swe细胞中ABCA1表达的可能机制。方法:MTT法分别检测1、5、10、20、40μmol/L Curcumin或0.1、0.5、1、2、4μmol/L CaN活性抑制剂环孢素A(Cyclosporin A,Cs A)对N2a/APP695swe细胞存活率的影响;依据MTT筛选结果,分为正常对照组、模型组、Curcumin组:5μmol/L Curcumin处理24 h的N2a/APP695swe细胞、Cs A组:0.5μmol/L Cs A处理48 h的N2a/APP695swe细胞。酶底物显色法检测CaN活性,real-time PCR、Western blot检测ABCA1表达水平的变化。结果:与未处理组比较,5μmol/L Curcumin组细胞存活率[(110.495±4.005)%]最高(P=0.023);0.1、0.5、1、2、4μmol/L Cs A组细胞存活率依次为(105.532±4.292)%、(115.211±4.826)%、(76.317±4.475)%、(69.177±5.267)%、(54.687±3.912)%,与未处理组比较,0.5、1、2、4μmol/L Cs A组差异均有统计学意义(P值依次为0.001、0.000、0.000、0.000);酶底物显色法显示与正常对照组[(18.519±1.664)nmol/mg]比较,模型组CaN活性[(24.488±3.041)nmol/mg]增加(P=0.007),Curcumin组[(16.717±2.055)nmol/mg]、Cs A组[(4.928±1.232)nmol/mg]CaN活性明显受到抑制(P值依次为0.002、0.000);real-time PCR和Western blot显示Curcumin组ABCA1表达量(real-time PCR:1.988±0.355;Western blot:0.294±0.015)高于模型组(real-time PCR:1.000±0.000;Western blot:0.175±0.008),差异有统计学意义(real-time PCR:P=0.009;Western blot:P=0.000);与模型组比较,Cs A组(real-time PCR:4.000±0.464;Western blot:0.470±0.016)的ABCA1表达水平增加(real-time PCR:P=0.000;Western blot:P=0.000)。结论:Curcumin能上调N2a/APP695swe细胞中ABCA1的表达,其机理可能与抑制CaN活性有关。 许可 向月 孙洁芸 张雄 李昱关键词:钙调神经磷酸酶 三磷酸腺苷结合盒转运子A1 姜黄素 环孢素A 血管性痴呆大鼠海马尼氏体和神经元核抗原的表达变化 被引量:6 2013年 目的:观察尼氏体和神经元核抗原(NEUronal Nuclei,NeuN)在慢性脑血流灌注不足大鼠海马中的分布和表达变化。方法:将60只SD大鼠随机分为模型组和假手术组,其中模型组50只,采用永久性双侧颈总动脉结扎术法建立血管性痴呆大鼠模型,再随机分为术后1、7、14、21和28 d组,每组10只;假手术组10只在麻醉后只分离双侧颈总动脉而不结扎。在不同时间点断颈处死大鼠,取大脑切片,分别用尼氏染色和免疫组化染色法观察大鼠海马神经元的变化。结果:与假手术组相比,模型组海马CA1区尼氏体和NeuN阳性表达细胞数在术后1d即减少(P<0.01),到术后14 d最少(P<0.01),而后又逐渐增加,但仍显著少于假手术组(P<0.01)。结论:在慢性脑血流灌注不足初期,海马神经元损伤可能是可逆的,为临床早期治疗慢性脑血流灌注不足患者提供理论依据。 李丹 孙洁芸 高敏娜 李昱关键词:血管性痴呆 海马 尼氏体 姜黄素通过Caveolin-1在AD中发挥神经保护作用的分子机制 目的:细胞膜小凹的标志蛋白Caveolin-1与阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)密切相关,它不仅与AD时胆固醇失衡有关,还参与裂解β淀粉样蛋白前体蛋白(amyloidβ-protein pre... 孙洁芸关键词:姜黄素 CAVEOLIN-1蛋白 神经保护作用 血管性痴呆大鼠模型中海马的组织病理学和超微结构变化 被引量:7 2013年 目的:通过光镜和电镜观察并探讨慢性脑血流灌注不足大鼠海马的组织病理学和超微结构的动态变化。方法:将60只SD大鼠随机分为模型组和假手术组,其中模型组50只,假手术组10只。模型组采用永久性双侧颈总动脉结扎术方法建立血管性痴呆大鼠模型后,再随机分为术后1、7、14、21 d组和28 d组,每组10只;假手术组麻醉后只分离双侧颈总动脉而不结扎。不同时间点断颈处死大鼠,取大脑,切片,分别在光镜和电镜下观察海马神经元的动态变化。结果:与假手术组相比,各模型组大鼠海马CA1区神经元数量均显著减少(P=0.000),其中术后14 d组海马CA1区神经元最少,超微结构显示神经元变性,核固缩,而后随着脑血流的恢复,海马神经元数量逐渐增加,神经元损伤有所改善。结论:在慢性脑血流灌注不足早期,海马神经元损伤是可逆的,为临床对慢性脑血流灌注不足患者进行早期治疗以预防血管性痴呆提供理论依据。 孙洁芸 余天平 张雄 李昱关键词:血管性痴呆 海马 组织病理学 超微结构 姜黄素对APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠海马神经元SR-BⅠ和ABCA1表达的影响 被引量:1 2014年 目的:观察姜黄素对β-淀粉样前体蛋白swe基因/早老蛋白1dE9基因(APPswe/PSEN1dE9)双转基因小鼠海马神经元B类Ⅰ型清道夫受体(scavenger receptor class B typeⅠ,SR-BⅠ)和三磷酸腺苷结合盒A1(ATP-binding cassette transporter,ABCA1)表达的影响,探讨姜黄素在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)防治中的机制。方法:将10只6月龄的APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠随机分为对照组和姜黄素饲喂组,每组5只。姜黄素饲喂组每天饲喂500 ppm姜黄素,6个月后采用免疫组化法检测小鼠海马神经元SR-BⅠ和ABCA1表达的变化。结果:与对照组相比,姜黄素饲喂组小鼠海马神经元ABCA1表达明显增加(t=-10.805,P=0.000),但2组小鼠海马神经元中均未见SR-BⅠ表达。结论:姜黄素能提高APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠海马神经元ABCA1的表达,而SR-BⅠ在神经元中未见表达。 孙洁芸 孙洁芸 滕志朋 李丹 张雄 滕志朋关键词:姜黄素 姜黄素对APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠学习记忆能力及大脑中Aβ_(42)表达的影响 被引量:4 2013年 目的观察姜黄素对APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠学习记忆能力和大脑β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)42表达的影响,探讨姜黄素在阿尔采末病(Alzheimer’sdisease,AD)防治中的作用。方法将20只6月龄APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠随机分为对照组和姜黄素饲喂组,每组10只。姜黄素饲喂组每天饲喂姜黄素(500 mg·L-1),6个月后采用Morris水迷宫实验方法及恐惧实验方法检测小鼠的学习记忆能力,采用免疫组化法检测小鼠大脑Aβ42表达的变化。结果与对照组相比,姜黄素饲喂组小鼠空间学习和记忆能力有明显改善(P<0.01),大脑中Aβ42表达明显减少。结论姜黄素能降低APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠大脑中Aβ42的表达,进而改善小鼠的学习记忆能力。 孙洁芸 李丹 王晨 田茗源 张雄 李昱关键词:姜黄素 MORRIS水迷宫 阿尔采末病