孙庆
- 作品数:27 被引量:42H指数:4
- 供职机构:扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 鸡组织中二甲氧苄啶和甲氧苄啶残留量的HPLC检测方法研究
- [目的]抗菌增效剂英能增强磺胺药利多种抗生素的疗效,已被广泛用于畜禽细菌性疾病和球虫病的防治.本研究旨在建立一种鸡组织中二甲氧苄啶、甲氧苄啶残留量的检测方法,以便将来为这类药物的在动物性可食用组织中的残留监控提供技术支持...
- 苑瑞瑞常婷婷张奥博孙庆卜仕金
- 文献传递
- 用反向遗传技术致弱基因VIId型鹅源新城疫病毒ZJI株
- 将新城疫病毒ZJI株基因组cDNA全长分成7个片段,依次连接并克隆至TVT7R转录载体中,构建了含ZJI株全基因组cDNA的转录载体(pNDV/ZJI),pNDV/ZJI与三个辅助表达质粒pCI-NP、pCI-P和pCI...
- 胡顺林张艳梅孙庆刘玉良吴艳涛刘秀梵
- 关键词:新城疫病毒反向遗传技术
- 文献传递
- 简化cDNA末端快速扩增技术测定基因Ⅲ、Ⅵb和Ⅶd型新城疫病毒基因组末端序列及分析被引量:2
- 2009年
- 【目的】简化cDNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNAends,RACE)流程,测定基因Ⅲ、Ⅵb和Ⅶd型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)基因组两侧末端序列,并对NDV的leader和trailer进行分析。【方法】利用T4 RNA连接酶将特定寡聚核苷酸片段的连接于病毒基因组RNA和cDNA,再利用RT-PCR或PCR方法对病毒基因组的末端进行快速的扩增。【结果】建立一套操作简单、低成本、可重复性高的RACE方法,测定了三种基因型5株NDV3’末端leader和5’末端trailer序列比对分析。【结论】本实验测定的鹅源VII型毒株JS/7/05/Ch基因组的15,184 nt由一个T变为了C,5’端trailer与3’端leader的连续互补序列由8 nt变为12 nt,而其它4株基因Ⅲ型和VI型NDV均未发现该突变。通过RNA的二级结构分析,NDV基因组和反向基因组RNA的3’末端形成一个发卡结构。JS/7/05/Ch等3株NDV U→C(T→C)的突变位于发卡环上,不影响二级结构的形成,发卡环的RNA序列突变为3’-UCUC-5’,与基因组3’端发卡环的3’-UCUUA-5’相似,推测可能影响了基因组RNA的复制速度。
- 仇旭升孙庆王伟伟董丽吴双胡顺林吴艳涛刘秀梵
- 关键词:新城疫病毒
- 两株基因Ⅲ型强毒新城疫的全基因组测序及其与Ⅰ系苗的亲缘性分析被引量:16
- 2009年
- 【目的】研究基因III型新城疫(Newcastle disease,ND)强毒分离株JS/7/05/Ch和JS/9/05/Go与中等毒力疫苗株Mukteswar的亲缘性关系,分析三株新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的全基因差异。【方法】采用RT-PCR方法获得两株NDV分离株的全基因组核苷酸序列,与GenBank中公布的Mukteswar序列比对分析。【结果】强毒分离株与中等毒力疫苗株Mukteswar全基因组核苷酸同源性均为99.7%;病毒6个阅读框核苷酸序列与Mukteswar同源性为99.6%~99.9%;预测的8种病毒编码蛋白同源性在98.8%~99.8%。然而,测定MDT,ICPI和IVPI发现JS/7/05/Ch和JS/9/05/Go毒力明显强于Mukteswar,其中JS/7/05/Ch株的IVPI达到了2.18。【结论】综合3株NDV的遗传分析结果和已有的流行病学资料可以推断分离株JS/7/05/Ch和JS/9/05/Go是由疫苗株Mukteswar自然进化而来的返强毒株。因此,必须停止使用中等毒力疫苗以免造成更大的危害。
- 仇旭升孙庆姚春峰董丽吴艳涛胡顺林刘秀梵
- 关键词:新城疫病毒全基因组
- 納川珠利的小鼠骨髓细胞微核试验分析
- [目的]通过检测納川珠利对体细胞的致突变性,对其遗传危害性做出初步评价,进而预测其致癌的可能性.[方法]50只清洁级昆明小鼠随机分为五组.其中受试药納川珠利设三个剂量组,经口灌服染毒剂量分别为1/2 LD50 (384 ...
- 孙庆陈秀云张奥博常婷婷卜仕金
- 文献传递
- 鹅源新城疫病毒拯救体系的建立被引量:8
- 2007年
- 参照GenBank上公布的鹅源新城疫病毒ZJI株全序列,设计8对引物,经RT-PCR法从尿囊液中扩增目的片段后,分别克隆进pCR2.1载体,将Ⅰ~Ⅶ7对引物的扩增片段依次亚克隆到TVT7R转录载体中,构建了含NDV全基因组cDNA的转录载体(pNDVZJI),将Ⅴ、Ⅵ和Ⅷ3对引物的扩增片段分别克隆进pCR2.1载体,并亚克隆到表达质粒pCI-neo上,构建了L基因的真核表达载体(pCI-L),pNDVZJI、pCI-L与另外两个辅助表达质粒(pCI-NP和pCI-P)共转染BSR-T7/5细胞,成功拯救出了具有血凝性的鹅源新城疫病毒,ZJI株鹅源新城疫病毒的成功拯救为后续相关研究工作的开展打下了基础。
- 胡顺林张艳梅孙庆刘玉良吴艳涛刘秀梵
- 关键词:新城疫病毒CDNA转染拯救
- 新城疫病毒HN蛋白抗原变异株的鉴定
- 新城疫病毒的基因组共编码6种结构蛋白,其中血凝素神经氨酸酶蛋白(HN)是NDV囊膜上最大的纤突糖蛋白,在免疫反应中扮演着重要的角色。HN蛋白有跨膜区、茎部和球状区三个部分组成,其中球状区分布了所有与单克隆抗体所识别的抗原...
- 胡顺林孙庆马怀良吴艳涛刘秀梵
- 文献传递
- 磺胺氯吡嗪钠、二甲氧苄啶溶液在鸡的药动学研究
- 36只健康肉鸡,随机分为3组,分别进行磺胺氯吡嗪钠、二甲氧苄啶溶液单剂量静注(60mg/kg.bw)和内服(60mg/kg.bw)以及磺胺氯吡嗪钠可溶性粉单剂量内服(60mg/kg.bw)后的药物动力学研究。利用高效液相...
- 郝增坤沈巍卜仕金孙晨明苑瑞瑞常婷婷孙庆张奥博周伟伟李勇军
- 关键词:肉鸡药物动力学高效液相色谱法
- 文献传递
- HA基因322位和329位氨基酸对H5N1亚型禽流感病毒毒力的影响被引量:7
- 2008年
- A/mallard/Huadong/S/2005(S,IVPI=2.65)和A/mallard/Huadong/Y/2003(Y,IVPI=0),是对麻鸭具有不同致病力的病毒。两病毒的HA裂解位点区有2个氨基酸差异,S病毒在HA裂解位点区322是Leu(L322),329位缺失(-329),而Y病毒322位是Gln(Q322),329位是Lys(K329)。根据这两个位点的差异,利用反向遗传系统,以S和Y病毒各自为骨架,拯救HA基因突变病毒,检测获救的突变病毒对麻鸭的毒力。可以得知,以S病毒为骨架,将S病毒HA基因322位Leu替换为Gln和(或)在329位添加Lys,以及用Y病毒的HA(Q322L,K329-)替换S病毒HA,获救的重组病毒对麻鸭亦完全无致病力;但以Y病毒为骨架,将Y病毒HA基因322位Gln替换为Leu和(或)在329位缺失Lys后,Y重组病毒对麻鸭的毒力上升。结果提示,S和Y病毒HA基因裂解位点区322和329氨基酸残基突变或缺失均影响病毒对麻鸭的致病力,且HA基因与其它基因的匹配性显著影响病毒对麻鸭的致病力。
- 唐应华吴培培孙庆彭大新张文俊李彦芳汪文斌龙进学张评浒刘秀梵
- 关键词:H5N1HA基因麻鸭致病力
- 纳川珠利的小鼠骨髓细胞微核试验分析
- 【目的】通过检测纳川珠利对体细胞的致突变性,对其遗传危害性做出初步评价,进而预测其致癌的可能性。【方法】50只清洁级昆明小鼠随机分为五组。其中受试药纳川珠利设三个剂量组,经口灌服染毒剂量分别为1/2 LD(384 mg ...
- 孙庆陈秀云张奥博常婷婷卜仕金
- 文献传递