周进明 作品数:24 被引量:80 H指数:6 供职机构: 第三军医大学西南医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 第三军医大学西南医院临床研究专项基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
结肠癌组织中Tiam1的表达与淋巴管生成之间的关系 被引量:10 2007年 目的:我们的实验旨在探讨T淋巴瘤侵袭转移基因1(T-cell lymphoma invasion and metastasis1,Tiam1)与结肠癌淋巴管生成的关系。方法:应用SP免疫组化法检测50例经4%甲醛固定、石蜡包埋结肠癌组织中Ti-am1、VEGF-C/D以及淋巴管密度(LMVD)的表达情况。结果:Tiam1阳性表达组VEGF-C阳性率为64.3%,Ti-am1阴性表达组VEGF-C阳性率为25.0%,二者差异有统计学意义,P=0.039;Tiam1阳性表达组LMVD为11.35±3.34,Tiam1阴性表达组LMVD为7.38±2.27,二者差异有统计学意义,P=0.002。结论:Tiam1过量表达可能与结肠癌淋巴管生成有关。 钟大平 彭秋平 边志衡 周进明 周琪 梁后杰关键词:TIAM1 淋巴管生成 内皮生长因子 地塞米松诱导结肠癌细胞凋亡的机制研究 2009年 目的:探讨地塞米松(Dex)体外抑制结肠癌细胞株的增殖并诱导其凋亡的作用机制。方法:采用MTT及流式细胞仪检测细胞增殖抑制及凋亡,RT-PCR检测GR、IκB及Bcl-2的表达改变,凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)检测Dex作用过程中的NF-κB活性改变。结果:Dex体外作用后,对4种结肠癌细胞株LoVo、HCT-116、HT-29及SW-480均有抑制作用,LoVo和HCT-116细胞作用最显著。流式细胞仪检测显示,Dex(1×10-4mol/L)诱导72 h后,在LoVo和HCT-116细胞检测到细胞凋亡和坏死峰,明显高于未加Dex的对照组,具有显著性差异。RT-PCR检测显示Dex作用后GRα、IκB表达升高,Bcl-2无明显改变,EMSA结果也显示NF-κB活性明显降低。结论:地塞米松可能通过上调GRα、IκB表达,抑制NF-κB活性来抑制LoVo细胞的增殖,并诱导其凋亡。 周进明 彭秋平 周琪 钟大平 黄树涛 施绍用 梁后杰关键词:结肠癌 糖皮质激素受体 细胞凋亡 地塞米松 阻断己糖激酶-Ⅱ基因表达对结肠癌化疗的影响及其机制 2009年 目的:观察阻断己糖激酶-Ⅱ(HK-Ⅱ)基因表达对结肠癌LoVo细胞化疗敏感性的影响及其机制。方法:应用质粒介导的短发夹RNA(shRNA)真核表达法特异性阻断HK-Ⅱ基因表达。通过半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法分析RNA干扰效应。MTT法检测氟尿嘧啶(5-FU)和奥沙利铂(L-OHP)对LoVo细胞的半数抑制浓度(IC50);底物比色法测定半胱氨酸蛋白水解酶(caspase)-3活性;Western印迹法检测胸苷酸合成酶(TS)表达变化。结果:RNA干扰技术特异性下调结肠癌LoVo细胞HK-Ⅱ基因表达,mRNA和蛋白质水平的表达抑制率分别为72.1%和71.2%。阻断HK-Ⅱ基因表达后,结肠癌LoVo细胞5-FU和L-OHP的IC50值分别为(4.70±0.40)μg/ml和(6.27±0.59)μg/ml,均明显低于正常培养细胞的(11.93±0.15)μg/ml和(9.77±0.60)μg/ml(P<0.01);与正常培养细胞相比,RNA干扰的LoVo细胞caspase-3活性明显增高,TS蛋白表达下降。结论:阻断HK-Ⅱ基因表达可能通过活化caspase-3和降低TS表达的途径来增加结肠癌LoVo细胞化疗敏感性。 彭秋平 潘凤 边志衡 李建军 周进明 周琪 梁后杰关键词:结直肠肿瘤 己糖激酶 糖酵解 RNA干扰 化学治疗 Tiam1-SiRNA质粒转染HCT116细胞对裸鼠移植瘤淋巴管生成的影响 2008年 目的研究Tiam1-SiRNA质粒转染HCT116细胞对裸鼠移植瘤中淋巴管生成的影响。探讨Tiam1与结肠癌淋巴管生成的关系。方法裸鼠10只随机分为对照组(n=5)和Tiam1-SiRNA组(n=5),将含Tiam1-SiRNA质粒的HCT116细胞进行裸鼠皮下接种,5周后处死动物,留取肿瘤标本。利用Western blot和免疫组化SP法检测Tiam1、Rac1、VEGF-C/D蛋白水平的表达,并进行肿瘤淋巴管染色计数。结果干扰组移植瘤中Tiam1、Rac1、VEGF-C、VEGF-D蛋白表达较对照组显著降低(P<0.01),肿瘤内淋巴管生成也显著减少(P<0.01)。结论通过RNA干扰技术抑制Tiam1的表达,在裸鼠体内可显著抑制移植瘤组织内淋巴管生成。 钟大平 梁后杰 张佳思 李焱 周进明 章容关键词:肿瘤淋巴管生成 抑制HK-Ⅱ对人结肠癌细胞增殖和化疗敏感性的影响及机制 被引量:1 2007年 目的:探讨抑制HK-Ⅱ对人结肠癌细胞增殖和化疗敏感性的影响及可能机制。方法:应用免疫组织化学法检测HK-Ⅱ在人结肠癌细胞中的表达;采用MTT法观察HK-Ⅱ抑制剂(3-BrPA)对人结肠癌细胞增殖的影响和化疗增敏效应;通过Hoechst33258染色,用共聚焦激光扫描显微镜观察3-BrPA诱导的细胞凋亡;用流式细胞术、紫外分光光度计分别检测细胞死亡率、线粒体膜电位和线粒体膜通透转换孔(PTP)开放的变化。结果:HK-Ⅱ在人结肠癌细胞中阳性表达。3-BrPA能明显抑制人结肠癌细胞增殖,小剂量3-BrPA增加化疗敏感性。3-BrPA可诱导结肠癌细胞凋亡,引起线粒体膜电位下降和PTP开放。结论:抑制HK-Ⅱ可能是通过影响线粒体膜电位和PTP来发挥抗肿瘤作用。 彭秋平 梁后杰 周进明 周琪 钟大平关键词:线粒体 地塞米松诱导结肠癌细胞凋亡的实验研究 被引量:3 2007年 目的:研究糖皮质激素受体(GR)在结肠癌细胞株Lovo、HCT-116、HT-29和SW-480中的表达,观察地塞米松(Dex)在体外对结肠癌细胞株的增殖抑制和凋亡诱导作用。方法:采用免疫组化、RT-PCR检测糖皮质激素受体(GR)在结肠癌细胞株中的表达;MTT、DNALadder和流式细胞仪等方法进行增殖抑制和细胞凋亡检测。结果:在4种结肠癌细胞株中只有Lovo和HCT-116表达GR。地塞米松在体外作用后,对4种细胞的增殖均有抑制作用,其中对Lovo和HCT-116细胞作用最显著。在Lovo细胞可检测到特征性的凋亡细胞DNA梯带。在流式细胞仪检测显示经1×10-4mol/LDex诱导72h后,在Lovo和HCT-116细胞检测到细胞凋亡,分别为(34.8±1.9)%和(33.6±1.4)%,明显高于未加Dex对照组的Lovo(2.9±0.4)%和HCT-116(6.4±1.3)%,差异有统计学意义(t值分别为28.934和22.980,P值均为0.000)。结论:结肠癌细胞株Lovo和HCT-116表达GR,地塞米松体外抑制Lovo和HCT-116细胞增殖,并诱导其发生凋亡,可能与GR相关。 周进明 梁后杰 彭秋平 钟大平 边志衡 何颖Tiam1基因沉默降低结肠癌细胞VEGF-C/-D的表达 被引量:2 2008年 目的探讨T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)的表达与结肠癌淋巴管生成的关系。方法将实验细胞分为3组,分别为未干扰组(HCT116)、空质粒载体对照组(HCT116/CN)和干扰组(HCT116/siRNA-Tiam1)。应用siRNA使Tiam1基因表达下调,通过RT-PCR检测Tiam1 mRNA表达抑制率,并用RT-PCR和Western blot方法检测Tiam1基因干扰前后VEGF-C/-D mRNA和蛋白的表达情况。结果通过筛选后稳定表达的情况下,siRNA组的Tiam1、VEGF-C/-D mRNA和蛋白的表达明显低于未干扰组。结论Tiam1参与了VEGF-C/-D表达的调节,推测Tiam1可能通过诱导VEGF-C/-D的表达影响结肠癌淋巴管的生成。Tiam1可作为结肠癌淋巴转移过程中一个有价值的指标。 钟大平 李焱 周进明 周琪 姜友昭 杨启红 梁后杰关键词:结肠癌 大肠腺瘤及其癌变微卫星不稳定性与细胞增殖的研究 2007年 目的:探讨微卫星不稳定性(MSI)在大肠腺瘤癌发生中的意义及其对大肠腺瘤、腺瘤癌变组织细胞增殖活性的影响。方法:采用聚合酶链反应-简单序列长度多态性(PCR-SSLP)及免疫组化EnvisionTM方法,对36例大肠腺瘤及12例腺瘤癌变的MSI和增殖细胞核抗原(PCNA和Ki-67)表达进行检测。结果:大肠腺瘤及其癌变组织MSI总阳性率18.75%(9/48),其中,两个位点以上7例阳性,阳性率为15.58%(7/48);一个位点2例阳性。MSI阳性大肠腺瘤及其癌变的PCNA和Ki-67标记指数显著低于MSI阴性者(P<0.05)。结论:MSI可能是结直肠癌发生的早期分子改变,MSI阳性结直肠癌细胞增殖活性较低。 周琪 阎晓初 梁后杰 周进明 吴峰 柳凤轩关键词:结肠直肠肿瘤 微卫星不稳定性 细胞增殖 糖皮质激素受体在结肠癌中的表达及临床意义 被引量:1 2007年 目的:研究糖皮质激素受体(GR)在结肠癌组织中的表达及其与核转录因子(NF-κB)和临床病理参数的关系。方法:运用免疫组化染色法检测61例结肠癌(包括42例不伴、19例伴淋巴结转移的原发灶)GR和NF-κB的表达情况。结果:在61例结肠癌组织中GR表达阳性率为57.4%(35/61),在高、中分化的结肠癌GR阳性率64.6%(31/48),明显高于低分化的30.8%(4/13);NF-κB在结肠癌中的阳性率为65.6%(40/61),与GR表达呈正相关(r=0.352,P=0.005)。结论:GR在结肠癌中表达可能与肿瘤的分化相关,与患者性别、年龄、肿瘤部位、Dukes分期及淋巴转移无关。GR将可能作为结肠癌病情发展和指导临床药物治疗的标记物之一。 周进明 梁后杰 周琪 彭秋平 钟大平 胡绍毅 何颖关键词:糖皮质激素受体 结肠癌 NF-ΚB 小鼠骨髓间质干细胞生物学性状及应用可行性研究 干细胞是指具有高度增殖和自我更新能力,并可分化为多种不同类型组织细胞的一类细胞.该文是研究利用MSCs进行创伤促愈项目的一部分,在建立小鼠骨髓MSCs体外分离培养体系的基础上,研究尾静脉移植的骨髓MSCs在创伤小鼠体内的... 周进明关键词:间质干细胞 分化 细胞治疗 基因治疗 文献传递