周晨妍
- 作品数:82 被引量:232H指数:9
- 供职机构:新乡医学院更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目河南省教育厅科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程医药卫生更多>>
- 生物工程专业《化工原理》课程教学改革的探索被引量:1
- 2015年
- 化工原理是生物工程专业的主干必修课程。结合近几年的教学实践,本文对生物工程专业开设的化工原理课程,对教学内容、教学方法和手段的改革进行了一些探索,取得了较好成绩。
- 杜晓娜关海燕周晨妍
- 关键词:化工原理教学改革多媒体教学
- 宇佐美曲霉木聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达与优化被引量:5
- 2007年
- 从宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001中克隆木聚糖酶基因xynⅡ,将不含原酶信号肽编码序列的xynⅡ以正确的读码框克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a中,构建成重组质粒pET-Xn并转化大肠杆菌,得到重组工程菌KN21。通过对其进行IPTG浓度、温度等诱导培养条件的优化后,胞内重组木聚糖酶活力最高达到81.77U/mg。对重组木聚糖酶进行酶学性质研究,显示其最适温度为45℃,最适pH为4.5。
- 白剑宇周晨妍王瑾邬敏辰
- 关键词:木聚糖酶宇佐美曲霉大肠杆菌重组蛋白
- 乳糖诱导木聚糖酶基因在大肠杆菌中的可溶性表达
- 2010年
- 以构建好的大肠杆菌工程菌BL21(DE3)/xylanase为研究对象,研究了以IPTG和乳糖作为诱导剂时重组蛋白的表达规律。在摇瓶发酵条件下研究了诱导剂浓度、诱导时机、诱导培养时间和诱导培养温度对目标蛋白表达的影响。实验结果表明,乳糖作为诱导剂时,重组菌产酶活力33.9 U/mg略高于IPTG作为诱导剂时重组菌产酶活力28.10 U/mg,这为乳糖作为诱导剂应用于重组大肠杆菌生产木聚糖酶提供了参考依据。
- 周晨妍符丹丹王卫杰曹利军丰慧根
- 关键词:木聚糖酶乳糖
- 一种琼胶酶融合酶工程菌株的构建方法
- 本发明提供一种琼胶酶融合酶工程菌株的构建方法,包括以下步骤:S1、质粒提取得到重组质粒Aga0917‑pMD19<Sup>T</Sup>和CBM13‑pUC57‑DH5α;S2、PCR扩增得到Aga0917基因片段和CB...
- 王燕崔彩霞张玉阳周晨妍刘婷威张瑶
- 酸性木聚糖酶XynⅡ活性中心关键氨基酸残基的鉴定被引量:2
- 2010年
- 目的:鉴定来源于宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的酸性木聚糖酶XynⅡ活性中心关键氨基酸残基。方法:对XynⅡ进行SWISS-MODEL同源建模和BLAST序列比较,分析XynⅡ中所有可能作为催化残基的保守氨基酸,采用定点突变手段对其进行鉴定研究。结果:只有Glu-79和Glu-170位于酶与底物作用的活性中心,它们分别位于β折叠股B6和B4上,推测Glu-79和Glu-170为XynⅡ活性中心关键氨基酸残基。将Glu-79和Glu-170突变为酸性的Gln,突变酶E79Q,E170Q在大肠杆菌和毕赤酵母中表达后,活性均丧失。结论:79位、170位Glu是木聚糖酶XynⅡ活性中心的关键氨基酸残基,为该酶进一步的结构与功能研究提供了理论基础。
- 周晨妍符丹丹丰慧根邬敏辰王武
- 关键词:宇佐美曲霉定点突变活性中心
- 木聚糖酶热稳定性分子改造的研究进展被引量:6
- 2014年
- 木聚糖酶广泛应用于食品加工、生物制药、酒的澄清及纸浆漂白等行业。热稳定性对于木聚糖酶在工业领域中的应用起着至关重要的作用。根据催化结构域的氨基酸组成不同,木聚糖酶主要分为F/10和G/11两大家族。本文主要就这两大家族木聚糖酶热稳定性分子改造的技术和方法作一综述,为进一步提高木聚糖酶的热稳定性提供参考。
- 李同彪周晨妍王丹丹
- 关键词:木聚糖酶热稳定性分子改造
- 突变木聚糖酶基因xynⅡC~*在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究被引量:2
- 2009年
- 对来源于宇佐美曲霉的高比活木聚糖酶xyn Ⅱ基因进行热稳定性改造,获得突变木聚糖酶基因xynI-IC-*ST4、xynⅡC-*ST5,将其分别克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K上,得到重组质粒,经SalI线性化后分别转化毕赤酵母GS115,xynⅡC*基因通过同源重组被整合到毕赤酵母染色体上,并处于酵母α因子的下游,经筛选获得阳性重组菌。获得的2个突变酶在热稳定性上比野生型酶都有不同程度的提高。突变酶ST4和突变酶ST5使酶的最适温度分别由原酶的50℃提高为52℃和55℃。55℃保温15min,ST4、ST5的残留酶活性由原酶的20%提高为65%和75%;保温1h,ST4、ST5的残留酶活性由原酶的15%提高为50%和65%。
- 周晨妍王武邬敏辰
- 关键词:宇佐美曲霉木聚糖酶毕赤酵母酶学性质
- 明胶载体固定化木聚糖酶技术的研究被引量:3
- 2013年
- 以明胶为载体,戊二醛为交联剂,采用包埋-交联法制备固定化木聚糖酶,探讨明胶浓度、戊二醛体积分数、交联时间和固定化时间对固定化酶相对酶活力的影响。通过正交实验确定木聚糖酶的最佳固定化条件,比较固定化酶与其游离酶的最适反应温度、热稳定性、最适反应pH及pH稳定性。研究发现,在明胶浓度为15%、戊二醛体积分数为4%、交联时间为1h和固定化时间为3h时,固定化酶的回收率可达72.56%,同时固定化和游离酶的最适温度分别为50、60℃,最适pH分别为3.6、4.6,pH稳定性及热稳定性有显著提高。
- 高启禹徐光翠李永佳刘瑞周晨妍
- 关键词:木聚糖酶戊二醛固定化酶
- 宇佐美曲霉E001菌株XynⅡ基因的克隆和融合表达被引量:1
- 2007年
- 以宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001株基因组DNA为模板,PCR扩增了编码木聚糖酶Ⅱ(Xyla-nases,XynⅡ)成熟肽的DNA片段。构建重组克隆质粒pUCm-T-XynⅡ,并以其为摸板,PCR扩增XynⅡ成熟肽的cDNA片段(555 bp),连接于表达质粒pGEX-5X-3的BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点间,构建重组表达质粒pGEX-5X-3-XynⅡ,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行检测。结果表明,XynⅡDNA中存在1个内含子,长度为51 bp;融合蛋白GST-XynⅡ主要以包涵体形式存在,相对分子质量约为50 ku,IPTG诱导1,3和5 h融合蛋白GST-XynⅡ的表达量分别约占菌体总蛋白量的12.6%,25.3%和32.1%。表明宇佐美曲霉E001菌株XynⅡ基因融合表达成功。
- 邬敏辰周晨妍李剑芳
- 关键词:宇佐美曲霉基因克隆
- 黑曲霉菌株产纤维素酶的固态发酵条件优化被引量:5
- 2015年
- 为提高纤维素的利用率,以麸皮、玉米芯为主要原料,采用单因素试验和L9(34)正交试验方法,分别研究碳源、氮源、表面活性剂、培养基初始pH、料水比、培养温度及时间对黑曲霉XZ-3S产纤维素酶的影响,并在此基础上研究黑曲霉XZ-3S产纤维素酶的最优固态发酵条件。结果表明:最优发酵条件为麸皮与玉米芯的比例6∶2,硫酸铵浓度4.0%,吐温-40 0.4%,发酵培养基初始pH 4.0,培养温度28℃,培养时间96h,培养基料水比1∶1.5。在该工艺条件下,CMC酶活性及FPA酶活性分别达273.56IU/g和135.61IU/g。
- 周晨妍朱新术王燕郭阳阳陈兆会
- 关键词:固态发酵纤维素酶黑曲霉