吴文德 作品数:58 被引量:185 H指数:6 供职机构: 广西大学 更多>> 发文基金: 广西壮族自治区自然科学基金 国家自然科学基金 广西大学博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
大片形吸虫幼虫的培育及其感染小鼠的研究 被引量:3 2014年 本试验旨在培育大片形吸虫囊蚴,着重研究大片形吸虫在中间宿主体内的发育过程和临床病理变化。人工培养和孵化大片形吸虫虫卵,用孵化出来的大片形吸虫毛蚴感染中间宿主小土蜗螺,收集大片形吸虫囊蚴,再用囊蚴感染试验小鼠。结果显示,囊蚴经口感染试验小鼠后1周即可在肝脏找到虫体,幼虫可在小鼠体内发育生存7~8周,随着时间的推移和感染囊蚴数量不同,可给小鼠肝脏造成不同程度的病变,甚至造成死亡。剖检小鼠可见肝脏质地脆,颜色发黄,脾脏肿大等严重病理变化。因此,可利用小鼠作为大片形吸虫幼虫感染的试验动物,进行片形吸虫病的早期诊断、免疫预防和治疗等方面的研究。 李雪 黄甜 朱丙伦 吴文德 魏志鹏 赵明龙 许心婷 陈汉忠关键词:大片形吸虫 毛蚴 囊蚴 小鼠 《兽医寄生虫学》网络课程的研制 被引量:6 2004年 为推动优秀教学资源的全国共享,我们紧密配合"新世纪教改工程",研制开发了《兽医寄生虫学》网络课程。应用计算机多媒体技术,发挥其超文本、超媒体、大容量、快速和交互性强的作用,在网上为畜牧、兽医学科大学本、专科教学提供自学为主和辅助课堂教学所需要的资源,建立一个具备开放性、交互性、共享性、协作性、自主性的兽医学学习平台。 黄维义 卢豫开 吴文德 刘福怀关键词:网络课程 教学资源 中兽医学实验教学项目的改革与优化 被引量:1 2011年 中兽医学做为动物医学专业课之一,随着教学改革的大潮进行了改革,以适应新的教学形势的需要。同时实验项目也进行了改革,保留了原有的验证性实验,同时增加了一些新的实验项目。这些项目与中兽医学的发展密切相关。经过三年多的教学改革和实验项目的调整优化,实践证明取得较好的效果。 吴文德 柏田生关键词:中兽医学 实验教学 罗非鱼无乳链球菌gap基因的原核表达及免疫原性研究 2023年 试验旨在探究罗非鱼无乳链球菌(GBS)膜蛋白gap的免疫原性。试验提取GBS的DNA,利用PCR扩增出gap基因,并与表达载体pET-28a-SUMO构建重组质粒,转化至大肠杆菌BL21;经IPTG诱导、SDS-PAGE分析和Western blot检测确定其表达效果。采用纯化的gap蛋白与弗氏佐剂乳化腹腔注射免疫罗非鱼,以间接ELISA法检测血清效价并使用GBS进行攻毒试验。结果显示,PCR扩增出1011 bp大小的单条带gap基因,与预期一致;重组载体pET-28a-gap在23℃、0.4 mmol/L IPTG、12 h条件下成功表达49.8 ku的可溶性蛋白;ELISA检测显示,重组蛋白gap能够产生较高的血清抗体效价水平,对GBS攻毒后的罗非鱼相对保护率为64.1%。研究表明,重组蛋白gap具有较好的免疫原性,为鱼类的链球菌病的预防提供新的理论依据。 杨洋 农源 陈林 孙彤彤 黄远城 李恭贺 郑喜邦 郑喜邦关键词:罗非鱼 无乳链球菌 原核表达 重组蛋白疫苗 主动免疫 绵羊和水牛实验感染大片吸虫后外周血白细胞计数的分析 被引量:3 2006年 对绵羊和水牛在感染大片吸虫后外周血白细胞总数计数和白细胞分类计数(嗜酸性细胞、嗜中性细胞、嗜碱性细胞、淋巴细胞和单核细胞)的特性进行研究。结果表明,绵羊对大片吸虫很不易感,水牛对大片吸虫很易感。未感染绵羊和水牛的白细胞总数有较大的差距,分别为5 956(±825)个细胞/mm3血液和12 657(±1 053)个细胞/mm3血液。未感染绵羊和水牛的嗜酸性细胞占白细胞总数的百分比小于5%。淋巴细胞占的比例最大,绵羊为59.5%,水牛达70.8%。感染绵羊和未感染绵羊的白细胞总数、嗜酸性细胞计数在感染过程中总体上存在显著差异,感染后绵羊的嗜酸性细胞的数量迅速升高,在感染后4周(4W P I)达到高峰。而感染水牛和未感染水牛白细胞总数差异不显著,但嗜酸性细胞存在显著差异,感染后水牛的嗜酸性细胞的数量升高缓慢,到8 W P I达到高峰。结果提示嗜酸性细胞在感染绵羊中更加有效地参与了杀灭大片吸虫。 张为宇 黄维义 卢秀红 吴文德 严红 郑启超关键词:大片吸虫 绵羊 水牛 白细胞 嗜酸性细胞 一种罗非鱼IgT单克隆抗体及其应用 本发明公开了一种罗非鱼IgT单克隆抗体及其应用,涉及生物技术领域。本发明具体公开了罗非鱼IgT重链恒定区CH2基因序列、氨基酸序列、重组蛋白免疫小鼠制备罗非鱼IgT单克隆抗体的方法。所述罗非鱼IgT单克隆抗体由杂交瘤细胞... 吴文德 陈林学分制下中兽医课程体系的建设和教学方法的改革 被引量:3 2011年 在学分制和教学改革的大潮下,为提高中兽医学的教学质量,把中兽医学课程从一门课程设置为三门课程,分别是中兽医基础,中兽药与制剂,兽医针灸学,建立系统的中兽医课程;教学方法也从传统的方法,改革为多媒体教学和基于问题的教学方法(PBL)。经过三年的实践取得较好的效果,同时也提出了一些问题。 吴文德 李秀芳 吴显实关键词:学分制 教学方法改革 胆囊检查法检查片形吸虫感染情况 被引量:3 2007年 通过检查从南宁市肉联厂收集的918个水牛胆囊、229个黄牛胆囊的病变和其中的虫卵与虫体,证明广西水牛片形吸虫的阳性率为57.24%,黄牛阳性率为52.8%,感染非常严重。调查发现黄牛和水牛在片形吸虫感染后肝脏和胆囊的病理变化表现出很大的差异,黄牛病理损伤轻,肝脏和胆囊中虫体少;水牛则肝脏和胆囊的病理损伤严重,肝脏和胆囊中虫体多。 王冬英 黄维义 张为宇 吴文德关键词:片形吸虫 水牛 黄牛 感染率 水牛瘦素基因的真核表达及生物学特性分析 被引量:1 2021年 为研究水牛瘦素(Leptin)的功能,构建leptin基因真核表达载体EGFP-leptin,检测leptin在NIH/3T3细胞中的表达并分析其生物学特性。根据水牛leptin基因序列设计引物,并在上下游引物分别添加HindⅢ和BamHⅠ酶切位点,以pMD18-T-leptin载体为模板,PCR扩增leptin基因,并亚克隆至载体pEGFP-N1,以双酶切和DNA测序鉴定EGFP-leptin重组质粒;然后采用脂质体2000将重组质粒转染到NIH/3T3细胞,经G418筛选,获得稳定转染的细胞株,RT-PCR及Western blot检测EGFP-Leptin融合蛋白表达。动物试验分3组,处理组从小鼠尾静脉注入重组质粒1μg/只,对照组和禁食组注射等体积生理盐水,3 d后称其体质量,采用ELISA法测定小鼠血清中Leptin水平。结果显示,成功构建真核表达载体EGFP-leptin,转染NIH/3T3细胞后出现绿色荧光;RT-PCR和Western blot进一步证实了Leptin表达。动物试验显示,处理组和禁食组小鼠体质量下降速率高于对照组,差异显著(P<0.05),处理组血清Leptin水平高于对照组,差异显著(P<0.05)。以上结果表明,EGFP-leptin能够在NIH/3T3细胞中稳定表达,产生的融合蛋白具有良好的生物学活性。 李恭贺 陈秋玉 吴文德 郑喜邦关键词:水牛 瘦素基因 真核表达 细胞株 生物学活性 人γ干扰素转座子质粒构建及其在HEK293T细胞中的表达 2021年 [目的]克隆人γ干扰素(hIFNγ)基因,借助自剪切肽P2A,构建hIFNγ-P2A-RFP(红色荧光蛋白)融合基因转座子表达载体,并在HEK293T细胞中检测其表达水平。[方法]首先,以脂多糖(LPS)激活人外周血淋巴细胞,提取总RNA,经RT-PCR扩增hIFNγ基因;再通过重叠延伸PCR,获得hIFNγ-P2A-RFP融合基因,并将其插入PB002G转座子载体。经双酶切和DNA测序鉴定,将重组质粒转染HEK 293T细胞,荧光显微镜观察RFP表达,Western Blotting检测hIFNγ蛋白表达。[结果]克隆了hIFNγ基因,成功构建了PB-hIFNγ-P2A-RFP重组质粒;荧光显微镜观察发现RFP在HEK 293T细胞表达,转染效率达39.3%;Western Blotting检测显示,特异性蛋白条带约为21 kDa,与预期的hIFNγ蛋白大小一致。[结论]成功构建了人γ干扰素PB转座子真核表达质粒,该质粒在HEK 293T细胞中高效表达。 陈秋玉 徐闰 刘灵康 韦茏芹 吴文德 郑喜邦 李恭贺关键词:重叠延伸PCR PIGGYBAC转座子