吴宇阳
- 作品数:12 被引量:21H指数:3
- 供职机构:河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪TOLL样受体7全基因的扩增、克隆及生物信息学分析被引量:4
- 2013年
- 根据猪Toll样受体7基因(TLR7)序列设计、合成1对引物,直接从三元猪外周血淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术扩增三元猪TLR7全基因,并进行克隆和测序。测序结果表明,获得了三元猪TLR7全基因序列,其大小为3 160 bp,包含一个完整阅读框(3 153 bp),编码1 051个氨基酸残基,有15个潜在的N-糖基化位点和4个潜在的磷酸化位点,信号肽切割部位位于第29~30位氨基酸之间,跨膜基因序列为第844~866位。TLR7基因存在种属的差异性,亲缘关系越近,同源性越高。三元猪TLR7基因的成功克隆为进一步研究猪TLR7基因表达、生物学功能、揭示ssRNA病毒入侵宿主的致病机制以及猪抗病毒免疫及育种的相关研究奠定了基础。
- 钞安军吴宇阳李坤卢权威崔保安陈红英
- 关键词:三元猪克隆进化分析
- 猪圆环病毒2型和猪细小病毒混合感染的PCR检测被引量:1
- 2013年
- 2012年9月河南省新乡市某养猪场发生一例以初产母猪流产、死产,断奶仔猪精神沉郁、呼吸困难、食欲不振、轻微腹泻、渐进性消瘦为特征的疾病。采用PCR技术进行检测,结果表明猪圆环病毒2型和猪细小病毒均为阳性,结合发病情况、临床症状及剖检变化,初步确定为PCV2和PPV混合感染。
- 吴宇阳陈龙彪王林青崔保安卢权威钞安军李坤陈红英魏战勇
- 关键词:猪圆环病毒2型猪细小病毒PCR检测
- 猪细小病毒河南地方株HP104的分离鉴定与生物学特性的研究
- 猪细小病毒(Porcine parvovirus, PPV)是引起母猪繁殖障碍的主要病原体之一。能够导致受感染母猪产出死胎、畸形胎、木乃伊胎及病弱仔猪,同时还会引起仔猪皮炎症状、非化脓性心肌炎和消瘦性综合征。猪细小病毒又...
- 吴宇阳
- 关键词:猪细小病毒全基因组病毒增殖
- 文献传递
- 猪细小病毒河南分离株全基因组克隆及序列分析被引量:4
- 2015年
- [目的]进一步了解河南地区猪细小病毒(PPV)的变异特点。[方法]利用PCR方法,对河南郑州、周口、济源等地采集的疑似PPV感染的病料进行检测。PCR检测为阳性的病料经处理后,同步接种猪睾丸细胞盲传6代,对4株PPV全基因组进行分段克隆及测序,并与Gen Bank登录的国内外PPV流行株全基因组进行比较。[结果]获得的4株PPV全基因组序列全长均为4 679 bp。4个毒株之间的核苷酸同源性介于99.6%-99.8%,与其他毒株间核苷酸同源性为98%-100%,遗传进化较为稳定。[结论]为PPV在河南地区分子流行病学调查及遗传变异分析奠定了基础。
- 陈龙彪高晓云吴宇阳冯亚琼陈红英崔保安马世杰郭官鹏
- 关键词:猪细小病毒全基因组克隆
- 一种猪细小病毒毒株
- 本发明公开了一种猪细小病毒毒株,猪细小病毒(Parvoviridae),CCTCCNO:V201313。本发明采用PCR方法对河南地区采集的疑似PPV病料进行PCR检测,通过接种猪睾丸(ST)细胞分离到1株病毒,命名为H...
- 崔保安陈红英吴宇阳陈龙彪魏战勇李新生
- 文献传递
- 猪细小病毒河南地方株HP104的分离与生物学特性鉴定被引量:3
- 2013年
- 采用PCR方法对河南采集的疑似PPV病料进行PCR检测,PCR检测为阳性的病料接种猪睾丸细胞,分离到1株病毒,命名为HP104。通过观察细胞病变(CPE)、病毒滴度TCID50和血凝效价的测定、理化特性试验等研究病毒的特性,利用电镜观察病毒的形态,NSI基因PCR扩增及测序分析。该病毒在sT细胞上连续盲传10代后,细胞出现了较稳定的CPE,传代至第15代时病毒血凝效价基本稳定为2,到第20代时TcID50达到10TCID/0.1mL左右。该毒株对热、pH3.0酸、氯仿、胰蛋白酶有抗性。在电镜下可观察到近似球形的病毒粒子,大小约23~26nm。PCR扩增产物与预期一致,与其他PPV毒株NSI基因序列同源性高达99%以上。该病毒特征与猪细小病毒特征基本相符,初步证实分离的病毒为猪细小病毒。
- 吴宇阳陈龙彪崔保安王林青卢权威钞安军李坤魏战勇陈红英
- 关键词:猪细小病毒
- 猪细环病毒两种基因型双重PCR检测方法的建立被引量:3
- 2013年
- 为建立检测猪细环病毒两种基因型(PTTV1和PTTV2)的双重PCR方法,本研究根据GenBank中PTTV1、PTTV2的UTR基因序列,设计合成了2对特异引物,并通过对扩增条件的筛选,建立了PTTV1和PTTV2的双重PCR检测方法。该方法可以同时扩增PTTV1的324 bp和PTTV2的522 bp特异性片段,而扩增猪圆环病毒2型和猪细小病毒DNA结果均为阴性,对PTTV1和PTTV2的最低检出量分别为100 copies和10 copies。该方法适合对PTTV1和PTTV2的联合检测。
- 李坤钞安军王子馨王淑娟朱前磊吴宇阳卢权威陈红英
- 关键词:双重PCR
- 猪细小病毒河南分离株全基因组克隆及序列分析
- 引言猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是引起母猪繁殖障碍的主要病原体之一,主要表现为胎儿和胚胎的感染和死亡。PPV又常同猪伪狂犬病毒(PRV)、乙型脑炎病毒(JEV)、猪圆环病毒(PCV)、猪瘟(...
- 陈龙彪高晓云冯亚琼陈红英崔保安郭官鹏马世杰吴宇阳
- 关键词:PPV全基因克隆
- 2株猪圆环病毒2型的分离鉴定及全基因组序列分析被引量:6
- 2013年
- 【目的】对河南部分地区疑似猪圆环病毒2型(Porcinecircovirustype2,PCV2)感染猪进行病毒分离鉴定,并对分离株的全基因组序列进行分析。【方法】对郑州、焦作两地疑似PCV2感染的猪淋巴结、脾脏和肺脏组织进行PCR检测,对检测为阳性的病料进行PCV2的分离,利用间接免疫荧光试验和PCR扩增进行初步鉴定。用PCR扩增PCV2全基因,经克隆、测序后,用MEGA5.1软件对克隆的序列与GenBank上获取的其他PCV2全基因组进行序列比对。【结果】分离到2株病毒,分别命名为ZHENGZ-12株和JIAOZ-12株。间接免疫荧光试验结果显示,感染病毒的细胞出现了特异的亮绿色荧光。2个分离株全基因组长度均为1767bp,与国内外PCV2参考毒株核苷酸序列同源性为92.6%~99.9%,2个毒株之间的核苷酸序列同源性为96.0%,与PCV1核苷酸序列同源性分别为74.6%和77.7%。系统进化树分析结果显示,2个PCV2分离株同国内外分离株的亲缘关系很近;PCV2核苷酸序列比较稳定,其进化不存在明显的地域相关性。【结论】初步证实分离病毒为PCV2,ZHENGZ-12株基因型为PCV-2a,JIAOZ-12株基因型为PCV-2b。
- 卢权威郭官鹏崔保安陈红英魏战勇郭敬吴宇阳李坤钞安军
- 关键词:猪圆环病毒2型病毒分离全基因组
- 猪细小病毒河南地方株HP104的分离与鉴定
- 目的近年来,猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)感染和造成的危害呈上升趋势,给养猪业造成了巨大的经济损失。为查明病原及其特性,做好本地PPV的防制工作,我们对某猪场出现大量死胎、木乃伊胎的猪死胎采集...
- 王林青吴宇阳崔保安
- 关键词:猪细小病毒