吕照江
- 作品数:24 被引量:96H指数:6
- 供职机构:北京协和医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 遗传性球形红细胞增多症研究进展被引量:1
- 1995年
- 遗传性球形红细胞增多症研究进展吕照江,张之南遗传性球形红细胞增多症(HereditarySpherocyto-sis简称球贫或HS)是一种常见的溶血性贫血,儿童更多见,在北欧的发病率高达1/5000,国内也有不少病例报告。近年,对HS的发病机制的分子...
- 吕照江张之南
- 关键词:溶血性贫血
- 嗜水气单胞菌hec毒素溶血试验诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症被引量:6
- 2000年
- 目的 研究嗜水气单胞菌hec毒素对红细胞的作用 ,为阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)的临床诊断提供一种新方法。方法 从患暴发性传染病的家养鲫鱼分离到嗜水气单胞菌 ,其培养上清经硫酸铵沉淀获得粗提毒素 ,经DEAE纤维素层析得提纯毒素。粗提毒素作用于PNH和其他贫血患者及正常人的红细胞 ,采用 96孔板在波长 6 30nm酶标仪比色 ;同时用CD59单抗和FITC标记的羊抗鼠IgG标记红细胞 ,以流式细胞仪分析毒素作用前后CD59标记率。结果 对 15例PNH患者、15名正常人、15例非PNH贫血患者的红细胞 ,进行hec毒素试验 ,发现毒素在 0 .12 5g/L、37℃作用 2 0min后 ,正常人和非PNH贫血患者的红细胞完全溶解 ,而PNH患者存留红细胞的百分率与CD59标记率成反比。毒素作用前后流式细胞仪检测结果表明 ,毒素可以特异地作用于CD59阳性细胞。结论 PNH患者的红细胞比其他非PNH贫血患者及正常人的红细胞有明显的抗毒素溶破作用 ,且毒素作用后存留细胞的百分数反映CD59标记率 ,故可作为PNH诊断的敏感、特异、简便可行的新诊断方法。
- 刘海丽许彩民吕照江陆承平潘华珍张之南
- 关键词:阵发性睡眠性血红蛋白尿嗜水气单胞菌
- 磁珠双阳性分选法在阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者骨髓CD34^+CD59^+细胞体外扩增的应用被引量:4
- 2003年
- 应用磁珠双阳性分选法在体外扩增阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)患者的CD34+ CD5 9+ 细胞 ,为实现PNH患者进行临床自体骨髓移植 (ABMT)或自体外周血干细胞移植 (APBSCT)奠定基础。流式细胞术分选虽然经常用于细胞纯化 ,但难于满足大规模临床细胞分选的需要。本研究利用免疫磁珠系统 ,应用隔夜孵育法去除第一次分选时CD34+ 细胞吸附的磁珠 ,经过两次磁珠双阳性分选 ,从PNH患者骨髓中分离出足够数量的CD34+CD5 9+ 细胞 ,用于体外培养扩增。结果显示 :磁珠双阳性法分选的CD34+ CD5 9+ 细胞与磁珠 流式细胞术二步分选法比较 ,在细胞生存、增殖、扩增及形成造血集落形成单位 (CFU )的能力上均无显著性差异。结论 :磁珠双阳性分选法可能推广应用于其它双阳性或多阳性细胞的分离纯化 ,尤其是造血干
- 肖娟武永吉张之南吕照江陈实平董红燕
- 关键词:阵发性睡眠性血红蛋白尿症骨髓移植干细胞移植
- 阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者骨髓CD_(34)^+CD_(59)^+细胞与CD_(34)^+CD_(59)^-细胞生物学性能的研究被引量:10
- 2003年
- 目的 探讨阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)患者CD34+ CD59+ 细胞的特性及PNH克隆呈优势造血的可能原因 ,以探索PNH发病的内在机制。方法 用免疫磁珠吸附法富集纯化CD34+ 细胞 ,再用流式细胞仪分选出PNH患者的CD34+ CD59+ 细胞、CD34+ CD59- 细胞及正常对照CD34+ 细胞。分别进行体外扩增液体培养 2周 ,并对扩增前、后的细胞进行半固体培养。结果 ①PNH患者CD34+CD59+ 细胞与正常对照CD34+ 细胞形成集落形成单位 (CFU)均在第 7天达到扩增高峰 ,并且扩增后的细胞仍能保持CD59抗原 ,无GPI锚连蛋白的丢失。②正常对照的CD34+ 细胞在生存、增殖、形成CFU及扩增能力上均明显强于PNH患者的CD34+ CD59+ 细胞及CD34+ CD59- 细胞。③PNH患者CD34+ CD59+ 细胞及CD34+ CD59- 细胞体外半固体培养 ,其形成CFU的能力无明显差异。④PNH患者CD34+ CD59+ 细胞及CD34+ CD59- 细胞在SCF +IL 3 +IL 6 +FL +Tpo及SCF +IL 3+IL 6 +FL +Tpo +Epo组合下液体培养 ,其生存、增殖、扩增等能力上均无明显差异。但在SCF +IL 3+IL 6 +FL +Tpo +Epo +GM CSF组合下液体培养 ,CD34+ CD59- 细胞的生存、增殖、扩增能力均明显强于CD34+ CD59+ 细胞。结论 ①正常对照的CD34+ 细胞在生存、增殖。
- 肖娟武永吉张之南吕照江陈实平董红燕
- 关键词:阵发性睡眠性血红蛋白尿症CD34^+细胞造血细胞生长因子
- PNH异常红细胞的计数及其意义被引量:3
- 1995年
- 采用乙酰胆碱酯酶(AchE)单抗结合荧光免疫标记红细胞,通过流式细胞仪直接对单个红细胞膜上AchE进行定量检测,发现阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者体内红细胞可分为两个类群,一群AchE含量正常(AchE(+)],一群AchE缺失[AchE(一)];AchE(-)红细胞百分率与蛇毒因子(CoF)诱发的补体溶血率呈正相关;经CoF诱发补体溶血后,仍可发现有对补体不敏感但无AchE的异常红细胞,说明对补体不敏感的红细胞仍有其它异常。本法有可能成为一种比补体溶血试验更灵敏、更特异并易定量的PNH诊断方法。
- 吕照江张之南许彩民潘华珍
- 关键词:阵发性睡眠性血红蛋白尿症红细胞计数
- PNH患者红细胞膜乙酰胆碱酯酶缺失的研究
- 1995年
- 用间接免疫荧光流式细胞术测定阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者和正常人红细胞乙酰胆碱酯酶(AchE)表达量,发现PNH的AchE表达远远低于正常,而且蛇毒溶血试验与AchE的缺失呈正相关。由于PNH正常和异常血细胞同时并存,为进一步研究PNH的AchE(-)红细胞,采用ProteinASepharose6MB结合AchE单抗亲和层析法分离出PNH的AchE(-)红细胞。用 ̄3H-肌醇标记实验证明,正常红细胞膜在区带4.1有较高放射活性,而PNH红细胞膜放射活性极低,PNH的AchE(-)红细胞膜完全无放射活性;用免疫印渍实验证明区带4.1是AchE存在部位。用酶联免疫方法直接检测PNH患者和正常人血浆中AchE含量,结果发现PNH患者血浆中有AchE存在,而正常人未能检出。
- 许彩民卢红吕照江潘华珍张之南
- 关键词:阵发性红细胞膜乙酰胆碱酯酶
- GPI-Pr缺失与阵发性睡眠性血红蛋白尿症粒细胞凋亡的关系
- 2001年
- 采用无血清培养诱导细胞凋亡 ,用Annexin V荧光试剂盒标记、PI标记、流式细胞仪检测 ,以及琼脂糖凝胶电泳分析DNA断裂等方法 ,研究糖基磷脂酰肌醇锚蛋白 (GPI Pr)缺失与阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)粒细胞凋亡的关系。结果显示 ,PNH粒细胞的凋亡率比正常人粒细胞的凋亡率明显为低 ;分析凋亡率与粒细胞的CD5 9缺失率之间的关系 ,未发现二者有相关性。结果表明 ,PNH的粒细胞比正常人粒细胞相对不易凋亡 ,粒细胞上GPI PrCD5
- 刘海丽许彩民刘复强吕照江吕照江潘华珍
- 关键词:阵发性睡眠性血红蛋白尿症CD59PNH粒细胞
- 应用流式细胞仪检测自身免疫性溶血性贫血的临床观察被引量:2
- 2003年
- 目的 :提高自身免疫性溶血性贫血 (AIHA)的诊断率。方法 :对正常人及AIHA患者的红细胞经单克隆抗体标记后 ,采用CoulterElite流式细胞仪技术测定并观察红细胞膜表面标记不同免疫物成分的百分数。结果 :正常人少数红细胞膜表面附有免疫物 ;直接抗人球蛋白试验 (Coombs试验 )阳性的AIHA患者 ,其阳性凝集反应程度与红细胞膜表面标记免疫物的百分数呈正比例关系 ;Coombs试验阴性的AIHA患者 ,其红细胞膜表面标记免疫物百分数明显低于Coombs试验阳性者 ,但高于正常人 ;Coombs试验阴性而怀疑为AIHA患者 ,其红细胞膜表面标记免疫物的百分数有很大的差异。结论 :采用流式细胞仪技术测定红细胞膜表面标记不同免疫成分百分数 ,灵敏度高 ,特异性强 ,可明显提高AIHA的诊断率和鉴别率。
- 许莹吕照江张之南
- 关键词:贫血溶血性自身免疫性流式细胞仪COOMBS试验
- 阵发性睡眠性血红蛋白尿症病人骨髓中正常及异常造血细胞Bcl-2及Bax表达的初步观察
- 1999年
- 观察了阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)病人骨髓中正常及异常造血细胞培养前、后Bcl-2及Bax的表达,并与正常对照作了比较,以探讨二者生存能力差异的可能机制。实验采用间接免疫荧光标记及流式细胞术检测。结果发现PNH病人骨髓中正常(CD59^+)及异常(CD59-)单个核细胞(BMMNC)培养前、后Bcl-2和Bax表达阳性率及Bcl-2表达的平均荧光强度值(MFI),与正常对照相比均无显著性差异,但Bax表达的MFI值则均较正常对照者显著升高,由此导致病人BMMNC的Bcl-2及Bax的MFI比值降低,但病人正常及异常BMMNC之间Bcl-2及Bax表达的MFI值则无显著性差异,表明PNH病人BMMNC Bax分子表达增多导致Bcl-2与Bax分子比例失衡可能是其较正常BMMNC生存能力降低的原因之一,而病人正常及异常BMMNC生存能力的差异除Bcl-2和Bax调节机制外,可能还涉及其它与细胞凋亡有关的步骤及环节。
- 李强张之南吕照江许彩民潘华珍
- 关键词:阵发性睡眠性血红蛋白尿症骨髓造血细胞单个核细胞BCL-2
- 应用PCR-Heteroduplex银染法检测阵发性睡眠性血红蛋白尿症PIG-A基因突变被引量:2
- 1997年
- 应用PCR-Heteroduplex银染法检测阵发性睡眠性血红蛋白尿症PIG-A基因突变许彩民杜涛杨洋傅新容吕照江陈忠雷张之南潘华珍多聚酶链反应-异源双链分析(PCR-Heteroduplex)是一种简便、灵敏的基因分析方法[1]。适用于克隆病单个碱...
- 许彩民杜涛杨洋傅新容吕照江陈忠雷张之南潘华珍
- 关键词:血红蛋白尿症PNHPCRPIG-A