刘金仙
- 作品数：14 被引量：70H指数：6
- 供职机构：武夷学院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家高技术研究发展计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 紫外线辐射的葡萄幼果cDNA文库的构建被引量：6
- 2007年
- 以紫外线辐射的葡萄幼果为材料提取总RNA,用SMARTTMcDNA文库构建试剂盒构建cDNA文库,初始文库含有1.5×106个独立的单克隆,扩增后滴度达到1.2×108pfu.mL-1.随机挑取噬菌斑进行PCR检测,发现重组率在92.9%以上.
- 夏信明刘金仙林明王育娜何水林
- 关键词：葡萄幼果CDNA文库紫外线辐射
- 利用改进的Oligo-Capping法构建甘蔗茎全长cDNA文库被引量：5
- 2009年
- Oligo-Capping法是目前全长cDNA文库构建的重要方法之一。笔者在引进、消化和吸收的基础上,通过对特异引物和接头序列的设计,及cDNA扩增反应条件的优化,对该方法进行了一些切实可行的改进,形成了一套简便易行的技术体系。利用本研究中改进的Oligo-Capping法,成功地构建了甘蔗茎全长cDNA文库。综合评价结果表明,本研究中所构建的甘蔗茎全长cDNA文库的库容大于2.5×106cfu,重组率为91%,全长率高达88.9%。本文库的构建为进一步甘蔗茎中全长基因的克隆和功能基因的表达分析奠定了基础。
- 郭晋隆阙友雄刘金仙郑益凤陈如凯许莉萍
- 关键词：全长CDNA文库
- 甘蔗谷胱甘肽硫转移酶基因的全长克隆、序列分析和表达特性
- 甘肽硫转移酶是解毒多环芳烃类物质的一类重要酶系,其编码基因的克隆、序列分析和表达特性研究可以为深入阐述该基因的确切功能积累基础资料.本研究在构建文库和大规模测序的基础上,从甘蔗叶片全长cDNA文库中获得一个甘蔗GST全长...
- 阙友雄刘金仙许莉萍郭晋隆徐景升张木清陈如凯
- 关键词：甘蔗原核表达定量PCR黑穗病菌
- 一种茶树雄蕊发育相关蛋白及其应用
- 本发明属于茶树培育技术领域，具体涉及一种茶树雄蕊发育相关蛋白及其应用。所述蛋白为TEA026040蛋白，所述TEA026040蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明发现TEA026040蛋白的编码基因，通过...
- 武广珩傅仙玉刘亭希岳佳郑烨林咏琴吕橄刘金仙张传海
- 甘蔗S-腺苷蛋氨酸脱羧酶基因Sc-SAMDC的克隆和表达分析被引量：18
- 2010年
- 【目的】克隆甘蔗(Saccharum officinarum)S-腺苷蛋氨酸脱羧酶(S-adenosylmethionine decarboxylase,SAMDC)基因,并进行序列特征、原核表达和不同逆境胁迫下表达特性分析。【方法】通过对甘蔗茎全长cDNA文库测序和分析,获得SAMDC基因cDNA全长,命名为Sc-SAMDC,并进行序列分析。随后将编码S-腺苷蛋氨酸脱羧酶的cDNA片段克隆到原核表达载体pET29a(+)中,构建融合表达质粒,转化至Esherichia coli BL21(DE3)中进行表达。最后利用定量PCR技术分析甘蔗幼苗中该基因在不同外源胁迫下的表达特性。【结果】序列分析显示,甘蔗Sc-SAMDC基因(GenBank Accession number:GQ246459)cDNA全长1968bp,存在3个读码框(袖珍读码框tORF、上游读码框uORF和主读码框mORF),mORF长1200bp,编码399个氨基酸的SAMDC酶原,预测分子量为43.6kD,该酶原含有两个高度保守的功能结构域(酶原剪切位点和PEST结构域)。原核表达产物经SDS-PAGE表明,Sc-SAMDC以融合蛋白形式表达,相对分子量约为50kD。定量PCR分析表明,Sc-SAMDC基因在聚乙二醇(PEG)、NaCl、水杨酸(SA)和H2O2外源胁迫下表达特性不同,受PEG和NaCl的诱导,受SA和H2O2的抑制。【结论】本研究成功地克隆了Sc-SAMDC基因并在原核生物中进行了表达研究,分析了该基因的表达特性,为其进一步的生物学功能研究及其应用奠定了基础。
- 刘金仙阙友雄郭晋隆许莉萍徐景升陈如凯
- 关键词：甘蔗原核表达定量PCR
- 甘蔗亲环蛋白基因的克隆和表达特性分析
- 亲环蛋白是一类广泛存在于生物细胞，且与环孢素A(cyclosporineA，CsA)有高度亲和力的细胞内结合蛋白，其表达和积累受逆境胁迫因素的调节和影响，与植物响应逆境胁迫相关。目前已经从拟南芥、大豆等作物中克隆了亲环蛋...
- 阙友雄刘金仙郭晋隆许莉萍徐景升张木清陈如凯
- 关键词：甘蔗定量PCR技术克隆表达
- 文献传递
- 甘蔗叶片和茎全长cDNA文库构建及表达序列标签（EST）分析
- 甘蔗是世界上最重要的糖料作物,也是最重要的能源作物之一,主要用于生产蔗糖,还可用于生产糖醛、纤维、葡聚糖和绿色能源乙醇等,在国际上占据重要的经济地位。从事甘蔗生产的国家都十分重视对甘蔗的研究,其中基于分子生物学的甘蔗功能...
- 刘金仙
- 关键词：甘蔗全长CDNA文库定量PCR
- 文献传递
- 甘蔗茎全长cDNA文库构建及EST序列分析被引量：2
- 2013年
- 在利用改进的Oligo-capping法构建1个高质量的甘蔗茎全长cDNA文库基础上,对该文库进行大规模测序,获得了283条5′端有效EST序列,平均长度为459 bp,经聚类和拼接获得204个假定独立转录本(TUTs),冗余序列所占比例27.9%。NCBI同源比对分析结果表明,其中132条EST拼接的103个TUTs与已知功能基因具有较高的同源性,结合拟南芥功能基因分类标准对这些TUTs进行分类,可分为12类,以参与蛋白质合成的基因最多,其次为细胞结构、蛋白质降解和贮藏、转录等类型的基因。
- 刘金仙阙友雄郭晋隆许莉萍陈如凯
- 关键词：全长CDNA文库
- 甘蔗锰超氧化物歧化酶基因的全长克隆、序列分析和表达特性
- 化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)是生物体内重要的自由基清除剂,研究表明SOD基因与植物的抗逆性密切相关.本研究在构建文库和大规模测序的基础上,从甘蔗叶片全长cDNA文库中获得一个甘蔗SOD全...
- 阙友雄刘金仙许莉萍郭晋隆徐景升张木清陈如凯
- 关键词：甘蔗原核表达定量PCR黑穗病菌
- 南方红豆杉愈伤组织诱导和继代培养体系的建立被引量：13
- 2006年
- 以南方红豆杉为材料,建立了其愈伤组织诱导与保持的技术体系,主要为:(1)南方红豆杉侧芽是诱导愈伤组织的最佳外植体;(2)南方红豆杉愈伤组织诱导的最佳培养基为:B5+2.0 mg.L-12,4-D+1.0 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-1IAA;(3)南方红豆杉愈伤组织增殖的培养基为:B5+4.0 mg.L-1NAA+0.5 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-1GA+500 mg.L-1AC+2000 mg.L-1LH.并在培养基中同时添加AC、LH和GA33种抗褐物质,取得较好的抗褐化效果.
- 李斌连邱萃刘金仙王贵荣何水林
- 关键词：南方红豆杉外植体愈伤组织诱导褐化继代培养
