刘东亮
- 作品数：18 被引量：48H指数：4
- 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院生物资源基因工程重点实验室更多>>
- 发文基金：新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金新疆维吾尔自治区自然科学基金新疆维吾尔自治区科技支疆项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 苦豆子凝集素粗品对9种常见致病菌的抑制效果被引量：1
- 2012年
- 目的研究苦豆子种子凝集素粗品对几种常见细菌的抑制作用。方法获得不同硫酸铵饱和度下苦豆子种子凝集素粗品,用鸡血和鼠血红细胞分别检测其凝集活性,并以表皮葡萄球菌、粪肠球菌、臭鼻克雷伯菌等9种细菌作为供试菌,比较不同硫酸铵饱和度下凝集素粗品的抑菌活性。结果苦豆子种子凝集素粗品对鸡、鼠血红细胞有不同程度的凝集作用,对9种供试菌均有抑菌活性,其中对福氏志贺氏菌、肺炎克雷伯氏菌、类产碱假单胞菌和大肠埃希菌的抑制效果明显。结论结果表明苦豆子凝集素粗品具有抑制细菌生长的作用,其中对所选革兰氏阴性菌(G-)的抑菌效果好,本研究为苦豆子凝集素将来进一步开发成临床抗菌药物提供了实验依据。
- 刘东亮殷晓丽王燕孙素荣
- 关键词：苦豆子凝集活性抑菌活性
- C端酰胺化提高新疆家蚕抗菌肽抗菌活性并未改变其杀菌模式
- Objective: To gain insight into the effects of amidation on the biological activity and mode of action in Cecr...
- 刘东亮刘军张富春
- 关键词：ANTIMICROBIALCECROPINAMIDATION
- 骆驼蓬种子中一种具抗肿瘤活性蛋白的分离纯化及鉴定被引量：12
- 2012年
- 骆驼蓬种子经浸提、硫酸铵沉淀、CM阳离子交换层析和Superdex 75凝胶过滤层析分离纯化得到一种具有抗肿瘤细胞增殖活性的蛋白(命名为PhLTP),经Tricine-SDS-PAGE检测为单一蛋白条带,高效液相色谱检测其表观分子量为14.8 kDa左右,表明PhLTP是由两条相同的亚基组成的蛋白。采用Edman降解法对该纯化蛋白的N-末端进行氨基酸测序,其N-末端序列与其他植物非特异性脂转移蛋白相似。对PhLTP抗肿瘤活性进行研究,结果表明其对HeLa、Eca-109、MGC-9和BEL-7404细胞都有增殖抑制活性,其中对HeLa细胞增殖的抑制作用较好,并具有浓度和时间依赖性,其IC50为45μg/mL。通过Hoechst33258染色观察细胞形态,发现PhLTP能诱导HeLa细胞发生凋亡。
- 马晓瑾吴婷罗晶晶王燕李阳刘东亮孙素荣
- 关键词：骆驼蓬分离纯化抗肿瘤诱导凋亡
- 苦豆子凝集素基因的重组表达及其抗体的制备
- 2013年
- 目的:构建苦豆子凝集素基因(SAL)原核和真核表达载体及制备高效价的抗血清。方法:将编码苦豆子凝集素基因(SAL)的ORF成熟肽片段分别克隆到原核表达载体pMAL-p2x和真核表达载体pcDNA3.1中;重组质粒pMAL-p2x-SAL转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达。对pcDNA3.1-SAL质粒进行酶切和测序鉴定;采用"DNA prime-protein boost"策略免疫小鼠制备多克隆抗体;用ELISA和Western blot检测血清效价和特异性。结果:制备的多克隆抗体效价为1:102400;Western blot分析表明多克隆抗血清特异性较好。结论:苦豆子凝集素多克隆抗血清具有很好的特异性,为进一步研究苦豆子凝集素的生物学特性奠定了基础。
- 李阳刘东亮李婷婷孙素荣
- 关键词：联合免疫
- 重组新疆出血热病毒S和M基因疫苗诱导小鼠免疫应答的评价被引量：5
- 2014年
- 目的选取新疆出血热病毒M基因（编码糖蛋白Gn,Gc）和S基因（编码核蛋白NP）部分基因片段,并进行部分片段的嵌合,分别插入至真核表达载体PVAX1中构建重组质粒,并将重组质粒分别免疫小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答的效果。方法将NP（aa1~482）、NP2（aa170~305）和糖蛋白Gn（aa529~820）、Gc（aa1050~1697）片段,及Gc-NP2片段分别构建到真核表达载体PVAX1上构建重组质粒,用重组质粒免疫小鼠,通过T细胞增殖试验,细胞因子含量测定和ELISA对免疫效果进行评价。结果经双酶切鉴定和DNA测序证实重组质粒构建正确。pVAX1-NP2实验组小鼠的血清抗体效价可以达到1∶6 400,pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2实验组小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显,两组的IFN-γ的表达水平也高达（865.15±6.29）pg/mL及（1727.21±33.93）pg/mL,与对照组相比,差异具有统计学意义（P〈0.01）。pVAX1-NP2及pVAX1-Gn实验组IL-4的表达水平为（19.11±1.20）pg/mL和（20.07±1.67）pg/mL,都显著高于对照组的（9.35±1.82）pg/mL（P〈0.05）。结论成功构建了多个重组真核表达载体,免疫小鼠后获得了效价高,特异性好的抗体。各重组质粒都激起了较强的体液免疫及细胞免疫,pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2实验组效果最好,可将其作为新疆出血热病毒的候选疫苗。
- 李阳刘东亮汪梅芳武勇凯王咏星李轶杰彭倩马洁杨建华孙素荣
- 关键词：新疆出血热病毒基因免疫基因疫苗
- 吡唑啉酮配合物杀菌抗肿瘤活性及与DNA的作用
- 2013年
- 目的:合成5种吡唑啉酮金属配合物,测定其杀菌抗肿瘤活性及与DNA的作用。方法:牛津杯法和MTT法检测其杀菌抗肿瘤活性,紫外光谱法研究其与DNA的作用。结果:Cd-PMPP-SAL抗菌抗肿瘤活性较好,对金黄色葡萄球菌的最小抑制浓度为15μg/mL,对人食管癌细胞和人宫颈癌细胞作用72 h细胞存活率仅为9.67%和0.74%;该类配合物使DNA紫外吸收呈现减色效应。结论:Cd-PMPP-SAL有显著的杀菌抗肿瘤活性。
- 吴婷刘东亮石伟张富春刘浪孙素荣
- 关键词：抑菌活性抗肿瘤活性
- 苦豆子凝集素基因植物表达载体的构建及其对烟草的转化被引量：2
- 2013年
- [目的]了解苦豆子凝集素基因(SAL)的功能,将该基因构建到植物表达载体并转化烟草,获得转基因植株。[方法]利用RT-PCR技术,提取苦豆子总RNA进行反转录得到cDNA,通过PCR扩增得到苦豆子凝集素基因SAL,并将其克隆到植物表达载体pCAMBIA1301上,产生重组质粒pCAMBIA1301-SAL。采用农杆菌介导法将重组质粒转化烟草,并进行分析鉴定。[结果]构建了植物表达载体pCAMBIA1301-SAL,转化烟草后经筛选获得76株转基因植株,经抗性筛选及PCR和RT-PCR鉴定,其中27株显示为阳性植株。[结论]苦豆子凝集素基因已经在烟草中成功表达,为进一步研究验证转基因烟草的抗病效果奠定了基础。
- 王燕李婷婷李阳吴婷王梦竹刘东亮孙素荣
- 关键词：烟草
- 新疆出血热病毒核蛋白多克隆抗体的制备及其免疫学评价被引量：1
- 2013年
- 目的原核细胞中表达、纯化新疆出血热病毒BA88166毒株核蛋白(NP)并制备及鉴定抗NP蛋白的多克隆抗体。方法采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出BA88166毒株S基因的cDNA片段,将其构建到原核表达载体pET-32a上,形成重组原核表达质粒pET-88166S。构建好的质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,经镍柱亲和层析法纯化NPHis融合蛋白,SDS-PAGE分析蛋白相对分子质量(M r)。用该纯化蛋白免疫新西兰白兔制备抗血清,ELISA和Western blot法检测血清效价和特异性。结果双酶切鉴定和DNA测序证实构建的pET-88166S重组表达载体正确,目的基因序列与GenBank中公布的序列一致,在E.coli BL21中表达的NP-His融合蛋白经SDS-PAGE分析,其M r约为66 000。ELISA检测抗体效价高于1∶25 600,蛋白免疫印迹实验结果表明抗体能特异性识别新疆出血热病毒YL04057毒株的NP蛋白及其截短蛋白。结论成功获得新疆出血热病毒NP-His融合蛋白,得到了特异性兔抗NP蛋白多克隆抗体。
- 刘东亮李阳赵晶吴婷孙素荣
- 关键词：新疆出血热病毒核蛋白原核表达多克隆抗体
- 一种骆驼蓬脂转移蛋白及其制备方法和应用
- 骆驼蓬脂转移蛋白PHP，本发明涉及一种具有抗真菌、抑癌及抗病毒活性的新型蛋白质的制备和应用。以植物中药骆驼蓬种子为原料，制备工艺步骤为：粗品制备、阳离子交换层析分离和分子筛纯化。经逐步分离收集具抗菌活性的纯化组分，透析除...
- 孙素荣马晓瑾刘东亮吕慧李阳张富春
- 重组细胞因子在病毒疫苗中的应用进展被引量：1
- 2014年
- 细胞因子(cytokine)是由多种细胞分泌能够调节细胞生长和分化、具有免疫功能并与炎症反应密切相关的分泌型蛋白,可作为免疫佐剂用以增强病毒疫苗的疗效。近年来,随着一些细胞因子(IL-2、TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-10等)相继被被克隆成功,重组细胞因子在抗病毒疫苗中的作用愈加重要。运用原核、真核或病毒等载体,通过构建细胞因子重组质粒表达重组蛋白,从而发挥其免疫佐剂的活性。综述了重组细胞因子在病毒疫苗中所发挥的作用,以及在一些重要病毒疫苗中的应用概况。
- 段晓梅王梦竹刘东亮李阳孙素荣
- 关键词：免疫佐剂重组蛋白TNF-ΑIL-10细胞生长
